薛連海， 朱唯唯

（滁州學(xué)院 材料與化學(xué)工程學(xué)院，安徽 滁州 239000）

安賽蜜生產(chǎn)控制分析方法的改進(jìn)

薛連海， 朱唯唯

（滁州學(xué)院 材料與化學(xué)工程學(xué)院，安徽 滁州 239000）

建立一種安賽蜜生產(chǎn)過程中合成液及結(jié)晶母液的高效液相色譜分析方法，以實(shí)現(xiàn)安賽蜜的合成及精制過程的實(shí)時(shí)分析。色譜柱：Eclipse XDB－C18，φ4.6mm×150mm；流動(dòng)相：甲醇：水＝10：90（V／V）），1.0mL／min；檢測器：DAD，230nm。定量分析的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：y＝29.06x＋7.4997，R＝0.9999，線性范圍：2～400μg／mL。加標(biāo)回收率：99.1%～101.7%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.51%。結(jié)果表明，該方法可以滿足安賽蜜生產(chǎn)控制分析的需要。

高效液相色譜法；安賽蜜；生產(chǎn)過程；分析方法

安賽密，化學(xué)名稱為6－甲基－2，2－二氧代－1，2，3－氧硫氮雜－4－環(huán)己烯酮鉀鹽，英文名：Acesulfame Potassium或Acesulfame K，簡稱ASK，俗稱AK糖或安賽密，分子式C4H4NO4SK。為非營養(yǎng)型甜味劑，甜度為蔗糖的200倍，是一種無毒、安全的食品添加劑，廣泛應(yīng)用于食品、飲料、保健、醫(yī)藥、日用化工等行業(yè)［1］。安賽密的生產(chǎn)幾乎全部采用氨基磺酸－三氧化硫法［2－4］，該方法主要包括以下六個(gè)步驟：（1）三氧化硫－二氯甲烷溶液的制備。（2）氨基磺酸三乙基胺鹽的制備。（3）乙酰乙酰氨基磺酸鹽的制備。（4）安賽密中間體的制備。（5）安賽密的合成。（6）安賽蜜的分離與精制。通過調(diào)研了解到，步驟（5）、（6）的控制分析僅僅是對安賽密最終產(chǎn)品的分析，采用的是原子吸收分光光度法測定產(chǎn)品中鉀含量，計(jì)算安賽密含量的方法。由于合成液、母液中含有其它雜質(zhì)和鉀鹽，該方法不能用于安賽密合成液及精制過程中母液的分析。有關(guān)食品中安賽密含量的分析方法有許多相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道［5－8］，對于安賽密生產(chǎn)中合成液及精制過程中母液的分析方法未見報(bào)道。本研究旨在探討安賽密合成液及精制過程母液的分析方法，為安賽密生產(chǎn)過程控制分析方法的建立和完善、實(shí)時(shí)監(jiān)控安賽蜜的合成和精制生產(chǎn)過程提供依據(jù)。

1 試驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

試劑：安賽密合成液、結(jié)晶母液（安徽金禾實(shí)業(yè)有限公司提供）；安賽密，食品級，質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99.5%；氫氧化鉀，A.R；無水甲醇，A.R；超純水。

儀器：高效液相色譜儀（Agilent1200）；超聲波振蕩器（KQ3200型）；電子天平（sartorius cp124s）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 色譜條件

Ecllpse XDB－C18色譜柱，φ4.6mm×150mm，5μm；流動(dòng)相：甲醇：水＝10：90（V／V）），流速1.0mL／min；柱溫25℃？；檢測器：DAD，檢測波長：230nm；進(jìn)樣量：10μL。

1.2.2 定性分析

采用已知物保留時(shí)間對照法和內(nèi)加標(biāo)準(zhǔn)樣法定性。

1.2.3 定量分析

標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定：配制安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.2.1測定峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)、安賽蜜濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并對數(shù)據(jù)進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。樣品的測定：按1.2.1進(jìn)樣三次測定安賽蜜的峰面積，取算術(shù)平均值用回歸方程計(jì)算其含量。

1.3 方法的評價(jià)

采用樣品加標(biāo)準(zhǔn)樣品測定回收率，評價(jià)方法的準(zhǔn)確度；采用樣品多次平行進(jìn)樣測定相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，評價(jià)方法的精密度。

2 結(jié)果與討論

2.1 定性分析結(jié)果與討論

安賽蜜合成液、結(jié)晶母液的定性分析：分別取1.0、2.0mL合成液和結(jié)晶母液，定容到1000mL和100mL，進(jìn)樣10μL測定保留時(shí)間并與安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)樣品的保留時(shí)間對照。結(jié)果見圖1、圖2、和圖3。

圖1 安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖

圖2 安賽蜜結(jié)晶母液色譜圖

圖3 安賽蜜結(jié)晶母液加標(biāo)準(zhǔn)樣色譜圖

由圖1、圖2測得標(biāo)準(zhǔn)樣中安賽蜜的保留時(shí)間為1.728min、結(jié)晶母液中安賽蜜的保留時(shí)間為1.748min，兩者的保留時(shí)間相差0.020min，這是由于兩者的濃度相差較大造成。由圖3測得結(jié)晶母液加標(biāo)準(zhǔn)樣后，僅安賽蜜的色譜峰高明顯增加，峰形狀與安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)樣相似，且保留時(shí)間為1.722min，合成液中安賽蜜的保留時(shí)間為1.728min（圖略）。

2.2 定量分析結(jié)果與討論

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定

準(zhǔn)確稱取經(jīng)100℃婧娓桑2h的0.100g食品級安賽蜜樣品，定容到100mL，配制含安賽蜜1mg／mL基準(zhǔn)液。分別取基準(zhǔn)液0.1、0.25、0.5、1、2、4、8、15、20、25mL，定容到50mL，配制含安賽蜜分別為2、5、10、20、40、80、160、300、400、500μg／mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。按1.2.1的方法，每個(gè)樣品進(jìn)樣三次，取算術(shù)平均值，測定標(biāo)準(zhǔn)樣品中安賽蜜的色譜峰面積。以色譜峰面積為縱坐標(biāo)（y／mAU.sec），含量為橫坐標(biāo)（x／μg／mL），采用最小二乘法進(jìn)行線性回歸，在含量為2～400μg／mL 范圍內(nèi)，回歸方程為 y＝29.06x＋7.4997，相關(guān)系數(shù)R＝0.9999。在安賽蜜含量為2～500μg／mL范圍內(nèi)，R＝0.9965。說明在安賽蜜含量為2～400μg／mL范圍內(nèi)，安賽蜜的色譜峰面積與含量具有良好的線性關(guān)系。

2.2.2樣品的測定結(jié)果

分別取合成液、結(jié)晶母液1.0和2.0mL，用超純水定容到1000mL和100mL，按1.2.1進(jìn)樣三次，測定安賽蜜的色譜峰面積并計(jì)算其算數(shù)平均值，用回歸方程計(jì)算安賽蜜的含量。合成液的測定結(jié)果：y1＝8638.25，y2＝8725.50，y3＝8799.28，y＝（y1＋y2＋y3）／3＝8721.01。帶入y＝29.06x＋7.4997，x＝299.85μg／mL，則合成液中安賽蜜的含量為：299.85×1000＝299.85mg／mL。

結(jié)晶母液的測定結(jié)果：y1＝6981.90，y2＝6912.08，y3＝7038.48，y＝6977.49，x＝239.85μg／mL，則結(jié)晶母液中安賽蜜的含量為：239.85×50＝11.99mg／mL。

2.3 方法的評價(jià)結(jié)果

2.3.1 加標(biāo)回收率的測定

取2.0mL含安賽蜜為11.99mg／mL的結(jié)晶母液三份，分別加入500、2500、5000μg安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)品，用超純水定容到100mL，按1.2.1進(jìn)樣三次，測定安賽蜜的色譜峰面積并計(jì)算其算數(shù)平均值，用回歸方程計(jì)算安賽蜜的含量，按（加標(biāo)后測定值－加標(biāo)前測定值）／加標(biāo)量＝回收率，計(jì)算加標(biāo)回收率，結(jié)果見表1。平均加標(biāo)回收率為100.7%。

表1 加標(biāo)回收率測定結(jié)果

2.3.2 相對標(biāo)準(zhǔn)偏差的測定

取2.0mL結(jié)晶母液樣品六份，用超純水定容到100mL，每個(gè)樣品按1.2.1進(jìn)樣三次，測定安賽蜜的色譜峰面積并計(jì)算其算數(shù)平均值，用回歸方程計(jì)算安賽蜜的含量。六個(gè)樣品的測定結(jié)果分別為：238.21、239.78、237.98、239.86、240.42、241.02μg／mL。按下式計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)偏差和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。式中，xi－i樣品中安賽蜜的含量（μg／mL）?！－樣品中安賽蜜的含量的算術(shù)平均值（239.55μg／mL），N－樣品的數(shù)量（N＝6），σ－標(biāo)準(zhǔn)偏差。

3 結(jié) 論

建立了一種采用高效液相色譜法測定安賽蜜合成液、精制過程母液中安賽蜜的分析方法，采用已知物對照法定性，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。色譜條件為：Ecllpse XDB－C18色譜柱，φ4.6mm×150mm，5μm；流動(dòng)相：甲醇：水＝10：90（V／V）），流速1.0mL／min；柱溫25℃；檢測器：DAD，檢測波長：230nm；進(jìn)樣量：10μL。定量標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為y＝29.06x＋7.4997，相關(guān)系數(shù)R＝0.9999，線性范圍為2～400μg／mL。方法的加標(biāo)回收率為99.1～101.7%、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.51%、最低檢出限量為2μg／mL，完成一次測定的時(shí)間為7min。結(jié)果表明，該方法可以滿足安賽蜜生產(chǎn)控制分析的要求。

［1］Von Rymon Lipinski G W.The new intense sweetener acesulfame K.Food Chemistry，1985，（16）：259－269.

［2］彭望明.AK糖的合成與應(yīng)用［J］.武漢教育學(xué)院學(xué)報(bào)，1999，18（3）：71－73.

［3］江 玉.甜味劑安賽蜜的合成研究［J］.科技創(chuàng)新導(dǎo)報(bào)，2008，（32）：9.

［4］唐 云，馮 銳.甜味劑安賽蜜的合成研究［J］.四川師范學(xué)院學(xué)報(bào)，1999，20（1）：55－58.

［5］翟增遠(yuǎn)，王家保.HPLC測定果凍中防腐劑、甜味劑［J］.中國衛(wèi)生檢測雜質(zhì)，2009，119（4）：806－808.

［6］汪 輝，曹小彥.反相HPLC對果蔬飲料中14種常見食品添加劑的測定［J］.分析測試通報(bào)，2009，28（10）：1194－1197.

［7］張 玉，吳慧明，王偉，等.HPLC－蒸發(fā)散射檢測器同時(shí)測定食品中5種甜味劑［J］.食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào)，2010，27（1）：18－21.

［8］趙立峰，馬國.HPLC同時(shí)測定糕點(diǎn)中抗氧化劑、防腐劑和甜味劑［J］.食品科學(xué)，3010，31（8）：230－233.

Improvement of Analytical Method for Acesulfame K Industrial Process

Xue Lianhai， Zhe Weiwei， Wang Can

A analytical method is established by HPLC for the synthesis solution and the mother liquor in acesulfame K industrial process，so that the real time analysis can be achieved for the process synthesizing and refining acesulfame K.The column is Ecllpse XDB－C18，φ4.6mm×150mm，the mobile phase is methanol is water＝10：90（V／V），1.0mL／min，and the detector is DAD，230nm.The equation of quantitative analysis is y＝29.06x＋7.4997，R＝0.9999，and the linear field is 2～400μg／mL.Recovery of affixed standard matter is 99.1～101.7%，relative standard deviation is 0.51%.The result shows that the method can be used in the control analysis of ancesulfame K industrial process.

HPLC；ancesulfame K；industrial process；control analysis

TS27

A

1673-1794（2012）05-0051-03

薛連海（1958－），男，吉林省吉林市人，教授，研究方向：精細(xì)化工產(chǎn)品及工藝的開發(fā)與應(yīng)用、工業(yè)分析。

安徽省質(zhì)量工程（20101035）、滁州學(xué)院質(zhì)量工程（人才培養(yǎng)模式創(chuàng)新試驗(yàn)區(qū)、特色專業(yè)）資助項(xiàng)目

2011-06-06