張建軍，王景霞，李偉，歐麗娜，陳振振，葛陽

白芍為毛茛科植物芍藥Paeonia lactiflora Pall.的根，味苦、酸，性微寒，歸肝、脾經(jīng)。酸性收斂，有補(bǔ)血斂陰，柔肝緩急之功，因而白芍既能養(yǎng)肝血，又能柔肝體，最能順應(yīng)肝之特性，為養(yǎng)血柔肝的代表[1]?！陡登嘀髋啤吩趹?yīng)用白芍的34證中，以白芍為君藥者12證，其病機(jī)以肝失條達(dá)，氣郁不舒為主。傅氏曾言: “病之在肝者，(白芍)尤不可不用?！备涡远嘤?，養(yǎng)血柔肝解郁，是白芍臨床應(yīng)用的一個(gè)重要特色[2]。

白芍的主要成分為一組單萜苷類物質(zhì)，包括芍藥苷（Paeoniflorin，PF）、芍藥內(nèi)酯苷(albiflorin，AF)等，已有研究表明芍藥苷有多方面藥理活性[3～4]，而白芍另一主要成分芍藥內(nèi)酯苷藥理作用的報(bào)道尚不多見。據(jù)報(bào)道，白芍水煎劑、乙醇提取物、總單萜苷以及芍藥苷有抗抑郁作用[5～9]。本文根據(jù)傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論對(duì)白芍的認(rèn)識(shí)，以及白芍的中醫(yī)臨床應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)和現(xiàn)代研究報(bào)道，對(duì)芍藥內(nèi)酯苷進(jìn)行抗抑郁作用的研究，以期進(jìn)一步揭示白芍抗抑郁的有效成分。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)藥物

受試藥：芍藥內(nèi)酯苷，自制，純度大于96%；陽性藥：鹽酸氟西?。‵luoxetine, Prozac百憂解），禮來蘇州制藥有限公司，批號(hào)：A333341-070608。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

ICR小鼠，雄性，體重18-22g。由維通利華動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，合格證編號(hào)：SCXK（京）2007-0001。動(dòng)物購入后，適應(yīng)一周，常規(guī)飼養(yǎng)。

1.3 儀器

JZ100型100g張力換能器(高碑店市新航機(jī)電設(shè)備有限公司)，Medlab生物信號(hào)采集系統(tǒng)（南京易美科技有限公司），Sony數(shù)碼攝像機(jī)（上海索廣電子有限公司），XZC-1型小鼠自主活動(dòng)儀（黑龍江省牡丹江市中華電器廠），秒表，玻璃缸。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 分組和給藥

取正常小鼠100只，按隨機(jī)區(qū)組法分為5組，即空白組、百憂解組、芍藥內(nèi)酯苷14、7、3.5mg/kg劑量組。各組均按0.2ml/l0g體重灌胃，空白組給去離子水。以上各組連續(xù)7天給藥，于末次給藥1h后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

2.2 小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)[10]

將小鼠尾端(距尾尖2cm處)用膠布固定在100g張力換能器的連線上，使其呈倒懸狀態(tài)，頭部離實(shí)驗(yàn)臺(tái)約15cm，換能器連接到Medlab生物信號(hào)采集系統(tǒng)，適應(yīng)2min后，記錄4min內(nèi)的不動(dòng)時(shí)間(s)。

2.3 小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)[10]

將小鼠單個(gè)放入高20cm、直徑18cm、水深10cm、水溫23±2℃的水缸中，觀察6min，適應(yīng)2min，記錄后4min內(nèi)累計(jì)不動(dòng)時(shí)間(s)。

2.4 對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響[10]

將小鼠放入小鼠光電計(jì)數(shù)儀活動(dòng)箱，適應(yīng)環(huán)境10min后，觀察5min內(nèi)小鼠的活動(dòng)次數(shù)。每只小鼠測(cè)試完畢用濕布擦拭活動(dòng)儀，清除糞便，繼用干布擦凈后再進(jìn)行下一只小鼠的測(cè)試。

2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 芍藥內(nèi)酯苷對(duì)小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間的影響

結(jié)果表明，給予芍藥內(nèi)酯苷14，7mg/kg能明顯縮短小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間，與空白組比較差異顯著（P<0.01，0.05）。見表1。

表1 芍藥內(nèi)酯苷對(duì)小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間的影響（）

表1 芍藥內(nèi)酯苷對(duì)小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間的影響（）

注：與空白組比較， ** P<0.01，* P<0.05

組別 劑量(mg/kg) n 不動(dòng)時(shí)間（s）空白組 —— 20 64.92±54.620鹽酸氟西汀 3.5 20 30.15±44.888*芍藥內(nèi)酯苷 14 20 27.45±34.097**7 20 33.65±43.762*3.5 20 44.85±59.695

3.2 芍藥內(nèi)酯苷對(duì)小鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間的影響

結(jié)果顯示，芍藥內(nèi)酯苷14，7mg/kg均能明顯縮短小鼠游泳不動(dòng)時(shí)間，與空白組比較差異顯著（P<0.05），結(jié)果見表2。

表2 芍藥內(nèi)酯苷對(duì)小鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間的影響（）

表2 芍藥內(nèi)酯苷對(duì)小鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間的影響（）

注：與空白組比較， * P<0.05

組別 劑量(mg/kg) n 不動(dòng)時(shí)間（s）空白組 —— 20 89.115±35.391鹽酸氟西汀 3.5 20 56.725±31.340*芍藥內(nèi)酯苷 14 20 55.335±30.684*7 20 63.025±39.461*3.5 20 75.763±36.892

3.3 芍藥內(nèi)酯苷對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響

結(jié)果顯示，各劑量芍藥內(nèi)酯苷對(duì)小鼠的自主活動(dòng)無明顯影響( P > 0.01)，提示芍藥內(nèi)酯苷無中樞興奮或抑制作用，結(jié)果見表3。

表3 芍藥內(nèi)酯苷對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響（）

表3 芍藥內(nèi)酯苷對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響（）

組別 劑量(mg/kg) n 活動(dòng)次數(shù)空白組 —— 20 125.00±32.78鹽酸氟西汀 3.5 20 101.87±33.47芍藥內(nèi)酯苷 14 20 101.27±43.43 7 20 102.20±34.48 3.5 20 107.13±20.55

4 討論

肝郁，中醫(yī)認(rèn)為可引起情志疾病，與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的慢性心理應(yīng)激（應(yīng)激）一致，而應(yīng)激可導(dǎo)致抑郁癥。應(yīng)激損傷的病位主要在肝[11]?！案误w陰而用陽”，性剛而喜柔，肝之體以陰為養(yǎng)，以柔為生，藏血充足是疏泄正常的前提，因此，養(yǎng)血柔肝解郁至關(guān)重要。治肝大家王旭高體會(huì)“肝氣脹甚，疏之更甚者，當(dāng)柔肝”。張山雷指出：“肝陰耗損之證，專事疏肝不獨(dú)無效，反增其燥傷陰血，柔可馭之。”葉天士云：“肝為剛臟，當(dāng)濟(jì)之以柔藥”。解郁多用疏肝理氣法，但如果患者素秉陰虛之質(zhì)，或郁久化熱傷陰者，即不可再用疏理，以疏理之藥多香燥，往往出現(xiàn)愈疏愈郁，而柔肝解郁法即為有效良法，白芍即為中醫(yī)應(yīng)用該法的首選藥物。

本實(shí)驗(yàn)采用小鼠抑郁動(dòng)物模型對(duì)芍藥內(nèi)酯苷進(jìn)行研究，探討其抗抑郁作用。小鼠懸尾試驗(yàn)和小鼠強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)為經(jīng)典的抗抑郁小鼠實(shí)驗(yàn)，具有簡單、敏感和可靠性較強(qiáng)的特點(diǎn)[12]，因此本研究首先采用這兩個(gè)模型結(jié)合小鼠自主活動(dòng)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行初步研究，結(jié)果表明芍藥內(nèi)酯苷具有抗抑郁作用。

已有研究報(bào)道和本研究結(jié)果提示，白芍抗抑郁的主要有效成分可能是芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷，兩者是通過單獨(dú)的機(jī)制來發(fā)揮抗抑郁作用，還是具有協(xié)同作用，或是兩者兼具，還有待于進(jìn)一步研究。本研究為深入研究白芍抗抑郁的有效成分和作用機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。

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