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      不同濃度黃茶對(duì)SD大鼠的胃損傷預(yù)防效果

      2012-07-29 14:35:34鄧瀟瀟
      關(guān)鍵詞:黃茶分泌量胃液

      鄧瀟瀟,趙 欣

      (重慶第二師范學(xué)院 1.通識(shí)教育部;2.生物與化學(xué)工程系,重慶 400067)

      黃茶為我國(guó)特有的茶類,由綠茶加工工藝發(fā)展而來(lái),特殊的悶黃工藝造就了其獨(dú)特的“三黃”品質(zhì)(干茶黃、湯色黃、葉底黃),被茶葉專家推薦為適宜飲用的茶類[1]。其中產(chǎn)于四川的蒙頂黃芽是我國(guó)傳統(tǒng)黃茶名品,在唐朝就作為貢茶直至清末,不僅表現(xiàn)在風(fēng)味佳,也作為一種健康飲品得到人們的認(rèn)同。黃茶中富含茶多酚、氨基酸、可溶糖、維生素等豐富營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),具有預(yù)防癌癥的功效。此外,黃茶鮮葉中天然物質(zhì)保留有85%以上,而這些物質(zhì)對(duì)殺菌、消炎均有特殊效果[2]。胃損傷是消化道疾病的高發(fā)病率的主要原因之一,產(chǎn)生胃痛和胃部不舒適,主要體現(xiàn)是反酸、燃心、腹脹、消化不良、胃口欠安等,刺激性物質(zhì)和一些藥物都可能會(huì)引起胃損傷。近年關(guān)于黃茶在保健方面的研究已經(jīng)陸續(xù)展開,為了驗(yàn)證黃茶的抗胃損傷效果,本研究初步對(duì)蒙頂黃茶進(jìn)行了大鼠體內(nèi)抗胃損傷功能性的研究。

      1 材料與方法

      1.1 樣品

      黃茶:四川省蒙頂皇茶茶業(yè)有限責(zé)任公司出品的蒙頂皇茶牌蒙頂黃芽,進(jìn)行冷凍干燥后用沸水3次提取,蒸干后得到水提物待用。

      1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

      七周齡SD大鼠購(gòu)于重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,在溫度為23±1℃,相對(duì)濕度50±5%環(huán)境下飼養(yǎng),大鼠自由攝取飲水和大鼠標(biāo)準(zhǔn)飲食。

      1.3 大鼠誘導(dǎo)胃損傷

      將實(shí)驗(yàn)大鼠分為5組,分別為正常組(按標(biāo)準(zhǔn)方法飼養(yǎng)大鼠,不進(jìn)行任何實(shí)驗(yàn)處理)、對(duì)照組(按標(biāo)準(zhǔn)方法飼養(yǎng)大鼠,不進(jìn)行樣品處理,最后誘導(dǎo)胃損傷)、實(shí)驗(yàn)組(用黃茶樣品灌胃大鼠,并且最后誘導(dǎo)胃損傷),每組10只。在隨后兩周內(nèi)將黃茶水提物按250,500和1000 mg/kg濃度對(duì)實(shí)驗(yàn)組SD大鼠每天實(shí)施灌胃一次。兩周后對(duì)除正常組外各組大鼠用1 ml乙醇溶液(乙醇溶于150 mM鹽酸配制成60%的乙醇溶液)進(jìn)行灌胃胃損傷誘導(dǎo),1小時(shí)后處死各組大鼠,取大鼠血漿,胃和胃液進(jìn)行測(cè)定。

      1.4 酶聯(lián)免疫法(ELISA法)測(cè)定血清中細(xì)胞因子IL-6和 TNF-α

      取 2 mL動(dòng)脈血,4℃,3000 r/min離心分離10分鐘取上層血清。IL-6和 TNF-α定量酶聯(lián)檢測(cè)試劑盒按ELISA方法操作后用 Bio-Rad 550酶標(biāo)儀(美國(guó))檢測(cè)血清中上述兩種細(xì)胞因子水平。

      1.5 胃損傷程度測(cè)定

      將大鼠的胃用10%福爾馬林固定,拍照后用ImageJ軟件分析胃損傷程度。

      1.6 胃液量和胃液pH值測(cè)定

      取解剖后大鼠的胃液測(cè)定胃分泌量,用ServenEasy pH計(jì)(瑞士Mettler-Toledo公司)測(cè)定pH值。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 大鼠血清中細(xì)胞因子IL-6和 TNF-α水平

      通過(guò)酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清中IL-6細(xì)胞因子水平,正常組、對(duì)照組、250,500和1000 mg/kg濃度黃茶灌胃各組的因子水平為 52.1±4.5、271.2±10.2、250.7±11.2、206.3±9.8 和 144.3±12.2 pg/mL。TNF-α 細(xì)胞因子水平與 IL-6相似,測(cè)得各組大鼠的細(xì)胞因子水平為 127.5±14.6、843.3±22.2、715.3±18.5、635.4±20.6 和 438.4±19.4 pg/mL(圖1)。由此可以看出隨著黃茶灌胃濃度的提高,IL-6和TNF-α細(xì)胞因子水平隨之下降,并且實(shí)驗(yàn)各組大鼠的細(xì)胞因子水平均明顯低于對(duì)照組。IL-6和 TNF-α細(xì)胞因子水平降低表示炎癥程度降低[3],可以得到黃茶均有降低胃損傷程度的結(jié)果。

      圖1 各組大鼠血清的IL-6和 TNF-α細(xì)胞因子水平

      2.2 胃損傷水平

      對(duì)各組大鼠進(jìn)行胃損傷誘導(dǎo)后,對(duì)照組大鼠的胃損傷程度為14.2±3.4 mm2。 黃茶水提物對(duì)大鼠進(jìn)行灌胃后各組大鼠的胃損傷程度均有一定程度下降。采用1000 mg/kg濃度灌胃的大鼠的胃損傷程度和抑制率為 3.6±1.1 mm2和 74.6%,500 和 250 mg/kg濃度黃茶灌胃時(shí)胃損傷抑制率分別為 6.2±1.6, 12.6±2.2 mm2 和 56.3,11.3%(表1,圖2)。由此可以看出,隨著黃茶灌胃濃度的增加胃損傷程度下降,黃茶對(duì)胃損傷具有一定的預(yù)防作用。

      表1 各組大鼠的胃損傷程度和胃損傷抑制率

      圖2 各組大鼠的胃損傷外觀觀察

      2.3 大鼠胃液量和胃液pH值

      胃損傷出現(xiàn)時(shí),胃液分泌量會(huì)增加,同時(shí)胃液正常pH值也會(huì)降低[4]。本實(shí)驗(yàn)中正常組的胃液分泌量和胃液pH 值為 1.3±0.3 ml和 3.7±0.8;對(duì)照組的胃液分泌量和胃液 pH 值為 3.2±1.0 ml和 1.2±0.2。 黃茶實(shí)驗(yàn)組大鼠的胃液分泌量隨著灌胃濃度增加而減少,250、500和1000 mg/kg濃度灌胃時(shí)分別為 2.8±0.5、2.4±0.5 和 1.8±0.5 ml;胃液pH值隨著灌胃濃度增加而增加,分別為2.1±0.4、2.6±0.4 和 3.1±0.4 (圖 3)??梢钥闯鲭S著黃茶濃度的提高,對(duì)胃損傷的預(yù)防效果得到了增強(qiáng)。

      圖3 各組大鼠的胃液分泌量和胃液pH值

      3 討論

      胃損傷最直接的表現(xiàn)為出現(xiàn)炎癥,IL-6和TNF-α是炎性細(xì)胞因子,在臨床上通過(guò)測(cè)定IL-6和TNF-α細(xì)胞因子水平可以判定各種炎癥的程度,包括胃炎[4,5]。酒精引起的急性胃損傷主要表現(xiàn)為胃黏膜炎癥,可造成胃黏膜上皮層發(fā)生改變、破壞上皮頂端胞漿膜,導(dǎo)致細(xì)胞脫落及胃多發(fā)糜爛、潰瘍,如累及血管則可引起出血,是急性酗酒后易發(fā)的臨床疾?。?]。飲用保健飲料是預(yù)防由于酒精引起的胃損傷的方法之一。黃茶作為一種保健茶葉飲品,其部分功能性已經(jīng)得到證實(shí)。本文以蒙頂黃茶為基準(zhǔn)進(jìn)行了動(dòng)物體內(nèi)抗胃損傷比較實(shí)驗(yàn),從血清細(xì)胞因子水平、胃損傷程度、胃液分泌量和pH值結(jié)果得出黃茶具有一定的胃損傷預(yù)防效果。黃茶對(duì)人體的臨床作用也有待更深層次的研究。

      [1]周繼榮,倪德江,陳玉瓊,等.黃茶加工工程品質(zhì)變化的研究[J].湖南農(nóng)業(yè)科學(xué),2001,1:93-95.

      [2]趙欣.黃茶的HT-29人體結(jié)腸癌細(xì)胞的體外抗癌效果[J].北京聯(lián)合大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2009,23(3):11-13.

      [3]張信,張國(guó)安.胃炎患者胃竇IL-6活性和TNF-α含量的檢測(cè)[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志,1998,7(1):42-44.

      [4]Ku CS, Mun SP.Antioxidant activities of ethanol extracts from seeds in fresh Bokbunja(Rubus coreanus Miq.)and wine processing waste[J].Bioresource Technology, 2008,99(10): 4503-4509.

      [5]范恒,邱明義,梅家俊,等.理腸四方對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠組織細(xì)胞因子 TNF-α IL-6 IL-8 IL-10 的影響[J].中醫(yī)藥學(xué)刊,2004,9:1624-1627.

      [6]任建林,潘金水,董菁.酒精性胃?。跩].世界華人消化雜志,2005,13(17):2061-2063.

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