劉彩霞

（許昌市疾病預(yù)防控制中心，河南 許昌 461000）

紅霉素顆粒和干混懸劑溶出度HPLC測(cè)定法的建立研究

劉彩霞

（許昌市疾病預(yù)防控制中心，河南 許昌 461000）

目的 研究建立紅霉素顆粒和干混懸劑溶出度HPLC測(cè)定法。方法 取出樣本，按溶解度測(cè)定法，用乙酸緩沖液900mL作為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速是50r/min，操作45分鐘，取出溶液進(jìn)行過(guò)濾，用續(xù)濾液作供試品；再取適量紅霉素對(duì)照品，必須精密測(cè)量，將溶出介質(zhì)進(jìn)行溶解并稀釋成0.08mg/mL溶液，將其作為對(duì)照溶液。按下述色譜條件，經(jīng)精密測(cè)量取20μL兩中溶液，并注入色譜儀，記錄下色譜圖，計(jì)算每袋溶出量。結(jié)果 取藥廠提供的顆粒和干混懸劑，按溶出液檢測(cè)方法測(cè)定。結(jié)果表明，溶出度限度為80%。結(jié)論 采用專一性很強(qiáng)的HPLC測(cè)定法可以檢測(cè)干混懸劑和紅霉素顆粒，確定檢查干混懸劑以及紅霉素溶出度條件為：pH為5.5乙酸鹽緩沖液，槳法，濃度為0.038mmol/L緩沖液濃度，轉(zhuǎn)速為50r/min。

紅霉素顆粒；干混懸劑；溶出度；HPLC測(cè)定法

紅霉素是大環(huán)內(nèi)酯類抗生素[1]，紅霉素顆粒和干混懸劑雖收藏在中國(guó)藥典中，但是并未記載如何檢查溶出度。紅霉素顆粒是混懸顆粒，國(guó)家藥典要求均要求對(duì)紅霉素顆粒以及干混懸劑制定出溶解度檢查法。紅霉素片等口服制劑用硫酸顯色法檢查，缺乏專一性。若用荷比色法代替硫酸顯色法則實(shí)驗(yàn)結(jié)果不太理想。采用專一性很強(qiáng)的HPLC測(cè)定法檢測(cè)干混懸劑和紅霉素顆粒[2]，經(jīng)HPLC測(cè)定紅霉素在鹽酸（0.01mol/L）中不穩(wěn)定，故實(shí)驗(yàn)采用了新方法以溶出介質(zhì)。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 試藥與儀器

采用智能藥物溶出儀，液相色譜儀（自動(dòng)四元泵進(jìn)樣系統(tǒng)和真空脫氣機(jī)）。蒸餾水、色譜純、磷酸二氫銨、乙酸鈉、分析純。中國(guó)藥品制品鑒定所提供紅霉素對(duì)照品，全國(guó)多家醫(yī)藥公司提供紅霉素顆粒，干混懸劑也由全國(guó)多家制藥公司特約贊助[3]。

2 方法和結(jié)果

2.1 測(cè)定溶解度方法

取出樣本，按溶解度測(cè)定法，用乙酸緩沖液900mL作為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速是50r/min，操作45分鐘，取出溶液進(jìn)行過(guò)濾，用續(xù)濾液作供試品；再取適量紅霉素對(duì)照品，必須精密測(cè)量，將溶出介質(zhì)進(jìn)行溶解并稀釋成0.08mg/mL溶液，將其作為對(duì)照溶液。按下述色譜條件，經(jīng)精密測(cè)量取20μL兩中溶液，并注入色譜儀，記錄下色譜圖，計(jì)算每袋溶出量。

2.2 色譜條件

色譜柱：VP-ODS柱；流動(dòng)相：磷酸二氫鈉溶液（0.067mmol/L）；流速為10mL/min；以210nm定為檢測(cè)波長(zhǎng)；20微升是進(jìn)樣量。

2.3 檢測(cè)溶出度方法

2.3.1 輔助干擾實(shí)驗(yàn)

按紅霉素顆粒和干混懸劑比，制作空白樣本（不含主藥），取適量加乙酸鹽緩沖液，振蕩，稀釋到規(guī)定濃度后搖勻。過(guò)濾，按色譜條件進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示輔料不干擾。

2.3.2 線性關(guān)系

經(jīng)精密測(cè)量后取適量紅霉素對(duì)照品，用乙酸鹽緩沖液溶解后稀釋成濃度溶液，按色譜條件。結(jié)果顯示，對(duì)照品的溶液濃度范圍為20～200ug/mL，有良好線性關(guān)系。

2.3.3 溶液穩(wěn)定性

取適量紅霉素對(duì)照品溶液，按上述測(cè)定方法，在0、3、6h內(nèi)測(cè)定，結(jié)果為0.20%，且溶液6h內(nèi)保持穩(wěn)定。

2.4 樣品溶出度的測(cè)定方法

取藥廠提供的顆粒和干混懸劑，按溶出液檢測(cè)方法測(cè)定。結(jié)果表明，溶出度限度為80%。

3 討 論

3.1 如何選擇溶出介質(zhì)

紅霉素等口服制劑檢查溶出度所用介質(zhì)是鹽酸溶液（0.01mol/L）[4]，經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明，紅霉素在鹽酸中不穩(wěn)定，故需用其他的新溶出介質(zhì)。紅霉素不溶于水，在鹽酸中溶解但是不穩(wěn)定。參照同類克拉霉素檢查溶解度時(shí)用溶出介質(zhì)，將緩沖液作溶出介質(zhì)。試驗(yàn)了磷酸緩沖液以及乙酸緩沖液，結(jié)果乙酸緩沖液比較理想。因此，選用乙酸鹽緩沖液作為試驗(yàn)用的緩沖液。

3.2 緩沖液pH選擇

試驗(yàn)緩沖液pH為6.5、6.0、5.5 、5.0 、4.0，結(jié)果顯示，pH值越大，制劑越容易崩解，紅霉素溶解度降低。但當(dāng)pH為5.5時(shí)，干混懸劑以及紅霉素溶出度最大，所以將5.5作為緩沖液pH。

3.3 選擇緩沖液濃度

試驗(yàn)緩沖液濃度為0.2、0.1、0.075、0.05、0.038、0.025mol/L，結(jié)果顯示緩沖液濃度越大，制劑越不易崩解。但當(dāng)濃度為0.038mol/L時(shí)，干混懸劑以及紅霉素溶出度最大，故選0.038mol/L作為緩沖液濃度 考慮顆粒以及干混懸劑特點(diǎn)，采取槳法，轉(zhuǎn)速是50r/min。通過(guò)以上研究，確定檢查干混懸劑以及紅霉素溶出度條件為：pH為5.5乙酸鹽緩沖液，槳法，濃度為0.038mmol/L緩沖液濃度，轉(zhuǎn)速為50r/min。

[1] 王建,孟錚.羅紅霉素顆粒和干混懸劑溶出度HPLC測(cè)定法的建立[J].中國(guó)抗生素雜志,2009,34(8):489-492.

[2] 張煊,張春英,段宇,等.LC-MS-MS法研究琥乙紅霉素顆粒的生物等效性[J].中國(guó)新藥雜志,2008,17(13):1164-1167.

[3] Wang ZP,Yang Z,Ye J,et al.Capillary Electrophoresis-electrochemiluminescence Method for Simultaneous Detection of Azithrom ycin,Roxithromycin and Erythromycin Ethylsuccinate[J].Chemia Analityczna,2009,54(5):883-894.

[4] Sadeghi S,Jahani M.New Copper(II) Ion-Selective Membrane-Electrode Based on Erythromycin EthylSuccinate as a Neutral Ionophore[J].Analytical Lett,2009,42(13/15):2026-2040.

R978.1

B

1671-8194（2012）16-0083-02

10.15912/j.cnki.gocm.2012.16.319