李云霞，鄭麗娜，闞淑娟，楊建春

(河北省唐山市婦幼保健院，河北 唐山 063000)

卡馬西平(CBZ)是臨床常用的傳統(tǒng)抗癲癇藥，孕婦服用后，胎兒可能出現(xiàn)神經(jīng)管缺陷、顱面部和指(趾)端畸形等[1]。國(guó)外有研究認(rèn)為，卡馬西平干擾葉酸代謝，可使機(jī)體葉酸水平下降或缺乏。新型抗癲癇藥奧卡西平是卡馬西平的酮類衍生物，不良反應(yīng)少，更易耐受，但孕婦使用后可能引起新生兒凝血障礙，加重葉酸缺乏[2]。筆者以小鼠為研究對(duì)象，觀察卡馬西平、奧卡西平對(duì)妊娠小鼠的影響及葉酸干預(yù)的作用，為上述理論提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試藥

SPF級(jí)昆明種小鼠，雌雄比例為2∶1，雌性體重(22±2)g，雄性體重(23±3)g，北京華阜康生物科技股份有限公司實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)為SCXK(京)2009－0004，每籠15只(雌性10只，雄性5只)，自然光照，自由飲水進(jìn)食，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。葉酸(北京北大藥業(yè)有限公司，每片0.4 mg，批號(hào)為S090528);卡馬西平(上海復(fù)旦復(fù)華藥業(yè)有限公司，每片100 mg，批號(hào)為080116);奧卡西平(諾華制藥有限公司，每片 150 mg，批號(hào)為 T0051－200805)。上述藥物均用蒸餾水配制所需質(zhì)量濃度。

1.2 方法

動(dòng)物分組及給藥:試驗(yàn)共設(shè)5組，每組30只，雌性20只，雄性10只?？瞻讓?duì)照組(Ⅰ組)，每天灌胃蒸餾水，容量為10 mL/kg體重;卡馬西平組(Ⅱ組)，每天66.7 mg/kg經(jīng)口灌胃;卡馬西平與葉酸聯(lián)合用藥組(Ⅲ組)，每天上午經(jīng)口灌胃卡馬西平，劑量同Ⅱ組，下午0.07 mg/kg葉酸經(jīng)口灌胃;奧卡西平組(Ⅳ組)，每天150 mg/kg奧卡西平經(jīng)口灌胃;奧卡西平與葉酸聯(lián)合用藥組(Ⅴ組)，每天上午經(jīng)口灌胃奧卡西平，劑量同Ⅳ組，下午0.07 mg/kg葉酸經(jīng)口灌胃。各組給藥劑量均相當(dāng)于成人(按60 kg)等效劑量的10倍。上述各組小鼠于分組后次日，雌性鼠開始灌胃各藥物，按上述方法給藥，直至妊娠結(jié)束。

母鼠及仔鼠觀察指標(biāo):每日清晨定時(shí)檢查雌鼠陰道栓，以陰道栓出現(xiàn)日為妊娠零天。檢出陰道栓的雌鼠單籠飼養(yǎng)，并密切觀察腹部增大情況、妊娠期增重，有否流產(chǎn)、死胎、畸形及活胎數(shù)等指標(biāo)。對(duì)未分娩者于妊娠第22天處死，檢查子宮內(nèi)胚胎數(shù)及其發(fā)育狀況。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

各組小鼠于分組次日給藥，各組陰道栓出現(xiàn)日距給藥時(shí)間的長(zhǎng)短無統(tǒng)計(jì)性差異，因此統(tǒng)計(jì)各組母鼠母體增重、流產(chǎn)率、死胎率、畸胎率、胎仔活胎率。結(jié)果以X±s表示，按單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用 χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)孕鼠體重的影響

孕鼠于妊娠第10，20天各稱體重1次，以觀察藥物對(duì)孕鼠體重的影響。結(jié)果見表1?？梢?，與Ⅰ組比較，Ⅱ組孕鼠10 d體重增加的速度明顯降低(P＜0.01);Ⅲ組小鼠體重增量高于Ⅱ組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。孕鼠20 d體重增量，Ⅱ組和Ⅳ組均低于Ⅰ組(P＜0.05)，其余各組間體重增量無明顯差異(P＞0.05)。這可能與孕鼠數(shù)量較少有關(guān)。

表1 藥物對(duì)孕鼠孕期體重的影響(X±s)

2.2 對(duì)小鼠生殖能力的影響

小鼠受孕率:結(jié)果見表2?？梢?，各給藥組受孕率均低于空白對(duì)照組(Ⅰ組)，其中Ⅳ組最低，Ⅴ組則高于Ⅳ組(P＜0.05)。

小鼠流產(chǎn)率:結(jié)果見表2?？梢?，除Ⅰ組小鼠外，其余各組孕鼠均有流產(chǎn)，妊娠小鼠流產(chǎn)率最高者為Ⅳ組，其余各組無明顯差異。

表2 藥物對(duì)小鼠生殖能力的影響

妊娠小鼠胎仔存活情況:對(duì)各組孕鼠活胎、死胎、吸收胎數(shù)目分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。結(jié)果見表2?？梢?，各給藥組平均每窩仔鼠數(shù)量均較Ⅰ組少(P＜0.01)，而各給藥組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。死胎和吸收胎數(shù)目以Ⅳ組較高且明顯高于Ⅴ組，說明葉酸能對(duì)抗其所致的胎死率及吸收胎率。

2.3 對(duì)小鼠致畸的影響

通過對(duì)各給藥組孕鼠所產(chǎn)仔鼠畸形情況的觀察發(fā)現(xiàn)，Ⅱ組有3只畸形鼠，表現(xiàn)為唇裂、脊柱裂、極小胎，其余各組未發(fā)現(xiàn)有畸形現(xiàn)象。可見，葉酸對(duì)卡馬西平致畸效應(yīng)有明顯的拮抗作用。

3 討論

卡馬西平可使小鼠孕晚期體重增量降低、致畸率增高，奧卡西平可使小鼠受孕率降低、小鼠死胎和吸收胎數(shù)目增加，兩藥均可使妊娠小鼠每窩仔鼠數(shù)量減少。葉酸對(duì)兩藥在小鼠生殖能力方面產(chǎn)生的影響有拮抗作用，并可減少卡馬西平的致畸作用。

傳統(tǒng)抗癲癇藥卡馬西平屬于葉酸拮抗劑，癲癇母親在妊娠期間服用此藥，將降低母體及胎兒體內(nèi)的葉酸水平，使胎兒發(fā)生神經(jīng)管、心血管、唇裂及尿道下裂等缺陷的概率上升[3]。新型抗癲癇藥奧卡西平為卡馬西平的衍生物，代謝過程中不產(chǎn)生環(huán)氧代謝物，致畸性較小[4]。奧卡西平活性代謝產(chǎn)物為10－羥基卡馬西平，也存在一定的用藥風(fēng)險(xiǎn)。葉酸是造血細(xì)胞發(fā)育和維持中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能所必需的輔酶[5]，參與體內(nèi)核酸和氨基酸的合成，并與維生素B12共同促進(jìn)紅細(xì)胞的增殖和成熟[1]。因此，對(duì)于準(zhǔn)備妊娠和正處于妊娠期的癲癇患者，應(yīng)根據(jù)癲癇發(fā)作類型、原因、患者對(duì)藥物的敏感性及耐受情況等，選擇控制發(fā)作最好、致畸危險(xiǎn)最小的抗癲癇藥，同時(shí)補(bǔ)充多種維生素和適量葉酸，將用藥風(fēng)險(xiǎn)和致畸的危險(xiǎn)性降到最低。

[1]曾 艷，褚燕琦，王育琴.抗癲癇藥致胎兒畸形的研究進(jìn)展[J].藥物不良反應(yīng)雜志，2007，9(5):305 －310.

[2]四川美康醫(yī)藥軟件研究開發(fā)有限公司.藥物臨床信息參考[M].重慶:重慶出版社，2008:1 129.

[3]Hemandez－ Diaz S，Werler MM，Walker AM，et al.Folicacid antagonists during pregnancy and the risk of birth defect[J].N Engl J Med，2000，343(22):1 608－1 614.

[4]蔣 艷，丁美萍.抗癲癇藥的孕期選擇與管理[J].現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué)，2005，10(10):597 － 599.

[5]周 勤，漆洪波.妊娠合并癲癇[J].中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2009，8(8):574 －577.