熊順華，王新均，羅 斌，陳德森

(湖北醫(yī)藥學(xué)院:A.生理學(xué)教研室;B.機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)室，湖北十堰 442000)

機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中常見問題探討

熊順華A，王新均B，羅 斌A，陳德森B

(湖北醫(yī)藥學(xué)院:A.生理學(xué)教研室;B.機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)室，湖北十堰 442000)

機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)是在活的動(dòng)物或組織上進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)，在實(shí)驗(yàn)過程中常會(huì)出現(xiàn)多種問題，本文從動(dòng)物手術(shù)至實(shí)驗(yàn)觀察過程中易出現(xiàn)問題的十個(gè)方面進(jìn)行探討，就出現(xiàn)的問題、問題產(chǎn)生的原因及如何解決此問題進(jìn)行淺談。

機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn);問題;產(chǎn)生原因;解決方法

機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)是面向一至二年級(jí)的醫(yī)學(xué)生所設(shè)置的基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)，此實(shí)驗(yàn)必須在活的生物機(jī)體或組織上進(jìn)行，在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中必需保持動(dòng)物存活和組織細(xì)胞具有活性，如果在實(shí)驗(yàn)過程中，動(dòng)物死亡或組織細(xì)胞失去活性，則示實(shí)驗(yàn)結(jié)束或失敗。實(shí)驗(yàn)要求學(xué)生親自動(dòng)手進(jìn)行操作，這對(duì)于剛接觸醫(yī)學(xué)科學(xué)又不具備操作技能的學(xué)生具有一定的難度，所以在實(shí)驗(yàn)過程中常會(huì)出現(xiàn)多種問題，這些問題的出現(xiàn)也是導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗的關(guān)鍵性因素。而機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的有:培養(yǎng)學(xué)生基本操作技能，驗(yàn)證所學(xué)的基本理論知識(shí);培養(yǎng)學(xué)生的初步科研意識(shí)為今后從事科學(xué)研究打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)等［1］。如果實(shí)驗(yàn)還沒有結(jié)束就失敗了，實(shí)驗(yàn)的目的則沒有達(dá)到，所以在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)完成整個(gè)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，是實(shí)驗(yàn)的基本要求。而解決實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的問題對(duì)于完成教學(xué)任務(wù)起了關(guān)鍵性作用，而且許多的年輕教師在遇到這些問題時(shí)總顯得手忙腳亂，不知如何面對(duì)，所以本文對(duì)于常見的問題、問題產(chǎn)生的原因及如何解決問題進(jìn)行淺談。

1 動(dòng)物麻醉的問題

動(dòng)物麻醉過程中存在某些原因可致動(dòng)物死亡，常見的原因有，麻醉藥用量過大，而用量過大的原因是麻醉藥的濃度配制不夠準(zhǔn)確、動(dòng)物稱量不準(zhǔn)確或麻藥用量計(jì)算錯(cuò)誤等，所以強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)人員在麻藥配制時(shí)要認(rèn)真、準(zhǔn)確，教導(dǎo)學(xué)生動(dòng)物稱量及注射藥物的劑量計(jì)算要準(zhǔn)確。由于鼠的麻醉是一次性的腹腔注射，所以注射劑量的準(zhǔn)確特別重要，為防止動(dòng)物死亡可選擇稍低點(diǎn)的劑量。而在家兔麻醉時(shí)，由于動(dòng)物個(gè)體差異較大，需要的劑量變化較大，所以更重要的是注射藥物的速度和麻醉深度的判斷;麻醉藥注射的速度過快是致家兔死亡的另一重要原因，快速推注很少的劑量就可致動(dòng)物死亡，而很多學(xué)生只知道將計(jì)算的麻藥量一次性推注完即可，卻不注意注射的速度，應(yīng)采用的方法是前1/3的劑量推注可稍快些，后2/3的劑量一定要慢推注，注射麻藥的同時(shí)應(yīng)觀察麻醉的深度，麻醉深度判斷有四個(gè)指標(biāo):痛覺、呼吸、肌張力、角膜反射［1］，其中痛覺是最重要的指標(biāo)，因?yàn)檫@一指標(biāo)學(xué)生判斷起來既容易且準(zhǔn)確，可采用邊推注麻藥邊用止血鉗夾兔的四肢末梢，推麻藥至痛覺剛消失即可，其它三個(gè)指標(biāo)可作為輔助指標(biāo)，如果計(jì)算的麻藥量沒推注完，而動(dòng)物的痛覺已消失，剩余的麻藥不要注射了。由于家兔易動(dòng)，所以在麻醉的過程中，學(xué)生用手按住動(dòng)物用力過大或手法不對(duì)從而卡住家兔脖子，都可導(dǎo)致動(dòng)物死亡。另外，錯(cuò)將其它藥物當(dāng)麻醉藥注射也是致動(dòng)物死亡的原因之一。

2 氣管插管的問題

氣管插管易出現(xiàn)的問題是氣管被堵，原因一是氣管插管本身不通，所以插管前先檢查氣管插管是否清洗干凈、是否通暢。原因二是插管口處氣管壁出血，血凝塊阻塞氣道造成呼吸不暢;插管剪口前先將剪口處的組織分離干凈，以減少組織損傷引起的出血，剪口應(yīng)盡可能的在氣管軟骨環(huán)上;在實(shí)驗(yàn)過程中若氣管出現(xiàn)液體流過的聲音，可能是由于切口處出血，血液流入氣道引起的;或動(dòng)物突然出現(xiàn)深慢的呼吸提示氣管被堵，可將氣管插管取下來將血清理干凈后再行插管，以防氣管被堵致動(dòng)物死亡。

3 頸總動(dòng)脈插管的問題

頸總動(dòng)脈插管過程中易出現(xiàn)的問題是將動(dòng)脈血管插斷致插管失敗，血管破裂、動(dòng)脈插管滑脫致動(dòng)物大出血而死亡。教師在講授時(shí)需告知學(xué)生，將動(dòng)脈血管盡可能的分離得長(zhǎng)些，插管前頭端線的結(jié)扎盡量偏向頭端，將向心端血管段留長(zhǎng)些，以防血管斷后可重新結(jié)扎再行插管，血管被剪口的大小約為管徑的1/3或1/2，不要超過1/2，否則易插斷血管，插管插入血管后應(yīng)告知學(xué)生結(jié)扎好，而且要往插管上做固定，以防插管滑脫，在確保結(jié)扎固定好后才可松開夾住血管的動(dòng)脈夾子，如血管插斷、血管破裂或插管滑脫致大出血，要學(xué)生快速用手或用止血鉗夾住血管止血，然后再行重新插管。在插管前靜脈注射抗凝劑肝素，抗凝劑必須是在準(zhǔn)備插管前注射，而有的學(xué)生一注射完麻醉藥后就立即注射肝素，肝素注射過早會(huì)造成手術(shù)過程中出血過多，教師應(yīng)強(qiáng)調(diào)注射肝素的時(shí)間，也可在插管局部注射少量抗凝劑，以防插管處血液凝固致血壓描記不出來。頸部如出現(xiàn)不明原因的出血，可能是頭端線結(jié)扎不緊，血從插口處流出，再結(jié)扎頭端即可。

4 動(dòng)脈血壓記錄的問題

在血壓的描記過程中，有時(shí)記錄出的壓力值過低或過高，產(chǎn)生的原因:壓力換能器使用時(shí)必須先調(diào)0點(diǎn)，在無壓力時(shí)信號(hào)線與基線必須在一條線上，如果在0以下或在0以上，則記錄出的壓力值因此而降低或升高。有時(shí)記錄出的動(dòng)脈血壓曲線在基線上下波動(dòng)，收縮壓在基線之上大于0，而舒張壓在基線之下小于0，而且波形很規(guī)律且無呼吸波，在此情況下，學(xué)生一般不能識(shí)別出問題和產(chǎn)生的原因，甚至有些青年教師也看不出問題所在，這時(shí)教師應(yīng)提醒學(xué)生，動(dòng)脈壓力不可能是負(fù)值，所以記錄出的血壓波形至少要在基線上方，其原因是時(shí)間常數(shù)和高頻濾波參數(shù)設(shè)置錯(cuò)誤，此波型記錄的不是血壓，而是干擾信號(hào)，血壓信號(hào)被過濾掉，保留下來的是干擾信號(hào)，記錄出的是干擾波，應(yīng)告知學(xué)生在各種信號(hào)的記錄時(shí)，對(duì)應(yīng)每種信號(hào)都有一個(gè)相應(yīng)的時(shí)間常數(shù)和高頻濾波參數(shù)，不能隨意變動(dòng)，否則記錄不出正確的信號(hào)波形，在使用BL-410或BL-420記錄壓力時(shí)一般選擇默認(rèn)值即可。另外，由于插管處局部血液凝固而記錄不出波動(dòng)的血壓波形，這時(shí)不需要將插管取下來清除血凝塊重插管，而是直接通過三通管向動(dòng)脈插管注射少量肝素，即可去掉插管處的血凝塊，又可防血液再凝固。

5 離體器官灌流的問題

離體器官灌流是將動(dòng)物的某些組織離體后置于適宜的灌流液中以保持其活性，在此狀態(tài)下觀察其活動(dòng)變化，如果組織活性不好或無活性，則此實(shí)驗(yàn)不能進(jìn)行或?qū)嶒?yàn)失敗，所以在實(shí)驗(yàn)過程中維持組織細(xì)胞的活性是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。如何才能保持組織細(xì)胞具有良好的活性?首先，灌流液的配制要嚴(yán)格按照教材的要求進(jìn)行，各種試劑的稱量必需準(zhǔn)確，氯化鈣必需先溶解在一支小量瓶?jī)?nèi)，然后慢慢倒入已溶解的鹽溶液中，邊倒邊攪拌以防止沉淀的形成。其次，向灌流液中通O2，溫度設(shè)在要求的數(shù)值上，將這些工作都做好后，才可取標(biāo)本，不要在準(zhǔn)備工作沒做好前就取標(biāo)本。提醒學(xué)生取標(biāo)本的過程中不要用手過度的捏標(biāo)本，以減少對(duì)標(biāo)本的損傷，在實(shí)驗(yàn)觀察的過程中O2的供應(yīng)不能停止，溫度要維持穩(wěn)定不能太高，維持一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境是本實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵所在。

6 輸尿管插管的問題

問題一，如何識(shí)別輸尿管?輸尿管是起始于腎臟止于膀胱的縱行的白色管子。有些學(xué)生看見膀胱旁邊有一個(gè)管子即認(rèn)為是輸尿管，如果管子不是縱向行走，又可提起來很長(zhǎng)，可肯定不是輸尿管，輸尿管不能被提起來很長(zhǎng)，這種管子一般比輸尿管粗，可先找膀胱，順膀胱再找輸尿管較容易。問題二，插口問題。由于輸尿管太細(xì)，插管時(shí)不要用剪刀剪口，易導(dǎo)致剪口過大或剪斷，可用較粗的針頭扎孔，再行插管。問題三，如何識(shí)別是否插入管中?插完管后觀察插管四周尿管壁的厚度是否一樣，如果厚度不一樣，提示管子插入尿管壁中，必須重插;有時(shí)插管插入尿管但無尿，其原因有三種:一是真正無尿，為了防止這種情況出現(xiàn)可在實(shí)驗(yàn)一開始時(shí)采取靜脈輸液以提高尿量;二是輸尿管扭曲，可將輸尿管放置于自然位置;三是輸尿管或插管被血凝塊堵住，可將插管取下來，去血凝塊行重插管。

7 呼吸波記錄的問題

兔子呼吸波描記一般采用兩種方法，一種方法行氣管插管法，氣管插管的一側(cè)與大氣相通，允許氣體進(jìn)出肺，另一側(cè)與壓力換能器相連，氣體進(jìn)出肺對(duì)壓力換能器產(chǎn)生壓力，此壓力的大小也隨呼吸而變化以此描記出呼吸波，但由于兔子的潮氣量小，對(duì)壓力換能器施予的壓力小，這時(shí)可能描記的幅度很小或描記不出隨呼吸而變化的波型，可用夾子將與大氣相通的氣管插管口夾住一部份，以減少這一側(cè)的通氣量，讓更多的氣體從與壓力換能器相連的氣管插管口進(jìn)出，這樣可增加描記波型的幅度，或者將時(shí)間常數(shù)調(diào)至5S，也可描記出一幅度較大的隨呼吸而變化的波型。另一種方法是呼吸肌描記法，用彎針在胸壁上的肋間肌上縫合絲線連接張力換能器，肌肉的運(yùn)動(dòng)對(duì)張力換能器的拉力隨呼吸而變化即可記錄出呼吸波，如果動(dòng)物麻醉深度不夠，動(dòng)物活動(dòng)對(duì)張力換能器的拉力過大易損壞換能器，所以這種方法應(yīng)用少。

8 離體神經(jīng)干動(dòng)作電位描記的問題

神經(jīng)干動(dòng)作電位描記時(shí)，常出現(xiàn)的問題是，記錄不出動(dòng)作電位的波形、記錄的波形幅度太小、只記錄出單相波或只記錄出刺激偽跡，原因有三個(gè)，一是標(biāo)本沒有活性:任氏液的配制不準(zhǔn)確至標(biāo)本無活性;在蟾蜍神經(jīng)干標(biāo)本的分離過程中，用手捏標(biāo)本至標(biāo)本無活性，在分離過程中多滴任氏液以保持標(biāo)本的活性，標(biāo)本盡可能分離的長(zhǎng)而粗，在膝關(guān)節(jié)分叉處，應(yīng)盡可能的將二個(gè)分支全分離出來，這樣記錄出來的動(dòng)作電位幅度會(huì)更大些。二是電極盒長(zhǎng)期使用后電極上會(huì)形成氧化膜或生銹，而影響電極與神經(jīng)的接觸至記錄不出來動(dòng)作電位，可用沙紙擦去氧化膜或銹跡，或移動(dòng)神經(jīng)干在電極上的位置以增強(qiáng)神經(jīng)干與電極的接觸。三是過大幅度的刺激偽跡蓋住動(dòng)作電位的波形，解決的辦法是可將刺激電極與記錄電極之間的距離盡可能的放遠(yuǎn)些。有的學(xué)生將刺激偽跡誤認(rèn)為動(dòng)作電位，識(shí)別偽跡和神經(jīng)干動(dòng)作電位的方法:偽跡的起始點(diǎn)與刺激記號(hào)在一條線上，偽跡的大小隨刺激強(qiáng)度的變化而變化，而動(dòng)作電位在偽跡之后，在使用最大刺激之后幅度不隨刺激強(qiáng)度的變化而變化，動(dòng)作電位為雙向波，而刺激偽跡為單向波。

9 蛙心離體灌流的問題

在蛙心插管過程中，由于蛙心插管必需插入蛙心室，所以插管時(shí)注意剪口的位置，距離動(dòng)脈瓣處約0.5cm處剪口，既不能太近也不能太遠(yuǎn)，太近影響插管或插進(jìn)去后結(jié)扎困難，太遠(yuǎn)蛙心插管長(zhǎng)度不夠不易插進(jìn)心室;還有的學(xué)生用手?jǐn)D捏心臟，致心臟暫時(shí)不博動(dòng)，此時(shí)要學(xué)生繼續(xù)插管，不要放棄，只要保持靜脈竇與心室的連接，插完管后向心室腔內(nèi)滴加腎上腺素，一般可使蛙心重新起博。插管中灌流液液面的高度在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)維持不變，目的是保持心臟前后負(fù)荷的穩(wěn)定，防止前后負(fù)荷的變化影響心肌收縮力進(jìn)而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果在灌流液中加某些藥物如乙酰膽堿、KCl溶液等，可出現(xiàn)蛙心停跳，而且更換任氏液幾次仍不能復(fù)跳，告訴學(xué)生增加更換任氏液的次數(shù)，直至心臟重新起博為止，在更換任氏液時(shí)應(yīng)盡可能用吸管將心腔內(nèi)含藥物的任氏液吸出，一般都能重新起博，不需要更換蛙心。

10 用BL-410或BL420記錄生物信號(hào)的問題

在顯示器上不出現(xiàn)信號(hào)線，原因一:BL-410或420是4通道生理記錄儀，可同步記錄4種生物信號(hào)，主機(jī)4個(gè)信號(hào)輸入口與顯示器4個(gè)通道是一對(duì)一的關(guān)系，而有些學(xué)生只是在第一通道找波形，而并不注意信號(hào)從第幾個(gè)插孔輸進(jìn)去的，如果信號(hào)不是從第一個(gè)插孔輸入，則不能從顯示器的一通道上觀察到波形，要提醒學(xué)生先看信號(hào)是從第幾個(gè)插孔送入的，要在相應(yīng)的通道找信號(hào);在使用模塊記錄信號(hào)時(shí)一般將信號(hào)送入CH1的插孔，這樣信號(hào)顯示的通道在1通道。原因二:換能器與插孔的連接不緊密，致信號(hào)不能送入主機(jī)。原因三:放大倍數(shù)過大，超過儀器記錄的范圍，致信號(hào)線不能顯示在顯示器上，可縮小放大倍數(shù)。原因四:有的學(xué)生將信號(hào)線的顏色換成了與背景一樣的顏色，這時(shí)也看不到波形，提醒學(xué)生不要隨意更換信號(hào)線的顏色。

綜上所述，機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)是在活的生物機(jī)體、組織器官上進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)存在多變性，會(huì)出現(xiàn)多種問題，針對(duì)這些問題作為教師首先提高自身的素質(zhì)，善于觀察、分析和發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)過程中的問題，提前預(yù)見問題所在，提醒學(xué)生注意和預(yù)防可能出現(xiàn)的問題，找出問題的原因所在，并提出合理的解決方法，以提高實(shí)驗(yàn)成功率。而實(shí)驗(yàn)成功率的提高能提高學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性并給學(xué)生自信心，而實(shí)驗(yàn)的失敗則會(huì)給學(xué)生以挫敗感，認(rèn)為自己的操作能力不行，還有的學(xué)生會(huì)認(rèn)為自已實(shí)驗(yàn)都做不好，是否適合成為一名手術(shù)科室的醫(yī)生。而且在實(shí)驗(yàn)開始動(dòng)物死亡，教師會(huì)讓學(xué)生再取一只動(dòng)物繼續(xù)實(shí)驗(yàn)，造成動(dòng)物經(jīng)費(fèi)的流失。所以解決實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的問題是教師應(yīng)具備的基本素質(zhì)。

［1］鄭先科，李國(guó)華，黃碧蘭，等.機(jī)能實(shí)驗(yàn)科學(xué)［M］.北京:北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社，2005.

G642.423

A

1006－2769(2012)03－0529－04

2012－02－16

熊順華，湖北醫(yī)藥學(xué)院生理學(xué)教研室教師，教授，碩士，主從事神經(jīng)的生理病理研究。