初禎 陳少夫
趨化因子CCL20及其受體CCR6在胰腺癌組織中的表達及意義
初禎 陳少夫
越來越多的數(shù)據(jù)表明,趨化因子及其受體在胰腺癌[1-3]的腫瘤生物學(xué)中起著重要作用。本研究檢測趨化因子CCL20及其受體CCR6在胰腺癌中的表達,分析兩者的相關(guān)性,探討其在胰腺癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。
1.材料:收集42例中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院病理科2005年至2008年間診斷為胰腺導(dǎo)管腺癌(PADC)的組織蠟塊。同時選取十二指腸腫物切除術(shù)所獲得的10例正常胰腺組織為對照。
2.方法:采用快捷免疫組化MaxVision兩步法檢測CCL20及CCR6的表達。兔抗人CCL20和CCR6多抗購自北京博奧森生物技術(shù)有限公司,工作濃度1∶100。即用型快捷免疫組化MaxVision試劑盒(鼠/兔)及Max007TM原位微信號(DAB)放大試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司,按說明書操作。胞質(zhì)或胞膜中出現(xiàn)黃色或褐色顆粒者為陽性。每張切片隨機選取4個高倍視野,分別根據(jù)染色強度和陽性細胞比例進行評分。染色強度:無著色0分,淡黃色1分,黃色2分,棕黃色或褐色3分;陽性細胞比例:≤5% 0分, 5%~25% 1分,25%~50% 2分,50%~75% 3分,>75% 4分。兩者乘積0為陰性,≥1分為陽性。
3.統(tǒng)計學(xué)處理:采用SPSS13.0軟件分析。陽性率的比較采用χ2檢驗,相關(guān)性的分析采用Spearman等級相關(guān)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
1.CCL20和CCR6陽性表達率:CCL20主要表達于腫瘤細胞的胞質(zhì)或胞膜中(圖1),正常細胞的胰島或胰腺導(dǎo)管上皮細胞亦有少量表達。42例胰腺癌組織中,30例(71.4%)表達陽性,10例正常胰腺組織中,2例(20%)表達陽性,兩者差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。CCR6主要表達于腫瘤細胞的胞質(zhì)或胞膜中,42例胰腺癌組織中,32例(76.2%)表達陽性,10例正常胰腺組織中,3例(30%)表達陽性,兩者差異亦具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。胰腺癌組織中CCL20與CCR6表達呈正相關(guān)(r=0.352,P=0.022)。
2.CCL20和CCR6表達與胰腺癌臨床病理特征的關(guān)系:CCL20蛋白表達與腫瘤分化程度相關(guān)(P<0.05),與年齡、性別、腫瘤臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等無相關(guān)性;CCR6的表達與腫瘤病理特征均無相關(guān)性(表1)。
圖1胰腺癌組織CCL20(a)、CCR6(b)的表達(免疫組化 ×400)
表1CCL20和CCR6表達與胰腺癌臨床病理特征的關(guān)系
討論趨化因子是一族具有趨化作用的細胞因子,分子量較小,對白細胞遷移起關(guān)鍵作用,通過與靶細胞膜上相應(yīng)的趨化因子受體結(jié)合發(fā)揮作用[4-5]。趨化因子受體屬G蛋白耦聯(lián)的7次跨膜受體超家族,其N末端與配體結(jié)合,胞內(nèi)區(qū)與G蛋白耦聯(lián),C末端含絲氨酸/蘇氨酸,可磷酸化,參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。趨化因子與其受體結(jié)合后在調(diào)節(jié)白細胞定向移動、細胞生長、發(fā)育、分化、凋亡、組織損傷、淋巴細胞歸巢、免疫應(yīng)答、HIV感染和血管生成等眾多生理、病理過程中起著非常重要的作用 。近來,越來越多的證據(jù)表明,趨化因子與腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。腫瘤細胞分泌的趨化因子與相應(yīng)受體結(jié)合后能促進癌間質(zhì)炎性細胞浸潤、腫瘤血管生成、基質(zhì)蛋白降解等,但其確切機制仍需進一步研究。
目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)幾十種趨化因子,根據(jù)半胱氨酸殘基位置的不同,趨化因子分為4個亞族,即C、CC、CXC與CX3C,相應(yīng)的受體稱為XCR、CCR、CXCR與CX3C[6-7]。CCL20是近年來發(fā)現(xiàn)的一種CC亞族的趨化因子,它在白血病、淋巴瘤、黑色素瘤、肝癌、前列腺癌、大腸癌、肺癌及口腔鱗狀細胞癌[8-11]等癌組織中高表達。Kleeff等[12]報道,胰腺癌組織存在CC類趨化因子CCL20/Mip-3α及其受體CCR6 mRNA高表達。本研究結(jié)果顯示,CCL20及CCR6在胰腺癌中均高表達,同時CCL20表達與胰腺癌分化程度有關(guān),與Kleeff等結(jié)果一致,但其作用機制有待深入研究。
[1] Matsuo Y, Ochi N, Sawai H, et al. CXCL8/IL-8 and CXCL12/SDF-1alpha co-operatively promote invasiveness and angiogenesis in pancreatic cancer. Int J Cancer ,2009, 124:853-861.
[2] Wente MN, Mayer C, Gaida MM, et al. CXCL14 expression and potential function in pancreatic cancer. Cancer Lett, 2008, 259:209-217.
[3] Wang Z, Ma Q, Liu Q, et al. Blockade of SDF-1/CXCR4 signalling inhibits pancreatic cancer progression in vitro via inactivation of canonical Wnt pathway. Br J Cancer, 2008, 99:1695-1703.
[4] Pellegrno A,Nacca A,Scarelli C,et al.Chemokines and tumors.Recent Prog Med, 2002,99:642-654.
[5] Rossi D, Zlotnik A. The biology of chemokines and their receptors.Annu Rev Immunol,2000,18: 217-242.
[6] Andre F, Cabioglu N, Assi H, et al. Expression of chemokine receptors predicts the site of metastatic relapse in patients with axillary node positive primary breast cancer. Ann Oncol, 2006, 17:945-951.
[7] Rubie C, Frick VO, Wagner M, et al. Chemokine expression in hepatocellular carcinoma versus colorectal liver metastases. World J Gastroenterol, 2006, 12: 6627-6633.
[8] Ghadjar P, Coupland SE, Na IK, et al. Chemokine receptor CCR6 expression level and liver metastases in colorectal cancer. J Clin Oncol, 2006, 24:1910-1916.
[9] Rubie C, Frick VO, Wagner M,et al. Enhanced expression and clinical significance of CC-chemokine MIP-3 alpha in hepatocellular carcinoma. Scand J Immunol, 2006, 63:468-477.
[10] Abiko Y, Nishimura M, Kusano K, et al.Expression of MIP-3alpha/CCL20, a macrophage inflammatory protein in oral squamous cell carcinoma.Arch Oral Biol ,2003, 48:171-175.
[11] Ghadjar P, Loddenkemper C, Coupland SE,et al. Chemokine receptor CCR6 expression level and aggressiveness of prostate cancer. J Cancer Res Clin Oncol, 2008, 134:1181-1189.
[12] Kleeff J, Kusama T, Rossi DL, et al.Detectlon and localization of Mip-3alpha/LARC/Exodus, a macrophage proinflammatory chemokine, and its CCR6 receptor in human pancreatic cancer.Int J Cancer, 1999, 81:650-657.
10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2012.02.022
110004 沈陽,中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院消化內(nèi)科
陳少夫,Email:csf196211@yahoo.com.cn
2011-05-03)
(本文編輯:呂芳萍)