邱昌文，顏秀娟，姜 瑩

（廣西壯族自治區(qū)南寧中心血站 530003）

對獻血者血液標本ABO、Rh（D）及不規(guī)則抗體的血型篩檢是血站血液篩查實驗室的一個重要項目。ABO血型、Rh（D）血型的鑒定要求100%準確，這關系到輸血患者的生命安全［1］。ABO血型定型的方法有紙片法、試管離心法、U型微板法、梯形微板法、微柱凝膠法。傳統(tǒng)的手工平板法不僅效率低，而且易因人為因素產生血型誤定等嚴重后果。經(jīng)典的試管離心方法目前仍被認為是最可信賴的ABO定型方法［2］，但操作復雜與紙片法一樣不適合血站系統(tǒng)大批量的檢測。實驗室自動化檢測不僅提高實驗室的高通量檢測效率，而且可以減少人為操作錯誤發(fā)生的機會，保證輸血安全。目前國內血液篩查實驗室應用全自動血型檢測系統(tǒng)進行血型檢測，有的方法較先進，但因儀器價格昂貴、耗材成本高［3－4］，一直未能得到推廣使用。因此，探討一種高通量、結果精確且價格適合的自動化血型檢測系統(tǒng)對于血站系統(tǒng)而言有重要意義。本站血液篩查實驗室2008年引進瑞士HAMILTON公司生產的全自動血型分析儀STAR BG，現(xiàn)將應用情況報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源 自2011年1～12月118 128例經(jīng)乙二胺四乙酸二鉀抗凝的日常獻血者血液標本，全血標本試管以3 000 r／min離心10min。

1.2 儀器與試劑 HAMILTON STAR BG全自動血型分析儀（瑞士 HAMILTON公司）、96孔 U型SBS微孔板（丹麥NUNC公司）、單克隆抗A、抗B標準血清（上海血液生物有限公司）、抗D標準血清（上海血液生物有限公司），標準A、B、O紅細胞懸液（血站自配），所有試劑經(jīng)本站確認并在使用有效期內。

1.3 實驗方法 利用全自動加樣功能分別取自試管內的血漿40μL和紅細胞懸液30μL（先吸200μL 0.9%NaCl，再吸6μL紅細胞在檢測微孔內稀釋混勻分樣）分配至微孔板內；然后分別加入單克隆抗A、抗B標準血清和抗D標準血清各40μL做正定型檢測及Rh（D）檢測，再分別加入2%～3%的A、B、O標準紅細胞懸液各30μL做反定型檢測和鹽水法不規(guī)則抗體篩查；加樣結束后，血型儀孵育渦旋離心振蕩器自動混合、離心及懸浮靜置微板，時間分別為120s、270s和240s，然后自動傳輸96孔U型SBS微孔板至均勻發(fā)光底座上進行6次拍照，軟件全自動判讀及匯總ABO血型、Rh（D）血型和不規(guī)則抗體篩查結果；最后在局域網(wǎng)上發(fā)送報告。同時，采用瑞士生產的全自動加樣儀（STAR）加樣進行試管離心方法ABO反定型檢測比對；對血型分析儀結果顯示為“？”的標本用試管法復查；對無法判斷血型結果和Rh（D）陰性的標本送本站血型參比室進行血清學或分子生物學檢測確認。

2 結 果

118 128份日常獻血者樣本中，ABO血型檢測結果為“？”的有149例，一次判讀不可定型率（一次判讀不可定型標本的數(shù)量與檢測標本的數(shù)量比）為0.12%，以血清中相應抗體較弱、含不規(guī)則抗體及冷抗體干擾較多見，需要用試管離心法復查進行判定或送本站血型參比室進行血清學或分子生物學檢測確認，Bx 5例，ABx 2例，Ael 1例，ABO以外不規(guī)則抗體28例，冷自身抗體13例，ABO弱抗體100例。ABO血型一次判讀結果正確率（一次判讀可定型正確的標本數(shù)量與一次判讀可定型標本的數(shù)量比）為99.99%，有1例自動化檢測系統(tǒng)將B3亞型伴抗-B抗體誤判為O型；全自動血型儀檢測出Rh（D）陰性251例，經(jīng)本站輸血研究所確認250例為Rh（D）陰性，1例為Du型，Rh（D）血型檢測自動判讀定型正確率99.99%，Rh（D）血型檢測一次判讀不可定型率0%。

3 討 論

本組118 128份獻血者標本采用STAR BG全自動血型分析儀進行ABO正反定型檢測，一次判讀不可定型率為0.12%，以獻血者血清中相應抗體較弱、含不規(guī)則抗體及冷抗體干擾較多見，血型分析儀結果顯示為“？”，需要用試管離心法復查進行判定或送本站血型參比室進行血清學或分子生物學檢測確認。本組研究中ABO血型一次判讀結果正確率為99.99%，高于國內報道［5］，也高于國外文獻報道的98.8%［6］和98.5%［7］，其中有1例自動化檢測系統(tǒng)將B3亞型伴抗-B抗體誤判為O型的血清學方法檢測結果，本例可能是由于紅細胞與抗B血清呈混合外觀凝集，而血清中又含有抗-B抗體，致使判讀失誤，查看血型圖像發(fā)現(xiàn)B細胞孔有弱凝集現(xiàn)象，說明血型自動化檢測系統(tǒng)，人工圖像確認是關鍵。有149例標本自動化檢測系統(tǒng)無法一次作出判定，占0.12%，以血清中相應抗體較弱、含不規(guī)則抗體及冷抗體干擾較多見［8］。因此，在實際工作中如果碰到ABO正反定型不符，應用經(jīng)典常規(guī)方法復查確認，以考慮是否有亞型、弱抗體、不規(guī)則抗體或假凝集等因素存在；Rh（D）血型檢測一次判讀不可定型率0%，Rh（D）血型檢測自動判讀定型正確率99.99%。

STAR BG全自動血型儀實現(xiàn)了血型檢測的自動化，操作簡便，降低了人為因素對實驗造成的影響，凝集圖像直觀，結果可靠，方便人工核對。其對反應所需微板無特殊要求，可一次性使用國產96孔U型板，避免重復洗板造成殘留血清纖維、灰塵或水珠影響結果判讀的現(xiàn)象，降低洗滌污染源對操作人員的危害等。而且采用微板法減少了抗-D、抗-A和抗-B的用量，具有顯著的經(jīng)濟效益和社會效益，適合血站對獻血者進行批量化血型檢測。

在使用中如果發(fā)現(xiàn)ABO正反定型不符時，應該用經(jīng)典的常規(guī)方法確認，以考慮是否有亞型、弱抗體和假凝集等因素存在。脂血、溶血，以及弱的血型抗體會影響該方法反定型結果的判讀，故在工作中要盡量避免脂血和溶血樣品的發(fā)生。

［1］ Kumar U S，Ghosh K，Gupt e SS，et al.Role of HLA antigens in Rh（D）alloimmunized pregnant women from Mumbai，Maharashtra，India［J］.J Biosci，2002，27（2）：135-141.

［2］ 高峰.輸血與輸血技術［M］.人民衛(wèi)生出版社，2003：90-91.

［3］ 王福成，施之雍，蔡雋，等.梯形微板技術在ABO血型檢測中的應用［J］.中國輸血雜志，2007，20（1）：53-55.

［4］ 徐路瓊.ABO血型鑒定結果的質量控制方法［J］.檢驗醫(yī)學與臨床，2009，6（19）：1667-1668.

［5］ 胡繼征，陸典瑞，李啟輝.全自動微板法檢測28 379例獻血者ABO血型的統(tǒng)計分析［J］.國際醫(yī)藥衛(wèi)生導報，2003 9（9）：75-76.

［6］ 張秋會，夏愛軍，穆士杰，等.應用全自動血型／配血系統(tǒng)對血型檢測結果的分析［J］.臨床輸血與檢驗，2011，13（3）：249-250.

［7］ 宋建，彭濤，李翠瑩，等.全自動血型及配血分析系統(tǒng)的應用［J］.中國輸血雜志，2011，24（1）：60-61.

［8］ 蔡紅軍，任紅紅，張冬民，等.全自動血型檢測系統(tǒng)在無償獻血者血液檢測中的應用［J］.臨床和實驗醫(yī)學雜志，2011，10（12）：926-927.