李云寧 程仁麗 程 靜

(1解放軍第451醫(yī)院中醫(yī)藥研究所，陜西西安，710054;2武漢市普愛醫(yī)院西院骨科)

高脂血癥是指體內(nèi)脂質(zhì)代謝紊亂引起血液中一種或多種脂質(zhì)成分含量的異常增高。人體脂質(zhì)代謝異常，血液黏稠度增高，而且黏稠的血液會(huì)逐步損害血管，使動(dòng)脈血管狹窄和硬化，最后造成全身各組織供血不好，由此引發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化等各種心腦血管疾病。因此我院研制的活血舒通合劑具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

1 儀器與材料

1.1 儀器 ST－360酶標(biāo)儀，由上?？迫A實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司提供。ZL4500全自動(dòng)血流變儀，由眾馳偉業(yè)公司提供。TYXN－96I多功能智能血液凝集儀，由上海通用機(jī)電技術(shù)研究所提供。

1.2 藥品和試劑 活血舒通合劑(由解放軍451醫(yī)院制劑中心提供，批號(hào):20100826);絞股蘭總苷片(由廣州白云山和記黃浦中藥有限公司提供，批號(hào):E6A003);復(fù)方丹參片(由廣州白云山和記黃埔中藥有限公司提供，批號(hào):K7A012);復(fù)方羊角片(由哈藥集團(tuán)三精黑河藥業(yè)有限公司提供，批號(hào):091005);總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL－C)測(cè)定試劑盒，高密度脂蛋白膽固醇(HDL－C)測(cè)定試劑盒(均由南京建成生物有限公司提供，批號(hào)分別為20100714、20100708、20100625、20100524)。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD大鼠、KM小鼠，SPF級(jí)，由西安交通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。許可證號(hào):SCXK(陜)2007－001。

2 方法

2.1 活血舒通合劑對(duì)高脂血癥小鼠的血脂的影響［1－2］取小鼠60只，按體重隨機(jī)分為6組，每組10只。分別為活血舒通合劑高劑量組(42.9g/kg)、中劑量組(21.45g/kg)、低劑量組(10.73g/kg)，陽性對(duì)照組(80mg/kg)，模型組和對(duì)照組灌胃給予等體積的蒸餾水。除正常組外，其余5組，每天上午灌胃給予高脂乳劑(取豬油20g置于燒杯中，在電爐上加熱融化，加入膽固醇10g溶化，再加入膽酸鈉2g和丙基硫氧嘧啶1.0g，充分?jǐn)嚢杓尤胪聹兀?0 20mL，丙二醇20mL及蒸餾水30mL，不斷攪拌。待丙基硫氧嘧啶溶解后，冷卻至室溫，再加蒸餾水至100mL。充分?jǐn)嚢瑁鶆蚣闯?。冰箱保存。使用時(shí)用水浴中融化)10mL/kg，正常組則灌胃給予等體積的溶媒(100mL含20mL吐溫－80和20mL丙二醇)。每天下午各給藥組分別灌胃給藥，連續(xù)給藥40天，各組小鼠末次給藥后，禁食不禁水12h，斷頭取血，將血液放置30min，離心15min，3000r/min，分離血清。用酶標(biāo)儀測(cè)定血清總膽固醇(CH)(PAP法)和甘油三酯(TG)(PAP法)的含量、高密度脂蛋白(HDL－C)。計(jì)算低密度脂蛋白(LDL－C)。

表1 活血舒通合劑對(duì)血脂的影響(±s，n=10)

表1 活血舒通合劑對(duì)血脂的影響(±s，n=10)

注:與模型組比較，*P ＞0.05，△P＜0.05。

組別 劑量(g/kg) TC(mmol/L) TG(mmol/L) HDL－C(mmol/L) LDL－C(mmol/L)對(duì)照組 － 6.14±1.98△ 2.35±0.93△ 2.27±0.52△ 3.90±1.49△模型組 － 7.89±0.82 4.55±1.04 1.57±0.41 5.47±1.72活血舒通合劑組 10.73 7.58±1.50 4.03±1.03 1.73±0.38 5.05±2.07活血舒通合劑組 21.45 6.88±1.42 3.13±1.76* 1.96±0.41* 4.71±1.58活血舒通合劑組 42.9 6.37±2.03* 3.28±1.52* 2.05±0.58* 4.03±1.31*絞股藍(lán)總苷片組 0.08 6.22±2.29* 3.09±1.42* 2.17±0.75* 3.38±1.29*

由表可見，活血舒通合劑高劑量組能降低TC、TG、LDL－C含量，升高HDL－C含量;中劑量組能降低TG含量、升高HDL－C含量，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

2.2 活血舒通合劑對(duì)急性血瘀模型大鼠血液流變學(xué)的影響［3］取SD大鼠60只，體重180～220g，♀♂各半，按體重和性別隨機(jī)分為6組，每組10只，分別為對(duì)照組(等量蒸餾水)、模型組(等量蒸餾水)、復(fù)方丹參片組(0.25g/kg)、高劑量組(29.7g生藥/kg)、中劑量組(14.85生藥g/kg)、低劑量組(7.43g生藥/kg)。每天一次，連續(xù)14天，末次給藥1h后，對(duì)照組大鼠皮下注射等容量的生理鹽水，不放入冰水中;其他各組大鼠皮下注射腎上腺素0.2mL/只，共兩次，間隔4h，中間將大鼠浸入冰水內(nèi)(4℃)5min，次日末次給藥后1h，將大鼠以10%烏拉坦1mL/100g體重麻醉，分離單側(cè)頸總動(dòng)脈，插管，接取動(dòng)脈血5mL，肝素抗凝。用全自動(dòng)血流變儀檢測(cè)全血高切、中切、低切黏度，血漿黏度、全血還原黏度、紅細(xì)胞壓積。將結(jié)果以±s表示，采用單因素方差分析進(jìn)行檢驗(yàn)。

表2 活血舒通合劑對(duì)急性血瘀模型大鼠血液流變性的影響(±s，n=10)

表2 活血舒通合劑對(duì)急性血瘀模型大鼠血液流變性的影響(±s，n=10)

注:與模型組比較，＊＊P ＜0.01。

組別 劑量(g/kg)全血黏度高切(200/s) 中切(30/s) 低切(5/s) 血漿黏度 全血還原黏度 RBC壓積對(duì)照組 — 4.86±1.73* 7.6±2.02* 11.42±4.76＊＊ 1.21±0.53＊＊ 9.12±3.23* 0.29±0.11＊＊模型組 — 7.94±2.97 10.86±3.0 18.63±4.16 2.47±1.25 13.32±5.39 0.54±0.24活血舒通合劑組 7.43 7.07±3.68 9.35±2.89 18.28±5.90 2.14±0.81 12.61±5.85 0.50±0.24活血舒通合劑組 14.85 6.88±2.49 9.16±2.86 17.03±3.05 1.78±0.55 11.04±4.89 0.48±0.25活血舒通合劑組 29.7 5.71±1.09* 8.03±2.98* 15.34±2.39* 1.59±0.42* 9.4±2.55* 0.35±0.15*丹參片組 0.25 5.14±1.74* 7.97±3.11* 14.64±3.6* 1.52±0.64* 9.25±3.02* 0.33±0.18*

由表可見，活血舒通合劑高劑量組能降低全血黏度、血漿黏度、全血還原黏度、紅細(xì)胞壓積，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。中、低劑量組對(duì)全血黏度、血漿黏度、全血還原黏度、紅細(xì)胞壓積呈下降趨勢(shì)，但與模型組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

2.3 活血舒通合劑對(duì)大鼠血小板聚集的影響［4］取SD大鼠50只，體重180～250g，按體重和性別隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為高劑量組(29.7g生藥/kg)、中劑量組(14.85g生藥/kg)、低劑量組(7.43g生藥/kg)，復(fù)方羊角片組(0.34g/kg)，對(duì)照組(蒸餾水)。給藥體積為1mL/100g體重，連續(xù)灌胃12天。末次給藥2h后，頸動(dòng)脈取血，制備PRP(富血小板血漿)及PPP(貧血小板血漿)，以ADP為誘導(dǎo)劑。以血小板聚集儀測(cè)定1min、5min的聚集率、最大聚集率。將結(jié)果以±s表示，采用單因素方差分析進(jìn)行檢驗(yàn)。

表3 活血舒通合劑對(duì)大鼠血小板聚集的影響(±s，n=10)

表3 活血舒通合劑對(duì)大鼠血小板聚集的影響(±s，n=10)

注:與對(duì)照組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01。

組別 劑量(g/kg)1min聚集率(%)5min聚集率(%)最大聚集率(%)60.82±18.18 73.92±14.54 77.81±12.30活血舒通合劑組 7.43 57.90±16.58 69.49±12.43 71.97±14.65活血舒通合劑組 14.85 49.13±15.14 63.81±13.84 68.94±11.35活血舒通合劑組 29.7 45.36±14.28* 57.15±11.75* 59.32±13.67*復(fù)方羊角片組 0.34 38.28±12.54＊＊47.28±22.69＊＊ 50.39±20.22對(duì)照組 —＊＊

由表可見，活血舒通合劑高劑量組能明顯降低大鼠1min、5min的聚集率和最大聚集率，與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。中、低劑量組有降低1min、5min的聚集率和最大聚集率的趨勢(shì)，與對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

3 討論

高脂血癥系膏脂代謝失常的病癥，其病因多由飲食不當(dāng)，心情內(nèi)傷、脾虛失運(yùn)、痰瘀阻滯、臟腑功能失調(diào)及年老體衰所致。高脂血癥發(fā)病主要由于過食肥甘原味和醇酒乳酪，使臟腑輸化不及，或臟腑功能失調(diào)，飲食不歸正化，膏脂輸化不及或先天稟賦不足，無以“陽化氣、陰成形”，均可導(dǎo)致膏脂過多，滲入血中，發(fā)生高脂血癥。膏脂本為正常的營養(yǎng)物質(zhì)，過剩則為害，主要表現(xiàn)為痰濁為患，痰濁存于血脈常使脈絡(luò)壅滯不暢，故高脂血癥每由痰濁而致血瘀，痰瘀互結(jié)，膠著脈道，終致脈痹、中風(fēng)等病癥發(fā)生。高脂血癥屬正虛邪實(shí)之癥，正虛即臟腑氣血虛衰，其重點(diǎn)在肝脾腎，邪實(shí)主要痰濁和瘀血［5］。

基于以上中醫(yī)理論研制的活血舒通合劑由丹參、黃芪、女貞子、制首烏、制黃精、桑寄生、茯神、全瓜蔞、生山楂、茵陳、當(dāng)歸、川芎、赤芍、薤白組成。方中黃芪、女貞子、制首烏、制黃精、桑寄生合用補(bǔ)肝腎;黃芪、茯神健脾安神、利濕;薤白、全瓜蔞、生山楂、茵陳、郁金疏肝理氣、利膽，加速脂質(zhì)排泄;丹參、赤芍、葛根、當(dāng)歸、郁金、山楂兼有活血祛瘀之功。諸藥合用活血祛瘀、健脾理氣、化濕祛痰、疏肝利膽、補(bǔ)益肝腎。

研究資料顯示，高脂血癥與患者血液黏稠度及“瘀血”“痰濁”相關(guān)，血脂代謝紊亂與血小板高聚集性互為影響。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)該藥具有較好的降血脂作用，能明顯降低高脂血癥小鼠血清TC、TG、LDL－C、升高HDL－C的含量;同時(shí)降低急性血瘀模型大鼠的全血高切、中切、低切黏度，血漿黏度、全血還原黏度、紅細(xì)胞壓積;降低大鼠1min、5min血小板聚集率和最大聚集率。該藥可能通過抑制血小板聚集性、改善血液流變性而達(dá)到降低血脂異常的致病作用。

［1］王樹桂，潘瑩.復(fù)方絞股藍(lán)膠囊對(duì)高脂血癥小鼠血脂的影響［J］.廣西中醫(yī)藥，2005，28(3):54 －55.

［2］李潔，林杰，李征，等.復(fù)方丹參滴丸對(duì)實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠血液流變學(xué)影響的研究［J］.中醫(yī)藥學(xué)刊，2002，20(4):496 －499.

［3］陳奇主編.中藥藥理研究方法學(xué)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2006:554－555.

［4］李冀，旺建偉.疏解少陽、祛風(fēng)止痛法對(duì)大鼠血小板聚集功能影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2004，32(2):6 －7.

［5］王亞紅，郭維琴.高脂血癥中醫(yī)臨床研究評(píng)述［J］.中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2001，7(10):71.