易廷平

（重慶市永川區(qū)人民醫(yī)院，重慶 402160）

高效液相色譜法測定腎舒康膠囊淫羊藿苷含量

易廷平

（重慶市永川區(qū)人民醫(yī)院，重慶 402160）

目的:測定腎舒康膠囊中淫羊藿苷的含量。方法:采用高效液相色譜法（HPLC法），色譜柱為C18柱（250mm×4.6mm，5μm），以乙腈-水（28∶72）為流動相，檢測波長為270nm。結(jié)果:淫羊藿苷在0.24～2.40μg范圍內(nèi)線性關系良好，加樣回收率為98.51%，RSD為0.47%。結(jié)論:HPLC法簡便、準確，可用于質(zhì)量控制。

淫羊藿苷;腎舒康膠囊;HPLC

腎舒康膠囊為我院院內(nèi)制劑，由淫羊藿、川牛膝、車前草、地黃、王不留行等組成，具有益氣補腎、通淋化瘀功效。臨床主要用于腎脾兩虛、氣滯血瘀所致小腹墜脹、小便點滴不出。為有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，我們采用高效液相色譜法測定淫羊藿主要成分淫羊藿苷的含量，簡便快速，結(jié)果準確，介紹如下。

1 儀器與試藥

儀器:Waters Alliance 2695/2996型高效液相色譜儀，Empower色譜工作站（美國Waters公司），超聲波提取器（昆山市超聲儀器有限公司）。

試藥:淫羊藿苷對照品（批號110756-200810，供含量測定用，中國藥品生物制品檢定所提供），乙腈為色譜純、水為純化水，腎舒康膠囊（本院自制，批號111101，111102，111103）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱為 Phenomenex C18柱（250mm ×4.6mm，5μm），流動相為乙腈 -水（28∶72），流速為 1.0mL/min，檢測波長為270nm。理論塔板數(shù)按淫羊藿苷峰計算應不低于3000。

2.2 供試品溶液的制備

取本品裝量差異項下的內(nèi)容物，研細，取0.5g，精密稱定，加甲醇40mL，稱重，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.3 方法學考察

線性關系考察:精密稱取淫羊藿苷對照品適量，加甲醇制成每1mL含0.12mg的溶液，作為對照品溶液。精密吸取對照品溶液2、4、8、16、20μL，注入液相色譜儀，以淫羊藿苷進樣量（μg）為橫坐標，峰面積為縱坐標（Y）進行回歸分析。得回歸方程 Y=130462.80X+10624.55（r=0.9999）。結(jié)果表明，淫羊藿苷進樣量在0.24～2.40μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關系。

方法專屬性考察:按腎舒康膠囊制備工藝，制備缺淫羊藿的陰性樣品，照供試品溶液制備方法制成陰性供試品溶液。照上述色譜條件，分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性供試品溶液溶液各10μL，進樣。供試品溶液色譜圖中，在與淫羊藿苷對照品溶液色譜圖相應位置上有相同色譜峰，陰性供試品溶液無相應色譜峰，表明陰性樣品對測定無干擾，選擇性較好。

精密度試驗:精密吸取對照品溶液10μL，重復進樣5次，測定淫羊藿苷峰面積，相對標準偏差為0.85%。

穩(wěn)定性試驗:取同一供試品溶液，分別于0、2、4、8、14h進樣，結(jié)果淫羊藿苷峰面積值相對標準偏差為1.07%，表明供試品溶液穩(wěn)定性至少在14 h內(nèi)穩(wěn)定。

重現(xiàn)性試驗:按擬定的含量測定方法，取同一批樣品6份，測定，計算淫羊藿苷的含量，結(jié)果樣品中淫羊藿苷平均含量為2.20mg/粒，相對標準偏差為1.17%。

加樣回收率試驗:取已知含量的樣品6份，分別加入淫羊藿苷對照品，按擬定的供試品溶液制備方法和測定條件，測定淫羊藿苷含量，計算回收率，結(jié)果見表1 。

表1 淫羊藿苷加樣回收率試驗結(jié)果

2.4 樣品含量測定

按2.2項下制備方法制備供試品溶液，并按2.1項下測定方法測定樣品中淫羊藿苷含量，結(jié)果見表2 。

表2 樣品含量測定結(jié)果

3 討論

本含量測定方法樣品目標色譜峰與相鄰色譜峰分離良好，參照藥典方法［1］，選用乙腈-水系統(tǒng)作為流動相，基線平穩(wěn)，經(jīng)多次試驗，以乙腈-水為流動相能使樣品中淫羊藿苷峰與相鄰色譜峰達到基線分離，淫羊藿苷與相鄰色譜峰分離良好，峰形對稱，陰性對照無干擾。

供試品溶液制備方法，參考文獻報道［2-4］，分別考察:①甲醇回流提取后，加水使溶解，用乙酸乙酯提取，乙酸乙酯液蒸干，殘渣加甲醇使溶解作為供試品溶液;②甲醇超聲提取作為供試品溶液;③甲醇回流提取作為供試品溶液;④乙醇超聲提取作為供試品溶液。實驗結(jié)果表明，甲醇超聲提取作為供試品溶液，方法快速、峰形對稱。并對甲醇提取時間進行考察，分別超聲處理20、30、40min，測定樣品中淫羊藿苷含量，超聲40min，供試品中淫羊藿苷含量無增加，故選用超聲提取30min制備供試品溶液。另對甲醇用量進行試驗，結(jié)果表明加入甲醇40mL能夠使樣品中淫羊藿苷提取完全，方法重復性好、操作性強，可用于腎舒康膠囊的質(zhì)量控制。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）［M］.北京:化學工業(yè)出版社，2010.306.

［2］李英蓮，賈貴龍，車軒.HPLC測定凈石靈片中淫羊藿苷的含量［J］.中國實用醫(yī)藥，2010，5（36）:49.

［3］黃耀廣，陳秀英，陳小雪.RP-HPLC法測定補腎強身片中淫羊藿苷的含量［J］.中國藥事，2010，24（12）:1226.

［4］楊春靜.高效液相色譜法測定壯腎安神片中淫羊藿苷含量［J］.中國藥業(yè)，2010，19（21）:31.

Objective:To determine the contents of Icariin in Shenshukang Capsules.Methods:HPLCmethod was adopted and a C18 column（250mm×4.6mm，5μm）was used.Themobile phase was acetonitrile-water（28∶72）.The detection wavelength was at270nm.Results:The calibration curve of Icariin was linear in the range of0.24 ～2.40μg（r=0.9999），the averge of recovery was98.51%，RSD=0.47%.Conclusion:Themethods is simple and accurate，It can be used for quality control of Shenshukang Capsules.

Icariin;Shenshukang Capsules;HPLC

R284.1

B

1004-2814（2012）06-514-02

2012-01-19

●綜 述●