蘭長發(fā) 桑國俊
(1.甘肅省平?jīng)鍪嗅轻紖^(qū)畜牧技術(shù)服務(wù)中心,平?jīng)?744000;
2.甘肅省畜牧獸醫(yī)研究所,平?jīng)?744000)
雞傳染性腦脊髓炎的防治
蘭長發(fā)1桑國俊2
(1.甘肅省平?jīng)鍪嗅轻紖^(qū)畜牧技術(shù)服務(wù)中心,平?jīng)?744000;
2.甘肅省畜牧獸醫(yī)研究所,平?jīng)?744000)
雞傳染性腦脊髓炎(AE)是一種主要侵害雛雞的傳染病,以共濟(jì)失調(diào)和快速震顫,特別是頭部震顫為特征。AE是一種經(jīng)蛋傳播的疾病。經(jīng)種蛋傳播,其子代在4周齡內(nèi)出現(xiàn)臨床癥狀與死亡,水平傳播出現(xiàn)癥狀率很低。1932年美國首先報道此病,其后在世界各地陸續(xù)有此病流行的報告。我國在1980年曾有疑似雞腦脊髓炎的報道;1982年通過病理組織學(xué)方法,作出了此病的診療報告;1983年通過流行病學(xué)的調(diào)查、病理組織學(xué)的研究和人工發(fā)病等試驗,確診了此病,進(jìn)一步證實AE在我國的存在。雞胚敏感試驗證明此病在集約化的禽場中已廣泛存在。
雞傳染性腦脊髓炎病毒(AEV)屬于小RNA病毒科的腸道病毒屬。病毒粒子具有六邊形輪廓,無囊膜,病毒直徑約有26 nm,呈20面體對稱,其衣殼由32或42個殼粒組成,病毒在氯化銫中的浮密度為1.31~1.33 g/ml。
病毒對氯仿、乙醚、酸、胰酶、胃蛋白酶及DNA酶有抵抗力,所有AEV的不同分離株屬同一血清型,但各毒株的致病性和對組織的親嗜性不同,大部分野外分離株為嗜腸性,且易經(jīng)口傳染給雞并從糞便排毒,通過垂直傳播或出殼早期水平傳播使易感雛雞致病,在這些病例中,一般表現(xiàn)有神經(jīng)癥狀。野外分離株通過易感小雞的腦內(nèi)接種也能產(chǎn)生神經(jīng)癥狀。
該病毒的雞胚適應(yīng)毒株與野毒株的致病性有明顯的不同,雞胚適應(yīng)株已失去野毒株的嗜腸道特性,因此,經(jīng)口給予胚適應(yīng)株不會引發(fā)傳染,病毒也不能在腸道中復(fù)制。非經(jīng)口途徑接種胚適應(yīng)株不會在糞便中排毒。胚適應(yīng)株是高度嗜神經(jīng)性,通過腦內(nèi)、皮下、肌肉等非經(jīng)口方法接種可引起嚴(yán)重的神經(jīng)癥狀。這種毒株一般不能水平傳播。常用的胚適應(yīng)毒株是VR株,用胚適應(yīng)株接種易感雞胚孵育至18 d可出現(xiàn)特征性病變,如嚴(yán)重肌肉營養(yǎng)不良、胚體矮化等。
無論是自然野毒株或胚適應(yīng)株,均可在敏感的雛雞、雞胚和雞胚的多種細(xì)胞如腦細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、腎細(xì)胞和胰細(xì)胞及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞上生長。細(xì)胞培養(yǎng)一般無細(xì)胞病變,用易感雞胚于5~6 d齡經(jīng)卵黃囊接種是繁殖AEV最常用的方法。
自然感染見于雞、雉、鵪鶉和火雞等,雛禽有明顯的臨床癥狀。雛鴨、珍珠雞、雞等對本病最易感。小鼠、豚鼠、家兔和猴對病毒的腦內(nèi)接種有抵抗力。
經(jīng)腦內(nèi)接種很易在小雞復(fù)制AE,此病可通過垂直傳播,也能水平傳播。AE的主要傳播方式是消化道傳播,感染雞通過糞便排出病毒,其排毒時間約為5~14 d,感染時雞齡越小,排毒時間越長。病毒在環(huán)境中有較強(qiáng)的抵抗力,在墊料中可存活4周以上,易感雞接觸到被污染的飼料、飲水、用具等而被感染。垂直傳播是本病主要的傳播方式,產(chǎn)蛋雞感染3周內(nèi)所產(chǎn)的蛋帶有病毒。一些嚴(yán)重感染的胚蛋在孵化后期死亡。大部分的雞胚可以孵化出殼,但出殼的雛禽在出殼數(shù)天內(nèi)陸續(xù)出現(xiàn)典型的臨診癥狀。一般在感染之后3~4周,種蛋內(nèi)的母源抗體可保護(hù)雛雞順利出殼并不出現(xiàn)AE的臨診癥狀。
本病一年四季均可發(fā)生,發(fā)病率及死亡率隨雞群的易感雞多少、病原的毒力高低、發(fā)病的日齡大小不同而有所不同。雛雞發(fā)病率一般為40%~60%,死亡率10%~25%,甚至有更高,如畢英佐等報道廣東某種雞場用開產(chǎn)后一個月內(nèi)的蛋孵出的1~6批雛雞發(fā)生AE,死亡率高達(dá)81%~100%。
經(jīng)垂直傳播而感染的小雞潛伏期1~7 d,經(jīng)水平傳播感染的小雞,其潛伏期為11 d以上(12~30d)。
在自然暴發(fā)的病例中,雛雞出殼后就陸續(xù)發(fā)病,病雛最初表現(xiàn)為遲鈍,精神沉郁,小雞不愿走動或走幾步就蹲下來,常以跗關(guān)節(jié)著地,繼而出現(xiàn)共濟(jì)失調(diào),走路蹣跚,步態(tài)不穩(wěn),驅(qū)趕時勉強(qiáng)用跗關(guān)節(jié)走路并拍動翅膀。病雛一般在發(fā)病3 d后出現(xiàn)麻痹而倒地側(cè)臥,頭頸部震顫一般在發(fā)病5 d后逐漸出現(xiàn),一般呈陣發(fā)性音叉式的震顫;人工刺激,如給水加料、驅(qū)趕、倒提時可激發(fā)。有些病雞趾關(guān)節(jié)卷曲、運動障礙、羽毛不整和發(fā)育受阻,平均體重明顯低于正常水平。部分存活雞可見一側(cè)或兩側(cè)眼球的晶狀體混濁或淺藍(lán)色褪色,眼球增大及失明。
發(fā)病早期小雞食欲尚好,但因運動障礙,病雞難以接近食槽和水槽,因饑渴衰竭死亡。在大群飼養(yǎng)條件下,雞只也會互相踐踏或繼發(fā)細(xì)菌性感染而死亡。中成雞感染除出現(xiàn)血清學(xué)陽性反應(yīng)外,無明顯的臨診癥狀及肉眼可見的病理變化。產(chǎn)蛋雞感染后產(chǎn)蛋下降16%~43%。產(chǎn)蛋下降后1~2周恢復(fù)正常。孵化率可下降10%~35%,蛋重減少,除畸形蛋稍多外,蛋殼顏色基本正常。
一般內(nèi)臟器官無特征性的肉眼病變,個別病例能見到腦膜血管充血、出血。如細(xì)心觀察可偶見病雛肌胃的肌層有散在的灰白區(qū)。成年雞發(fā)病無上述病變。
主要病變集中在中樞神經(jīng)系統(tǒng)和部分內(nèi)臟器官如肌胃、腺胃、胰腺、心肌和腎臟等,而周圍神經(jīng)無病變。中樞神經(jīng)主要顯示病毒性腦炎的病變,如神經(jīng)元變性,膠質(zhì)細(xì)胞增生和血管套現(xiàn)象。
在延腦和脊髓灰質(zhì)中可見神經(jīng)元中央染色質(zhì)溶解、神經(jīng)元細(xì)胞腫大、樹突和軸突消失、細(xì)胞核偏移或消失,僅剩下染色均勻的粉紅色或紫紅色神經(jīng)元殘跡。在中腦、小腦的分子層、延腦和脊髓中發(fā)現(xiàn)有膠質(zhì)細(xì)胞增生灶。腦組織內(nèi)有以淋巴細(xì)胞性管層為主的血管套現(xiàn)象。
內(nèi)臟器官的病變表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞灶性增生,在腺胃粘膜和肌層、胰腺、肌胃、腎等器官切片中均有發(fā)現(xiàn)。
根據(jù)雛禽出殼后陸續(xù)出現(xiàn)癱瘓、早期食欲尚好、剖檢無明顯的特征性肉眼變化,追蹤到其種雞有短暫的產(chǎn)蛋下降,且某段時間內(nèi)孵出的多批小雞需分發(fā)到不同地方飼養(yǎng),但均出現(xiàn)麻痹、震顫和死亡等情況,結(jié)合組織病理學(xué)特征性變化,即可作出初步的診斷。確診應(yīng)進(jìn)行實驗室診斷[4]。
5.1.1 雞胚敏感試驗
經(jīng)蛋黃囊途徑對6日齡的雞胚接種100 EID50/0.1ml的AE雞胚適應(yīng)株,接種后觀察12 d,檢查雞胚有無特征性病變,如果100%雞胚有病變,種雞被認(rèn)為易感的,50%以下有病變表明雞群有免疫力,中間數(shù)表明雞群免疫不全或有近期的感染。
5.1.2 瓊脂擴(kuò)散凝集試驗(AGP)
利用AE-VR雞胚適應(yīng)株或分離的野毒株分別接種SPF雞胚,收集發(fā)病胚的腦、胃腸和胰腺制成瓊脂擴(kuò)散抗原。在含20%NaCl和0.5%苯酚的0.8%瓊脂凝膠中,用這種抗原進(jìn)行AGP試驗檢測AE抗體,結(jié)果穩(wěn)定,特異性強(qiáng),方法簡便迅速。
5.1.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
可定量檢測血清中的AE抗體水平,加上每次可同時檢測大量的血清樣品,并容易將結(jié)果輸入計算機(jī)軟件程序中進(jìn)行處理,因此,適用于禽場進(jìn)行AE抗體的快速檢測和評價AE抗體水平。其ELISA滴度用ET表示,同時用協(xié)同變異百分率(CV)表示群體內(nèi)抗體的整齊度。
5.2.1 與雛腳弱、癱瘓等癥狀的疾病鑒別診斷
雞新城疫:有呼吸道癥狀,拉綠糞,存活雞有頭頸扭曲的癥狀,腺胃及消化道有出血。HI抗體明顯增高,組織學(xué)雖有病毒性腦炎的病變,但腺胃、肌胃、胰腺等內(nèi)臟器官組織學(xué)無淋巴細(xì)胞灶性增生,分離病毒能凝集雞的紅細(xì)胞。
馬立克氏?。号R診死亡一般發(fā)生在70日齡以后,而有內(nèi)臟腫瘤病變和外周神經(jīng)病變,如單側(cè)性的坐骨神經(jīng)腫大。AE無外周神經(jīng)系統(tǒng)的病變。
病毒性關(guān)節(jié)炎:自然感染多發(fā)于4~7周齡雞,病雞跛行,跗關(guān)節(jié)腫脹,雞群中有部分雞呈現(xiàn)發(fā)育遲緩、嘴腳蒼白、羽毛生長不良等,心肌纖維間有異噬細(xì)胞浸潤。
維生素E-硒缺乏癥:肉眼可見腦軟化,小腦充血、出血、腫脹和腦回不清等病變,組織學(xué)病變?nèi)缇植咳毖詨乃溃撍枨实?。硒缺乏病可見腹部皮下有多量液體積聚,有時呈藍(lán)紫色,有些雞肌肉蒼白,胸肌有白線狀壞死的肌纖維。補(bǔ)充維生素E、硒合劑能控制病情。
維生素B2缺乏:常發(fā)生于2周齡雛雞。雛雞腳趾向內(nèi)彎曲,腿麻痹,行走困難,剖檢時見坐骨神經(jīng)比正常腫大3~4倍。幼雛維生素B2缺乏是由種雞群B2缺乏引起的,每只雞每天喂服維生素B25mg可得到改善。維生素B1缺乏、煙酸缺乏、維生素D3缺乏也會引起腳弱癥狀,適當(dāng)?shù)匮a(bǔ)充能控制病情,改善癥狀。
中毒:藥物中毒如抗球蟲藥拉沙星菌素使用時間過長或與氯霉素合用;莫能霉素或鹽霉素與紅霉素、氯霉素、枝原凈等同時使用,會使雛雞腳軟,共濟(jì)失調(diào)等。
另外,近年來因使用含氟過高的磷酸氫鈣而造成的氟中毒,雛雞腿無力,走路不穩(wěn),嚴(yán)重時出現(xiàn)跛行或癱瘓,剖檢見雞胸骨發(fā)育與日齡不符,腿骨松軟,易折而不斷,主要原因是高氟進(jìn)入機(jī)體后與血鈣結(jié)合成不溶性氧化物使血鈣降低,為補(bǔ)充血鈣,骨鈣不斷釋放而導(dǎo)致骨鈣化不全。
5.2.2 與引起產(chǎn)蛋下降、癥狀不明顯、雞只不死亡類病的鑒別診斷
產(chǎn)蛋下降綜合征:產(chǎn)蛋嚴(yán)重下降,持續(xù)時間長,恢復(fù)后產(chǎn)蛋很難達(dá)到原來水平,且蛋殼變白色,產(chǎn)無殼蛋、軟殼蛋或畸形蛋。減蛋后1周取輸卵管的刮落物作病料接種鴨胚,可分離到能凝集雞血細(xì)胞的腺病毒。
傳染性支氣管炎:有呼吸性癥狀,產(chǎn)蛋下降,畸形蛋增加,蛋的品質(zhì)變化,蛋清稀薄如水。
非典型新城疫:只有產(chǎn)蛋下降,雞無明顯的癥狀,減蛋1周后,HI抗體明顯上升。
低致病力毒株引起的禽流感:只有產(chǎn)蛋下降,通過血清學(xué)及病原分離進(jìn)行鑒別。
加強(qiáng)消毒與隔離,防止從疫區(qū)引進(jìn)種苗和種蛋。雞感染后1個月內(nèi)的蛋不宜孵化。目前尚無特異性治療AE的方法。將輕癥雞隔離飼養(yǎng),加強(qiáng)管理并投與抗生素預(yù)防細(xì)菌感染,維生素E、維生素B1、谷維素等藥可保護(hù)神經(jīng)和改善癥狀。重癥雞應(yīng)挑出淘汰。全群還可用抗AE的卵黃抗體作肌內(nèi)注射,雛雞0.5~1.0ml/只,1次/d,連用2 d。
AE凍干苗。用于預(yù)防雞腦脊髓炎病毒感染,可用于10周齡以上的雞,作種母雞可在10~12周齡時和產(chǎn)蛋前3周各接種1次。接種后14 d產(chǎn)生免疫力,免疫期為6個月。
AE油乳劑滅活苗。滅活苗用于預(yù)防腦脊髓炎或用于種雞群,使后代雛雞獲得母源抗體。常用于10周齡及18~19周齡種雞。接種后9~14 d產(chǎn)生免疫力,免疫期可持續(xù)9個月。