HPLC法測定蒙成藥陶都格其－7中梔子苷的含量

海長江

內(nèi)蒙古自治區(qū)通遼市醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000

HPLC法測定蒙成藥陶都格其－7中梔子苷的含量

海長江

內(nèi)蒙古自治區(qū)通遼市醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000

目的：建立高效液相色譜法測定蒙成藥陶都格其－7中梔子苷含量的方法。方法：采用高效液相色譜法。色譜柱為十八烷基鍵和硅膠；流動相為乙腈－水（15：85）；流速：1.0mL／min；檢測波長：238nm；柱溫為室溫；進樣量：10μL。結(jié)果：梔子苷的進樣量在4.2～16μg（r＝0.9999）范圍內(nèi)與各自峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系，平均回收率為100.29%，RSD為0.14%（n＝6）。結(jié)論；該方法簡單、快速、準確，可用于蒙成藥陶都格其－7中梔子苷的含量測定。

陶都格其－7；HPLC；梔子苷；含量測定

蒙成藥陶都格其－7出自《醫(yī)法海鑒》，性涼，由訶子、梔子、川楝子、通經(jīng)草、鐵屑（制）、小茴香、甘草等七味組成，具有清熱明目的功能，主治眼瞼糜爛、昏朦癥、視力減退等眼病［1］。本方劑型原為攪合劑，但通遼市蒙醫(yī)研究所、內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院等醫(yī)療機構(gòu)制劑室均制出水丸。采用高效液相色譜法對陶都格其－7中的梔子苷含量進行測定，方法簡單、快速、準確，可用于蒙成藥陶都格其－7的質(zhì)量控制。

1 儀器與試藥

LC－10ATvp型高效液相色譜儀（日本島津）；AUW120型電子天平（日本島津）；BS－600型電子天平（上海友生）；AS系列超聲波清洗機（天津奧特塞恩斯）。

梔子苷對照品（中國藥品生物制品鑒定所，批號：110749－200714）；陶都格其－7（通遼市蒙醫(yī)研究所制劑室，批號：20120101、20130532）；乙腈為色譜純，其它試劑均為分析純，水為超純水。

2 方法［2］與結(jié)果

2.1 色譜條件 填充劑為十八烷基鍵和硅膠，流動相為乙腈－水（15：85），檢測波長為238nm，流速為1.0mL／min，柱溫為室溫，供試品與對照品進樣量為10μL。

2.2 對照品的溶液制備 取梔子苷對照品4.2mg，精密稱定，置100mL量瓶中，加甲醇使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.3 供試液的制備 取套都格其－7研細，約取1g，精密稱定，置50mL的三角瓶中，精密加入甲醇25mL，稱定重量，超聲處理20min鐘，放冷，再稱定重量，加甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密吸取續(xù)濾液10mL，置25mL量瓶中加甲醇稀釋至刻度，搖勻。

2.4 陰性對照液的制備 取缺梔子陰性對照品約取1g精密稱定，置50mL的三角瓶中，照供試品溶液的制備方法制備，即得。

2.5 專屬性考察 分別吸取梔子苷對照品溶液、供試品、陰性樣品溶液各10μL進樣，按上述色譜條件進行檢測。結(jié)果供試品溶液中梔子苷與雜峰完全分離，陰性樣品溶液無干擾。譜圖見圖1、2、3。

2.6 線性關(guān)系考察 分別精密吸取梔子苷對照品溶液1、2、3、4mL置10mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密吸取上述溶液10μL，注入液相色譜儀，測定其峰面積。并以峰面積（Y）對梔子苷的進樣量（X）進行線性回歸，得回歸方程：Y＝5.38157e－005*X－0.164976，r＝0.9999。結(jié)果表明，梔子苷對照品進樣量在4.2～16μg范圍內(nèi)，與峰面積具有良好的線性關(guān)系。

2.7 精密度實驗 精密吸取對照品溶液10μL，在相同色譜條件下分別重復(fù)進樣6次，分別測定峰面積的積分值，梔子苷的RSD為0.57%（n＝6），結(jié)果表明儀器精密度良好。

2.8 穩(wěn)定性實驗 精密吸取同一供試品10μL，每隔2h注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測定其峰面積積分值，結(jié)果RSD為0.75%（n＝6），表明供試品溶液在12小時內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.9 重現(xiàn)性實驗 密吸取同一份供試品溶液各10μL，在上述色譜條件下分別重復(fù)進樣6次，記錄色譜圖，測定其峰面積積分值，結(jié)果梔子苷的平均含量2.15μg／mL，RSD 為1.39%（n＝6），分析方法重復(fù)性良好。

2.10 加樣回收率 取已知含量的供試品1.00g，分別精密加入一定量的對照品，按2.2.2項下的方法制備供試品溶液，按上述色譜條件測定，計算加樣回收率。結(jié)果見表1，梔子苷的平均回收率為100.29%，RSD為0.14%（n＝6）。

表1 加樣回收試驗測定結(jié)果

2.11 樣品含量測定 吸取供試品溶液10μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測定峰面積。結(jié)果見表2。

3 結(jié)論

通過蒙成藥陶都格其－7中梔子苷含量的連續(xù)測定、陰性溶液的干擾試驗、樣品穩(wěn)定性、儀器精密度及其加樣回收率的試驗，表明該方法簡單、快速、準確，可用于蒙成藥陶都格其－7中梔子苷的含量分析。

［1］蒙醫(yī)學(xué)編輯委員會.中國醫(yī)學(xué)百科全書·蒙醫(yī)學(xué)［M］.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1992：264.

［2］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（第一部）［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄36.

R284.2

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1007－8517（2013）16－0028－02

2013.06.22）