B超聯(lián)合骨橋蛋白和CA125檢測在卵巢癌早期診斷中的價值

樊江波， 張格林， 吳 靜， 高艷娥

(西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科， 西安 710004;*通訊作者，E-mail:fanjiangbo2004@163.com)

卵巢癌是對婦女危害嚴(yán)重、治療效果差的惡性腫瘤，發(fā)病率僅次于子宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌而列居女性生殖器官惡性腫瘤第3位，但卻位列婦科惡性腫瘤死亡原因的首位［1］。因其發(fā)病隱匿，部位深，婦科檢查不易觸及，早期通常無明顯癥狀，且易發(fā)生腹腔轉(zhuǎn)移，約80%的患者就診時已是晚期，而晚期患者的5年生存率僅為15%－25%，相比之下，早期卵巢癌患者的5年生存率接近90%。據(jù)統(tǒng)計，在中國，卵巢癌每年新發(fā)病人數(shù)為19.2萬，死亡人數(shù)卻高達(dá)11.4萬［2］。因此，早期診斷是提高卵巢癌患者5年生存率的關(guān)鍵。

如何早期診斷和提高惡性腫瘤的治愈率，一直是醫(yī)學(xué)工作者努力的目標(biāo)。提高惡性腫瘤治愈率的關(guān)鍵是早期發(fā)現(xiàn)及早期治療。卵巢癌傳統(tǒng)的腫瘤標(biāo)志物如CA125敏感性及特異性不高，陽性預(yù)測值低。B超是目前現(xiàn)有的卵巢癌早期篩查方法中公認(rèn)為最有意義的方法之一，但對卵巢囊性病變的超聲診斷必須緊密結(jié)合病史及其他實驗室檢查，以減少誤診。骨橋蛋白(osteopontin，OPN)作為腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制的重要參與者，可作為卵巢癌的新的標(biāo)志物用于卵巢癌的早期診斷和病情預(yù)測［3－5］，其在卵巢癌中的表達(dá)、外周血濃度及受體水平，均可作為無創(chuàng)性腫瘤篩查的指標(biāo)。因此，尋找一些早期發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤的篩查途徑是非常重要的，也是腫瘤學(xué)界的重點攻關(guān)課題。學(xué)者們認(rèn)為幾種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測可提高卵巢癌早期診斷的陽性率。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院2008－01～2011－06婦產(chǎn)科門診及住院卵巢腫瘤患者70例，其中30例診斷為卵巢癌(實驗組)，年齡30－67歲，平均(44.5±10.8)歲，40例診斷為卵巢良性腫瘤(對照組)，年齡28－63歲，平均(41.8±9.7)歲，均經(jīng)病理確診。兩組患者在年齡、文化程度、婚姻職業(yè)及地域分布等方面比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。病例選擇排除了合并其他惡性腫瘤、婦科炎癥、結(jié)核、肝腎功能異常及內(nèi)科合并癥等疾病者。所有患者手術(shù)前均行血清CA125、OPN水平檢測及B超檢查。其中卵巢癌組患者臨床按FIGO分期標(biāo)準(zhǔn)分為Ⅰ期5例、Ⅱ期6例、Ⅲ期10例和Ⅳ期9例。組織分化程度:低分化13例，中分化10例，高分化7例。

1.2 血清檢測方法 以上各組患者均在清晨采集患者空腹靜脈血5 ml，以枸櫞酸鈉抗凝，2 500 r/min離心5 min后，取血清檢測。

1.2.1 OPN測定 用 ELISA法進(jìn)行血清 OPN測定，試劑盒購自美國BEPEC-BIOPHARMA公司，嚴(yán)格遵守說明書操作。洗板機(jī):BIO-RAD1575(美國)。酶標(biāo)儀:BIO-RAD550(美國)。按照試劑盒的說明 OPN 臨界值為30.0 ng/ml，OPN 測定值＞30.0 ng/ml為陽性。

1.2.2 CA125測定 采用電化學(xué)發(fā)光方法定量測定CA125含量。儀器:羅氏Elecsys2010全自動電化學(xué)模塊(德國)。試劑盒:Roche Diagnostics GmbH羅氏原裝進(jìn)口試劑(德國)。臨界值:血清CA125臨界值為35.0 U/ml，CA125 測定值＞ 35.0 U/ml為陽性。

1.3 超聲檢查方法 超聲顯像使用美國GE公司LOGIQ5型超聲診斷儀，探頭頻率3.5 MHz，所有患者均經(jīng)腹部或經(jīng)陰道B超常規(guī)檢查子宮、附件，作縱、橫、斜向掃描，顯示腫塊后，詳細(xì)描述其大小、形態(tài)、內(nèi)部回聲及周圍器官的關(guān)系，有無腹水，并做出圖像診斷。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 使用SPSS11.5軟件，兩組樣本均數(shù)比較采用獨立樣本t檢驗，兩個樣本率比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 卵巢良惡性腫瘤B超的特點 B型超聲檢測腫塊的形態(tài)、部位、大小，提示腫瘤性狀如囊性、囊實性或?qū)嵭?，囊?nèi)有無乳頭以及鑒別腹水及結(jié)核性包裹積液等，但對于小于1 cm的實性包塊不易測出。卵巢癌的典型超聲特點:以囊實性和實性回聲為主;具體圖像可呈多樣性，表現(xiàn)為回聲不規(guī)則;腫瘤壁薄厚不均、不規(guī)則且包膜不完整，表面粗糙，可有向囊內(nèi)或壁外生長之實性團(tuán)塊;腫塊內(nèi)部回聲紊亂強(qiáng)弱不均，其內(nèi)可見乳頭聲影，多為雙側(cè)病變，分房者多見，常伴有腹水征回聲(見圖1)。卵巢良勝腫瘤的超聲特點:一側(cè)或雙側(cè)附件無回聲區(qū)，大小不一，以囊性病變?yōu)橹?形態(tài)規(guī)則，包膜完整，壁薄、內(nèi)壁光滑，多為單房，也可有多個分隔，以單側(cè)多見;邊界清楚之無回聲至低回聲區(qū)，有時可見均勻分布的強(qiáng)回聲光點或集中的增強(qiáng)回聲區(qū)(畸胎瘤);無腹水征及腹腔結(jié)節(jié)(見圖2)。本實驗組30例卵巢癌患者經(jīng)B超診斷21例，敏感度為70.0%，特異度為92.5%。

圖1 卵巢癌患者超聲圖像(漿液性囊腺癌，囊內(nèi)實性團(tuán)塊伴有腹水)Fig 1 Ultrasonic imaging of ovarian cancer

圖2 卵巢良性腫瘤患者超聲圖像(黏液性囊腺瘤，壁薄、光滑，有分隔)Fig 2 Ultrasonic imaging of benign ovarian cancer

2.2 血清OPN、CA125測定水平的比較 卵巢良性腫瘤組和卵巢癌組血清OPN水平統(tǒng)計比較具有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01，見表1)。卵巢良性腫瘤組和卵巢癌組血清CA125水平也具有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01，見表1)。

2.3 B超聯(lián)合OPN、CA125檢測對卵巢癌的診斷價值 本實驗應(yīng)用B超檢查、血清OPN和CA125三種檢測方法對卵巢癌患者進(jìn)行檢測，進(jìn)行了敏感性、特異性的比較。30例卵巢癌患者中，血清OPN檢測陽性24例，陽性率80.0%;血清CA125檢測陽性23例，陽性率76.7%;B超檢測陽性22例，陽性率73.3%;三者聯(lián)合檢測陽性29例，陽性率96.7%。

在本實驗中，OPN的敏感性為80.0%，CA125檢測卵巢癌的敏感性76.7% ，B超檢查的敏感性為73.3%，OPN+CA125+B超聯(lián)合檢測的敏感性為96.7%，OPN+CA125+B超聯(lián)合檢測較 CA125、OPN及B超單獨檢測敏感性高(P＜0.05，見表2)。同時統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)三者聯(lián)合檢測與單獨檢測間特異性無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05，見表2)。

表1 卵巢腫瘤患者血清OPN、CA125變化(±s)Tab 1 Serum levels of OPN and CA125 in ovarian cancer(±s)

表1 卵巢腫瘤患者血清OPN、CA125變化(±s)Tab 1 Serum levels of OPN and CA125 in ovarian cancer(±s)

與卵巢良性腫瘤組比較，*P＜0.01

卵巢癌組 30 218.05±45.18 276.58±39.35

表2 卵巢癌三種檢測方法的敏感性和特異性 (%)Tab 2 Sensitivities and specialites of three detection methods for ovarian cancer (%)

3 討論

女性一生罹患卵巢癌的幾率大約為1.4%(或1/70)，目前還未尋找出早期診斷卵巢癌的有效方法［6］。如何提高卵巢癌的早期診斷及早期處理，已成為改善卵巢癌患者生存質(zhì)量的關(guān)鍵。目前臨床上檢測卵巢癌的方法有限，常用的檢測指標(biāo)如CA125等，因其敏感性及特異性不高，單獨診斷卵巢癌有一定的局限性。已有學(xué)者們研究發(fā)現(xiàn)幾種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測可提高卵巢癌早期診斷的陽性率［7－8］。因此，尋求多種方法聯(lián)合檢查，有助于卵巢癌的早期診斷。B超檢查在盆腔附件腫塊的檢查中具有非常重要作用。通過彩色多普勒超聲檢查，能確定卵巢及其新生組織血流變化，根據(jù)所測卵巢的大小、形態(tài)、血流和血管分布早期發(fā)現(xiàn)卵巢病變，有助于診斷。尤其經(jīng)陰道超聲，探頭接進(jìn)盆腔內(nèi)結(jié)構(gòu)，可應(yīng)用較高頻率的探頭，圖像質(zhì)量得到明顯改進(jìn)，有利于小病變及血流的檢出。在惡性腫瘤中，因新生血管形成比較多，多普勒檢查的搏動指數(shù)(PI)及阻力指數(shù)(RI)檢測對直徑＞2 cm卵巢腫瘤有一定診斷意義，但對＜2 cm卵巢腫瘤的篩查有效性還不明確［9］。本實驗組30例卵巢癌患者經(jīng)B超診斷22例，敏感度為73.3%，特異度為92.5%。由此可見超聲診斷必須緊密結(jié)合病史及其他實驗室檢查，以減少漏診及誤診。CA125是存在于胚胎發(fā)育過程體腔上皮細(xì)胞的大分子糖蛋白。卵巢癌患者CA125可以進(jìn)入體循環(huán)，通過檢測患者血清中CA125的含量，可以作為卵巢癌臨床診斷的一種指標(biāo)［10］。目前臨床上檢測易產(chǎn)生假陽性，主要原因是因為在許多良性病變?nèi)缱訉m內(nèi)膜異位癥、子宮肌瘤、盆腔炎、良性卵巢囊腫、早期妊娠、結(jié)核性腹膜炎及有腹水或胸水的良惡性病變?nèi)绺斡不?、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌、肝癌和肺癌均可?dǎo)致CA125升高。生理條件下，如月經(jīng)期或妊娠期也會有CA125水平的升高［11］，因此其不能單獨作為早期篩查的指標(biāo)。另外CA125與漿液性卵巢癌密切相關(guān)，而與黏液性等其他卵巢腫瘤則不相關(guān)［12］，使其應(yīng)用具有一定的局限性。尚需進(jìn)一步尋找新的卵巢癌早期預(yù)警或者診斷的生物學(xué)指標(biāo)。

OPN是一種分泌型鈣結(jié)合磷酸化糖蛋白，與許多腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、預(yù)后有關(guān)［13，14］。大量實驗證明，OPN廣泛表達(dá)于人體不同腫瘤組織并參與腫瘤的形成，在惡性腫瘤患者的腫瘤組織和血液中的表達(dá)水平高，與腫瘤患者的篩選、病情預(yù)測和預(yù)后判斷方面有著重要的聯(lián)系［15，16］。OPN 作為腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制的重要參與者，可作為卵巢癌的新的標(biāo)志物用于卵巢癌的早期診斷和病情預(yù)測，其在卵巢癌中的表達(dá)、外周血濃度及受體水平，均可作為無創(chuàng)性腫瘤篩查的指標(biāo)。

卵巢癌公認(rèn)的標(biāo)志物是CA125，但用于早期診斷和監(jiān)測預(yù)后時敏感性和特異性較低。因此目前傾向于采用多種血清腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測，以提高診斷的特異性和靈敏性。Schorge等［17］研究發(fā)現(xiàn)90%的復(fù)發(fā)性卵巢癌中的OPN升高先于CA125(平均領(lǐng)先3個月)。因此有學(xué)者認(rèn)為，OPN在監(jiān)測復(fù)發(fā)性卵巢癌方面可能是CA125的有益補(bǔ)充［18］。本實驗研究OPN在卵巢癌患者血清中的表達(dá)情況，同時聯(lián)合檢測CA125，以期尋找臨床上早期診斷卵巢癌并判斷其預(yù)后的可靠指標(biāo)。同時聯(lián)合B超檢查有望提高卵巢癌的早期篩查率。

由于卵巢癌無典型癥狀及臨床表現(xiàn)，且位于盆腔深部，一般的檢查方法難于發(fā)現(xiàn)。目前還未找到特異性和敏感性均高的能作為卵巢癌篩查的滿意指標(biāo)。在本實驗中，CA125檢測卵巢癌的敏感性76.7%，OPN的敏感性為80.0%，B超檢查的敏感性為73.3%，CA125聯(lián)合 OPN檢測的敏感性為86.7%，OPN+CA125+B超聯(lián)合檢測的敏感性為96.7%;OPN+CA125+B超聯(lián)合檢測較 CA125、OPN及B超單獨檢測敏感性高(P＜0.05)。同時統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)三者聯(lián)合檢測與單獨檢測間特異性無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。說明聯(lián)合檢測 CA125和OPN可以提高卵巢癌的診斷率。血清OPN、CA125檢測及B超檢查對于診斷卵巢癌均有一定的價值，但也有各自的局限性。三者聯(lián)合應(yīng)用可減少漏診和誤診，提高術(shù)前診斷的陽性率，對醫(yī)生的治療也有更進(jìn)一步的幫助。所以，可以認(rèn)為血清OPN、CA125檢測及聯(lián)合B超檢查有可能進(jìn)一步早期診斷卵巢癌，且方便經(jīng)濟(jì)無創(chuàng)，是理想可行的診斷方法。

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