王紅娟　龔自明等

摘要：為研究氮肥對春茶鮮葉葉綠素組分含量的影響，試驗測定分析了鄂茶１號在０、３００、６００、９００、１２００ｋｇ／ｈｍ２５個氮肥處理水平下春茶鮮葉葉綠素不同組分葉綠素ａ、葉綠素ｂ和類胡蘿卜素的含量。結(jié)果表明，隨著氮肥用量的增加，春茶鮮葉葉綠素的組分含量均出現(xiàn)先增加后下降的變化趨勢，在氮肥用量為６００ｋｇ／ｈｍ２時葉綠素各組分含量較高。

關(guān)鍵詞：春茶；氮素；葉綠素組分

中圖分類號：Ｓ５７１．１；Ｓ１４３．１；Ｑ９４５．１１ 文獻標(biāo)識碼：Ａ 文章編號：0439－８114（２０12）24－5677-03

氮占茶樹［Ｃａｍｅｌｌｉａｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ］全株干重的１．５％～２．５％，是茶樹各組織中蛋白質(zhì)和核酸的組成成分，同時又是茶葉中葉綠素、酶以及核酸、維生素、生物堿等生物活性物質(zhì)的必要成分。研究表明，施用氮肥可使茶樹葉片葉綠素含量升高［１］，成熟葉的葉綠素ＳＰＡＤ值（Ｓｏｉｌａｎｄｐｌａｎｔａｎａｌｙｚｅｒｄｅｖｅｌｏｔｒｎｅｎｔ）與其全氮含量呈顯著的線性正相關(guān)，并與茶樹產(chǎn)量存在著比較明顯的關(guān)系拐點［２］。烏龍茶幼齡茶樹新梢的全氮、葉綠素、游離氨基酸、茶多酚和咖啡堿含量隨施氮量的增大而增加［３］。而施用脲醛控釋復(fù)合肥能有效地增加碧螺春原產(chǎn)地茶樹冠層葉片中葉綠素的含量［４，５］。大多數(shù)有關(guān)氮素對茶樹生長影響的研究都集中在氮對茶葉品質(zhì)和葉綠素含量的影響上，而不同氮肥水平對春茶鮮葉葉綠素組分含量的變化影響研究較少。試驗通過研究不同氮肥水平下春茶鮮葉葉綠素組分含量的變化趨勢，從營養(yǎng)生理的角度探索茶園的合理氮肥施用量，以期為茶葉生產(chǎn)上科學(xué)施用氮肥提供依據(jù)。

１ 材料與方法

１．１ 試驗概況

１．１．１ 材料 供試茶樹品種為四年生鄂茶１號（Ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓｃｖ．Ｅ－ｃｈａＮｏ．１）；供試肥料尿素（含氮４６％）為市售；春茶鮮葉葉綠素測定所用化學(xué)試劑主要有乙醇、碳酸鈣，均為國產(chǎn)分析純；儀器主要是ＵＶ－２４５０／２５５０型紫外可見分光光度計（日本島津制作所）。

１．１．２ 試驗地簡況 試驗茶園位于武漢市江夏區(qū)湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹茶葉研究所內(nèi)，茶園土壤ｐＨ４．５４，營養(yǎng)水平分別是有機質(zhì)１３．０７ｇ／ｋｇ、全氮０．８３ｇ／ｋｇ、堿解氮１０４．９０ｍｇ／ｋｇ、速效磷２８．９６ｍｇ／ｋｇ、速效鉀２６６．００ｍｇ／ｋｇ。

１．１．３ 試驗設(shè)計 田間設(shè)計５個氮肥處理水平，分別為不施肥（ＣＫ）、３００ｋｇ／ｈｍ２、６００ｋｇ／ｈｍ２、９００ｋｇ／ｈｍ２、１２００ｋｇ／ｈｍ２；小區(qū)面積為１３ｍ２，單因子試驗設(shè)計，隨機區(qū)組排列，重復(fù)４次；在２０１２年３月初開溝施入肥料。

１．２ 測定方法

１．２．１ 樣品制備 ２０１２年４月初，在田間剪取各施氮肥處理的鄂茶１號1葉1芽，每個處理的所有重復(fù)都剪?。保埃缱笥?，混合后送回本所分析實驗室。到實驗室后馬上用自來水洗３遍，再用去離子水洗２遍，用濾紙吸干葉片表面的水分，去掉中脈；用消毒過的手術(shù)剪將各處理葉片分別剪碎，稱取剪碎的各處理新鮮樣品２ｇ，均３次重復(fù)，放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣及３ｍＬ９５％乙醇，研成勻漿；再加９５％乙醇１０ｍＬ繼續(xù)研磨至組織變白。靜置３～５ｍｉｎ。取濾紙１張置于漏斗中，用９５％乙醇濕潤，沿玻璃棒把提取液倒入漏斗，濾液流至１００ｍＬ棕色容量瓶中；用少量95%乙醇沖洗研缽、研棒及殘渣數(shù)次，最后連同殘渣一起倒入漏斗中。用滴管吸?。梗担ヒ掖?，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘渣中無綠色為止。最后用９５％乙醇定容至１００ｍＬ，搖勻，待用［６，７］。

１．２．２ 葉綠素各組分含量測定 葉綠素ａ（Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌａ，Ｃｈｌａ）、葉綠素ｂ（Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｂ，Ｃｈｌｂ）及類胡蘿卜素（Ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄ，Ｃａｒ）的含量采用乙醇提取分光光度法測定［８］，將鄂茶１號新鮮葉片葉綠體色素提取液用紫外可見分光光度計分別在波長６６５ｎｍ、６４９ｎｍ和４７０ｎｍ３個波段處測定吸光度值（Ａ），以９５％乙醇為空白對照。依據(jù)下列公式分別計算葉綠素組分含量的濃度。

葉綠素ａ：Ｃａ＝１３．９５Ａ６６５－２．８１Ａ６４９；

葉綠素ｂ：Ｃｂ＝２４．９６Ａ６４９－７．３２Ａ６６５；

類胡蘿卜素：Ｃａｒ＝（１０００Ａ４７０－２．０５Ｃａ－１１４．８０Ｃｂ）/

２４５。

１．２．３ 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 試驗所得數(shù)據(jù)均采用ＭｉｃｒｏｓｏｆｔＯｆｆｉｃｅＥｘｃｅｌ2003軟件整理并繪圖，采用ＳＰＳＳ１１．５統(tǒng)計軟件進行多重比較（ＬＳＤ）分析［９］。

２ 結(jié)果與分析

２．１ 施氮肥量與春茶鮮葉葉綠素ａ含量的關(guān)系

不同氮肥處理水平對春茶鮮葉葉綠素ａ含量的影響結(jié)果見表１和圖１，由表１和圖１可知，施氮肥的處理鮮葉葉綠素ａ含量均高于對照，并且葉綠素ａ的含量隨著施肥量的增加呈先上升后下降的變化趨勢；當(dāng)施氮肥量達到６００ｋｇ／ｈｍ２時，葉綠素ａ的含量達到最大值，顯著或明顯高于其他施肥處理，之后隨著施氮肥量的進一步增加，葉綠素ａ的含量反而下降。

２．２ 施氮肥量與春茶鮮葉葉綠素ｂ含量的關(guān)系

２．３ 施氮肥量與春茶鮮葉類胡蘿卜素含量的關(guān)系

３ 小結(jié)

葉綠素是植物生長發(fā)育的重要營養(yǎng)來源供應(yīng)處，是反映植物生命體征的最重要參數(shù)。增加氮肥的用量可以使茶樹鮮葉葉綠素含量增加，但兩者并不是直線相關(guān)的關(guān)系；試驗發(fā)現(xiàn)氮肥用量達到一定水平后，葉綠素組分含量不增反而減少，這與產(chǎn)量的表述曲線也是一致的。本試驗結(jié)果表明，施氮肥量在６００ｋｇ／ｈｍ２時，鄂茶１號春茶鮮葉葉綠素各組分含量較高，因此推薦春茶開采前施氮肥量應(yīng)在６００ｋｇ／ｈｍ２較為科學(xué)合理。

參考文獻：

［１］蘇有健，廖萬有，丁 勇，等．不同氮營養(yǎng)水平對茶葉產(chǎn)量和品質(zhì)的影響［Ｊ］．植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報，２０１１，１７（６）：１４３０－１４３６．

［２］楊亦揚，馬立鋒，石元值，等．葉綠素儀（ＳＰＡＤ）在茶樹氮素營養(yǎng)診斷中的適用性研究［Ｊ］．茶葉科學(xué)，２００８，２８（４）：３０１－３０８．

［３］魏智娟，陳少波，馬 超，等．不同施氮量對烏龍茶生長和生理的影響［Ｊ］．生物安全學(xué)報，２０１０（４）：２９５－３０３．

［４］郭益紅，季小明，房婉萍，等．脲醛控釋復(fù)合肥對洞庭碧螺春茶樹冠層葉綠素含量的影響［Ｊ］．華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），２００８，２７（６）：７４１－７４４．

［５］陳易飛，陳德生，郭益紅．脲醛控釋復(fù)合肥對茶樹葉片葉綠素含量的影響［Ｊ］．江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，２００７（４）：２３４－２３６．

［６］唐曉波，劉曉軍，師大亮，等．茶葉中葉綠素含量的季節(jié)性差異研究［Ｊ］．浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，２００９（３）：５０２－５０３．

［７］宋緒忠，趙永軍，張金鳳，等．茶樹葉片葉綠素含量與葉色值相關(guān)性研究［Ｊ］．山東林業(yè)科技，２００２（６）：１０－１２．

［８］李合生．植物生理生化試驗原理和技術(shù)［Ｍ］．北京：高等教育出版社，２００７．

［９］余建英，何旭宏．?dāng)?shù)據(jù)統(tǒng)計分析與ＳＰＳＳ應(yīng)用［Ｍ］．北京：人民郵電出版杜，２００３．