王詩會

（河南省南陽市第二人民醫(yī)院，河南 南陽 473000）

黃芩有效化學成分及抑菌作用的分析

王詩會

（河南省南陽市第二人民醫(yī)院，河南 南陽 473000）

目的 探討黃芩的有效化學成分及抑菌作用。方法 分別使用超聲法和水煮法提取黃芩的有效成分，然后比較兩種方法所提取的黃芩成效成分，提取液和黃芩結晶物在體外的抑菌效果。結果 使用超聲法提取得到的黃芩有效成分的體外抑菌效果明顯優(yōu)于使用水煮法提取得到的黃芩有效成分（P＜ 0.05）；使用超聲法提取得到的黃芩結晶物的體外抑菌效果明顯優(yōu)于水煮法提取得到的的黃芩有效成分（P＜ 0.05）。結論 黃芩在臨床上具有很好的抑菌作用，使用超聲法可以有效的提取出黃芩的有效成分，值得臨床推廣。

腸球菌屬細菌；耐藥性；藥敏試驗

1 資料與方法

1.1 藥品、試劑和菌種

實驗所用黃芩均采購由浙江省藥材公司；MH肉湯以及瓊脂采購于上海微生物試劑有限公司；實驗研究所用的的其他試劑均為分析純標準；實驗所用的金黃色葡萄球菌為采購于中國食品藥品檢驗所的腸炎沙門氏菌ATCC13076。

1.2 檢測儀器

黃芩有效成分的提取主要使用的儀器包括：使用由上海亞榮生化儀器廠制造的RE-52AA旋轉蒸發(fā)器； SW-CJ-2F超凈工作臺和DHP9162電熱恒溫培養(yǎng)箱由上海齊欣科學儀器有限公司制造；超聲波發(fā)生器由蘇州安泰空氣技術有取公司制造，超聲發(fā)生頻率為20kHz、800kHz以及1100kHz。

1.3 提取方法

1.3.1 水煮法

首先制備水煎提取液：使用天平精確稱取50g黃芩飲片，他別加入500g以及400g水煎煮2次，每次煮1h，然后進行過濾，將兩次濾液合并，然后濃縮濾液至50mL，此時的黃芩水煎液濃度為1000mg/mL，經過無菌處理后備用。然后制備結晶物：使用天平精確稱取50g黃芩飲片，他別加入500g以及400g水煎煮2次，每次煮1h，然后進行過濾，將兩次濾液合并，然后在濾液中加入濃鹽酸并將濾液的pH值調節(jié)至1～2，并于80℃環(huán)境放置30min，靜置12h后將上清液棄除，然后加適量水將沉淀物溶解，攪勻后向溶液內加入40%的NaOH溶液，將黃芩素溶解，并將溶液的值調節(jié)至6～7，之后加入等量的95%濃度的乙醇，加熱至50℃后過濾，使用10%鹽酸調節(jié)濾液的pH值至2～3，并靜置于50℃水浴中30min，使黃芩結晶物能夠完全析出，過濾得到結晶物，并用清水將結晶物沖洗至中性，60℃干燥至恒重，得到實驗用的黃芩結晶物，最后配制為10mg/mL的溶液，經過無菌處理后備用。

1.3.2 超聲提取法

首先取適量（＞50g）的黃芩飲片，于60℃進行烘干，然后進行粉碎并使用10目篩進行過濾，使用天平精確稱取50g黃芩粗粉，向粗粉中加入10倍量的水，并使用超聲進行處理，頻率選擇20kHz，并注意隨時補充水，讓溶液的液面保持同一高度，超聲處理1h后進行過濾，使用鹽酸將濾液的pH值調節(jié)至1～2，80℃水浴靜置30min，將黃色的結晶物充分析出后進行過濾。向沉淀物中加入蒸餾水并攪勻，然后向溶液中加入40%的NaOH溶液，將黃芩素溶解，并將溶液的值調節(jié)至6～7，之后加入等量的95%濃度的乙醇，加熱至50℃后過濾，使用10%鹽酸調節(jié)濾液的pH值至2～3，并靜置于50℃水浴中30min，使黃芩結晶物能夠完全析出，過濾得到結晶物，并用清水將結晶物沖洗至中性，60℃干燥至恒重，得到實驗用的黃芩結晶物，最后配制為10mg/mL的溶液，經過無菌處理后備用。

本研究用均方差(root mean square error,RMSE)、殘差累積系數(residual accumulation coefficient,CRM)和平均誤差(average mean error,AME),評估模擬值與觀測值的吻合程度。三者的值越趨近于0,表明模型的模擬精度越高。同時用觀測值與模擬值之間的1∶1線來評估模型的可靠性。

1.4 抑菌作用比較方法

將實驗用腸炎沙門氏菌接種于MH肉湯中，體積約為3mL，在37℃環(huán)境下培養(yǎng)18h，并將菌液稀釋到濁度105CFU/mL，然后使用二倍稀釋法進行提取物的體外抑菌實驗，每個濃度的實驗均重復3次。

1.5 統(tǒng)計學方法

采用SPSS17.0軟件進行數據的統(tǒng)計與分析，全部數據資料用采用t檢驗，χ2檢驗，P＜0.05為差異有顯著性，具有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 提取液的抑菌濃度

使用超聲法提取得到的黃芩有效成分的體外抑菌效果明顯優(yōu)于使用水煮法提取得到的黃芩有效成分（P＜0.05），見表1。

表1 兩種提取方法黃芩提取液的最低抑菌濃度MIC比較

2.2 結晶物的抑菌濃度

使用超聲法提取得到的黃芩結晶物的體外抑菌效果明顯優(yōu)于水煮法提取得到的的黃芩有效成分（P＜0.05），見表2。

表2 兩種提取方法黃芩提取結晶物的最低抑菌濃度MIC比較

3 討 論

黃芩是臨床上常用的中藥，其中最為主要的有效成分為黃芩苷，具有良好的清熱解毒，消炎利膽，保肝抗變態(tài)反應的作用，并且具有非常廣泛的抗菌譜，對金葡菌、綠膿桿菌以及沙門氏菌均具有十分良好的抑制作用。在臨床上，黃芩主要是用于治療熱病煩燥、肺熱咳嗽、濕熱瀉痢以及煩渴等疾病。近年來，有研究發(fā)現，黃芩還具有良好的抗病毒作用[2]。

傳統(tǒng)的黃芩苷提取方法為水煮法，但水煮法的提取時間比較長，而且提取率比較低。因此，為了提高黃芩苷的提取率，筆者采用最新的超聲提取法和傳統(tǒng)的水煮法進行對比分析[3]。研究結果顯示，超聲法提取黃芩的抑菌效果明顯優(yōu)于水煮法提取的黃芩，超聲法提取黃芩結晶物的抑菌效果明顯優(yōu)于水煮法提取的黃芩。

綜上所述，黃芩在臨床上具有很好的抑菌作用，使用超聲法可以有效的提取出黃芩的有效成分，值得臨床推廣。

[1]魏述永.黃芩有效成分提取物對沙門氏菌的抑菌活性比較研究[J].中國醫(yī)藥雜志,2008,6(5):40-41.

[2]黎丹戎.漢黃芩素對人卵巢癌細胞株SKOV3裸鼠移植瘤生長及端粒酶活性的抑制作用[J].中國藥理學通報,2007,23(4):534-538.

[3]郭京華.淺析黃芩有效化學成分及抑菌作用[J].中國實用醫(yī)藥, 2012,7(16):195-196.

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