劉繼倩 宋馳萍 駱玲飛 王海青 歐陽霖

兩種培養(yǎng)基在健康人群中沙門菌檢測(cè)的比較

劉繼倩 宋馳萍 駱玲飛 王海青 歐陽霖

目的比較沙門菌科瑪嘉顯色培養(yǎng)基(簡(jiǎn)稱CAS)和傳統(tǒng)WS培養(yǎng)基在健康人群體檢中沙門菌檢測(cè)的效果。方法用上述兩種培養(yǎng)基對(duì)917件肛拭標(biāo)本進(jìn)行沙門菌的分離鑒定，比較其分離效果。結(jié)果從917件標(biāo)本中，共分離出18株沙門菌，WS培養(yǎng)基的陽性率為0.55%，CAS培養(yǎng)基的陽性率為1.42%(χ2=6.13，P＜0.05)，二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論CAS培養(yǎng)基可提高沙門菌的檢出率，是理想的沙門菌選擇性培養(yǎng)基，推薦使用CAS作為分離沙門菌的培養(yǎng)基。

沙門菌;WS培養(yǎng)基;科瑪嘉顯色培養(yǎng)基(CAS)

沙門菌屬是腸桿菌科中一類重要的人畜共患病病原體，食品是其傳播主要媒介［1-3］。至2007年底，發(fā)現(xiàn)的感染沙門菌已近3000個(gè)血清型，我國(guó)共發(fā)現(xiàn)322個(gè)不同血清型。傳統(tǒng)的用于沙門菌分離的培養(yǎng)基都是依據(jù)其生化特性而制定的，如不發(fā)酵乳糖，產(chǎn)生硫化氫等。而法國(guó)科瑪嘉公司(CHROM agar)的沙門菌顯色培養(yǎng)基CAS，在其培養(yǎng)基上培養(yǎng)24 h后呈現(xiàn)紫色菌落，腸桿菌科其他菌落呈現(xiàn)無色或藍(lán)色。為提高沙門菌檢出率，本文用上述兩種培養(yǎng)基作為沙門菌分離的培養(yǎng)基，比較其分離效果。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 閔行區(qū)飲食服務(wù)及公共衛(wèi)生從業(yè)人員健康體檢，采集肛拭標(biāo)本共917份。

1.2 培養(yǎng)基及試劑 CAS由法國(guó)科瑪嘉微生物技術(shù)有限公司(CHROM agar)提供;卡里-布萊爾轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基(Cary Blair TransportMedium)、WS培養(yǎng)基、SF增菌液、腸道雙糖瓊脂等均由上海市疾病預(yù)防控制中心提供。沙門菌診斷血清56種，由衛(wèi)生部成都生物制品研究所制備。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 依據(jù)WS 271-2007附錄B《感染性腹瀉診斷標(biāo)準(zhǔn)》。

1.3.1 增菌培養(yǎng) 將肛拭卡里于SF增菌液，37℃培養(yǎng)過夜。

1.3.2 平板分離 將增菌液轉(zhuǎn)種于WS培養(yǎng)基和科瑪嘉培養(yǎng)基兩種平板上，于37℃培養(yǎng)24 h。則在WS培養(yǎng)基菌落特點(diǎn)為無色半透明，中等大小、圓形、濕潤(rùn)，邊緣整齊，中心黑色［4］。

1.3.3 生化試驗(yàn) 挑取可疑菌落轉(zhuǎn)種到雙糖管作初步篩選，主要觀察生化指標(biāo)，即葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，甘乳糖+，乳糖-，蔗糖-，硫化氫+，動(dòng)力+。

1.3.4 血清學(xué)分型鑒定 沙門菌的分型鑒定主要采用血清學(xué)的方法，按照考夫曼-懷特沙門菌屬抗原表判定菌型鑒定的方法。從營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面上挑取可疑菌落分別與A-F多價(jià)O血清和O因子血清及H因子血清進(jìn)行玻片凝集試驗(yàn)［5］，若凝集即為陽性，并用生理鹽水作陰性對(duì)照。

2 結(jié)果

2.1 兩種培養(yǎng)基陽性率比較 用WS培養(yǎng)基檢出沙門菌的陽性率為0.55%，用CAS培養(yǎng)基檢出沙門菌的陽性率為1.42%，結(jié)果表明CAS培養(yǎng)基比傳統(tǒng)的WS培養(yǎng)基檢出沙門菌的陽性率高，(見表1)。

2.2 兩種培養(yǎng)基的可疑陽性率比較 WS培養(yǎng)基可疑陽性率比較為10.91%，CAS培養(yǎng)基可疑陽性率為2.51%，表明WS培養(yǎng)基可疑陽性率明顯高于CAS培養(yǎng)基可疑陽性率，(見表2)。

2.3 可疑陽性中檢出真陽性率5.00%，CAS培養(yǎng)基真陽性率為56.50%，(見表3)。

表2 兩種培養(yǎng)基的可疑陽性率比較(例)

3 討論

3.1 陽性檢出率比較 經(jīng)本次用兩種不同培養(yǎng)基對(duì)健康人群肛拭標(biāo)本中的沙門菌進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果是WS培養(yǎng)基的陽性率為0.55%，CAS培養(yǎng)基的陽性率為1.42%，表明用CAS培養(yǎng)基檢測(cè)沙門菌的陽性率明顯高于WS培養(yǎng)基，顯示了CAS培養(yǎng)基不僅可提高陽性率，還對(duì)于臨床及早發(fā)現(xiàn)傳染源，切斷傳播途徑，防止食物中毒的發(fā)生提供依據(jù)。

3.2 兩種培養(yǎng)基在實(shí)際中的應(yīng)用 目前應(yīng)用于沙門菌分離培養(yǎng)的培養(yǎng)基很多，絕大多是大腸埃希菌、枸菌菌株在這些培養(yǎng)基上發(fā)育良好，而沙門菌的陽性率偏低。另一方面，用傳統(tǒng)WS培養(yǎng)基分離時(shí)，各種菌落形態(tài)、顏色單調(diào)，須憑經(jīng)驗(yàn)鑒別，特別是不能區(qū)別緩慢發(fā)酵乳糖的菌株，使得可疑菌落太多。

CAS培養(yǎng)基克服了上述諸多的不足，在培養(yǎng)基上形成紫色或紫紅色直徑1 mm的特征性菌落，明顯區(qū)別于其他雜菌，本次試驗(yàn)沙門菌的可疑陽性率為2.51%，可疑陽性中檢出的真陽性率為56.50%。因此用CAS培養(yǎng)基代替?zhèn)鹘y(tǒng)WS培養(yǎng)基可以減少可疑菌落的挑取，并且可避免對(duì)遲緩發(fā)酵乳糖的沙門菌造成的漏檢，還可以提高沙門菌的陽性率。

［1］ 曾曉芳.蓄產(chǎn)品中沙門氏菌污染的檢測(cè)與控制.四川畜牧獸醫(yī)，2003，30(4):28-29．

［2］ 王章云.腸炎沙門氏菌引起的食物中毒細(xì)菌學(xué)調(diào)查.中國(guó)人蓄共患病雜志，1999，15(3):155．

［3］ 吳和平.不容忽視的沙門氏菌.國(guó)外畜牧科技，1992，19，(2): 50-51．

［4］ 張繆偉，邵燕，吳建中.利用WS瓊脂特殊菌落挑取沙門氏菌.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2000，10(2):236．

［5］ 何曉青.衛(wèi)生防疫細(xì)菌檢驗(yàn).新華社出版社，1989:301-317．

201101上海市閔行區(qū)疾病預(yù)防控制中心

表3 可疑陽性中檢出真陽性率比較(例)

注:χ2檢驗(yàn)χ2=35.68，P＜0.05

培養(yǎng)基 標(biāo)本數(shù) 陽性數(shù) 可疑陽性率% WS培養(yǎng)基100 5 5.00 CAS培養(yǎng)基 23 13 56.50合計(jì)123 18 14.63

根據(jù)上述表和表3，可以判斷出WS培養(yǎng)基可疑陽性率高于CAS培養(yǎng)基可疑陽性率，但從可疑陽性中檢出沙門菌真陽性率要比CAS培養(yǎng)基低。