周萍,李新勝,安東,王朝川,孟曉峰
(中華全國(guó)供銷(xiāo)合作總社濟(jì)南果品研究院,山東 濟(jì)南 250014)
灰樹(shù)花、雞腿菇作為常見(jiàn)的食用菌種類(lèi),營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富,具有較高的食用及藥用價(jià)值。隨著科技的發(fā)展和研究的深入,人們?cè)谥匾暿秤镁a(chǎn)量和品質(zhì)的同時(shí),也開(kāi)始了對(duì)其活性物質(zhì),尤其是食用菌多糖的研究。而食用菌多糖也正由單獨(dú)應(yīng)用研究,向多糖間的協(xié)同效應(yīng)研究轉(zhuǎn)變。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)于食用菌多糖提取研究的方法很多,主要有熱水浸提、酶提法、堿溶液浸提、酸溶液浸提、微波萃取以及超聲提取等,但是對(duì)食用菌復(fù)合多糖的提取文獻(xiàn)中報(bào)道較少。
原料:灰樹(shù)花和雞腿菇子實(shí)體干品均購(gòu)于濟(jì)南市七里堡市場(chǎng)。
儀器:高速萬(wàn)能粉碎機(jī)(北京市永光明醫(yī)療儀器廠(chǎng))、臺(tái)式離心機(jī)(TGL-16C)(上海安亭科學(xué)儀器廠(chǎng))、HH-2型數(shù)顯恒溫水浴鍋(杰瑞爾電器有限公司)、超聲波破碎儀(BANDELIN SONOREX)、單道可調(diào)移液器(芬蘭雷勃)、電冰箱BC-155H(新飛電器)、精密電子天平(AE200)(瑞士METTLER)。
2.1.1 灰樹(shù)花多糖的提取
灰樹(shù)花子實(shí)體→干燥→粉碎→加入蒸餾水(1:40)→超聲處理→抽濾→離心去渣(4000 r/min,15 min)→加熱濃縮→乙醇沉析→靜置12 h→離心(4000 r/min,15 min)→沉淀→80 %乙醇洗滌沉淀兩遍→干燥→灰樹(shù)花粗多糖。
2.1.2 雞腿菇多糖的提取
取5g干燥的雞腿菇子實(shí)體粉,料水比1:30,90℃熱水浸提3h,提取2次,過(guò)濾并收集濾液,加熱濃縮后,75%乙醇沉淀多糖,靜置過(guò)夜,離心,并收集沉淀,分別加入80%的乙醇、95%的乙醇和乙醚洗滌沉淀,烘干后得到樣品粗多糖,并計(jì)算粗多糖的提取率。
2.2.1 灰樹(shù)花、雞腿菇復(fù)合多糖的提取
分別取一定量的灰樹(shù)花、雞腿菇子實(shí)體,按照混合比例,稱(chēng)重,粉碎,超聲水提,得灰樹(shù)花、雞腿菇的復(fù)合多糖。
2.2.2 灰樹(shù)花、雞腿菇復(fù)合多糖的提取工藝優(yōu)化
以粗多糖的得率為標(biāo)準(zhǔn),確定正交試驗(yàn)的參數(shù)范圍,對(duì)料液比、超聲時(shí)間、提取溫度、提取次數(shù)進(jìn)行L9(34)的正交設(shè)計(jì)。根據(jù)正交設(shè)計(jì)進(jìn)行試驗(yàn),并對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行極差與方差分析,確定最佳的提取工藝參數(shù),正交設(shè)計(jì)各因素水平見(jiàn)表1。
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由表2可見(jiàn),兩種食用菌組分多糖的提取實(shí)驗(yàn)中,灰樹(shù)花多糖和雞腿菇多糖的提取率分別為12.7%和13.1%。
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以粗多糖的得率為標(biāo)準(zhǔn),不考慮各因素間的相互影響,通過(guò)選定料液比(A)、提取時(shí)間(B)、提取溫度(C)、提取次數(shù)(D)四個(gè)因素,各三個(gè)水平進(jìn)行L9(34)正交試驗(yàn)。
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從表3的直觀分析就可以看出,極值R反應(yīng)了4個(gè)因素對(duì)粗多糖的提取收率影響,比較各R值大小,可見(jiàn)RA>RD>RB>RC,所以因素對(duì)試驗(yàn)指標(biāo)影響的主次順序是A>D>B>C。即料液比對(duì)灰樹(shù)花、雞腿菇混合復(fù)合多糖得率影響最大,其次是提取次數(shù)和提取時(shí)間,而提取溫度的影響則較小些。
kA1,kA2,kA3不相等,說(shuō)明A因素的變動(dòng)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生了影響,kA3>kA2>kA1,由此可斷定A3為A因素的優(yōu)水平。同理,計(jì)算并確定了B2、C3、D3分別為B、C、D因素的優(yōu)水平。四個(gè)因素的優(yōu)水平組合A3B2C3D3為本試驗(yàn)的最優(yōu)水平組合,即在料液比1:30,提取時(shí)間為40min,提取溫度為60℃,提取3次的條件下,粗多糖得率為10.2%,為灰樹(shù)花、雞腿菇復(fù)合多糖超聲提取的最優(yōu)工藝。
本文提取了灰樹(shù)花和雞腿菇多糖,并采用超聲水提法對(duì)灰樹(shù)花、雞腿菇復(fù)合多糖的提取工藝進(jìn)行了探討,結(jié)合多因素正交試驗(yàn)優(yōu)化了其提取的工藝條件。其中灰樹(shù)花、雞腿菇復(fù)合多糖的最佳工藝條件為料液比1:30,提取時(shí)間為40min,提取溫度為60℃,提取3次,粗多糖得率為10.2%,而料液比為影響其多糖得率的主要因素,比值越大,加水量越多,多糖的溶出也就越容易,但如果加水量過(guò)大,會(huì)增加后續(xù)工藝中多糖提取液的濃縮成本以及醇沉中的酒精用量,因此,從節(jié)約高效的角度出發(fā),在提取過(guò)程中可適當(dāng)減低料液比值。
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