段 超,王小軍 ,左 琳 ,楊 杰 ,劉靖宇 ,孟俊龍 ,常明昌
(1.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院,山西太谷030801;2.山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所,山西太原030031;3.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)食品與工程學(xué)院,山西太谷030801)
杏鮑菇菌肉肥厚,味道鮮美,是集食、藥用于一體的珍稀食用菌[1-3]。目前,用于杏鮑菇生產(chǎn)的栽培種主要有棉籽殼木屑菌種、液體菌種、枝條菌種等[4-5]。傳統(tǒng)的棉籽殼木屑菌種制種工藝操作繁瑣、發(fā)菌慢[6],液體菌種雖然發(fā)菌速度比傳統(tǒng)的棉籽殼木屑菌種快,但由于其設(shè)施投入大、菌種易老化自溶、污染率高,也存在一定的局限性[7-9]。而枝條菌種比棉籽殼木屑菌種發(fā)菌速度快,且接種方便,發(fā)菌后菌袋菌齡上下一致[10-12]。
本試驗(yàn)對(duì)杏鮑菇枝條菌種制作工藝進(jìn)行了研究,以期為杏鮑菇枝條菌種的廣泛應(yīng)用提供一定科學(xué)依據(jù)。
供試菌株為杏鮑菇2號(hào),由山西農(nóng)業(yè)大學(xué)食用菌中心提供。
1.2.1 母種培養(yǎng)基配方 馬鈴薯200 g,葡萄糖20 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,蛋白胨 5 g,KH2PO43 g,瓊脂 20 g,水 1 000 mL[13]。
1.2.2 原種、栽培種(枝條種)培養(yǎng)基配方 木屑43%,麩皮10%,棉籽殼45%,碳酸氫鈣1%,生石灰1%,含水量65%。
1.3.1 浸泡時(shí)間對(duì)枝條菌種生長(zhǎng)的影響 在10 L水中溶解30 g生石灰后,浸泡0.6 cm×0.6 cm×16 cm的楊樹枝條200支,通蒸氣至浸泡液沸騰并保持 1 h,分別浸泡 8,10,12,14,16,18,20,22,24 h(含通氣沸騰 1 h)后撈出濾干,測(cè)定各處理的枝條含水量;加裹玉米粉后裝袋,采用18 cm×35 cm×0.05 cm的雙層聚丙烯袋,每袋裝枝條30支,之后裝輔料填充,單袋質(zhì)量1.2 kg,填料高度為18 cm。菌袋中間用打孔棒打孔,插入接種棒(接種時(shí)拔出接種棒,方便菌種接入菌袋底部),滅菌(121℃,1.5 h),每處理12袋。按常規(guī)方法接種,25℃恒溫暗培養(yǎng),記錄滿袋天數(shù)。
1.3.2 生石灰質(zhì)量濃度對(duì)枝條菌種生長(zhǎng)的影響
在10 L水中分別添加質(zhì)量濃度為0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5,4.0,4.5 g/L 的生石灰,浸泡0.6 cm×0.6 cm×16 cm的楊樹枝條200支20 h,測(cè)定各處理滅菌前和滅菌后的pH值。其他步驟同1.3.1,記錄滿袋天數(shù)。
1.3.3 枝條菌種培養(yǎng)基的篩選 以不同比例的木屑和棉籽殼為主料,麩皮、碳酸氫鈣和生石灰為輔料,浸泡20h,添加生石灰質(zhì)量濃度為3.5g/L,配方如表1所示。每個(gè)處理12袋,觀察菌絲色澤、長(zhǎng)勢(shì),記錄滿袋天數(shù)。其他步驟同1.3.1。
表1 枝條菌種培養(yǎng)基配方 %
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用計(jì)算機(jī)統(tǒng)計(jì)軟件SAS 8.0進(jìn)行分析;各處理平均數(shù)間的多重比較采用鄧肯氏新復(fù)極差測(cè)驗(yàn),差異顯著性水平定為α=0.05,極顯著定為α=0.01。
試驗(yàn)結(jié)果(表2)顯示,浸泡時(shí)間對(duì)枝條含水量有顯著影響,隨著浸泡時(shí)間的增長(zhǎng)含水量相應(yīng)增加。浸泡20,22,24 h的含水量較高,分別達(dá)到54.21%,54.22%,54.22%。經(jīng)顯著性差異分析可知,處理7,8,9的含水量顯著高于處理1~6。不同浸泡時(shí)間處理的枝條菌種導(dǎo)致菌袋滿袋的時(shí)間存在差異,最長(zhǎng)為32 d(處理1),最短為24 d(處理 7,8,9),相差 8 d。因此,最適浸泡時(shí)間為20 h。
表2 浸泡時(shí)間對(duì)枝條含水量和滿袋天數(shù)的影響
試驗(yàn)結(jié)果(表3)顯示,枝條浸泡時(shí)添加不同質(zhì)量濃度的生石灰對(duì)枝條滅菌前pH值有顯著影響,處理8,9,10的pH值較高,分別為9.08,9.10,9.12,pH 值最低為處理 1(6.75);經(jīng)顯著性差異分析可知,處理8,9,10的pH值顯著高于處理1~7。滅菌后處理間的pH值差異有所降低,最大為處理 10(6.82),最小為處理 1(5.62),相差為1.20;經(jīng)顯著性差異分析可知,處理7~10的pH值顯著高于處理1~6。處理7~10的菌袋滿袋天數(shù)最短,為24 d,因此,生石灰最適添加質(zhì)量濃度為3.0 g/L。
表3 生石灰質(zhì)量濃度對(duì)枝條pH值和滿袋天數(shù)的影響
以木屑和棉籽殼為主料,依次減少棉籽殼的比例,增加木屑的比例,麩皮的比例不變。試驗(yàn)結(jié)果(表4)顯示,隨著棉籽殼比例的減少,滿袋天數(shù)呈現(xiàn)先縮短后增加的趨勢(shì);配方3棉籽殼含量達(dá)到40%,滿袋天數(shù)最短為24 d,比配方6縮短6 d;配方3菌絲長(zhǎng)勢(shì)較好,色澤潔白,配方5,6菌絲長(zhǎng)勢(shì)逐漸減弱,色澤變得較潔白。因此,配方3為最適杏鮑菇枝條菌種培養(yǎng)基配方。
表4 不同培養(yǎng)基配方對(duì)杏鮑菇枝條菌種生長(zhǎng)影響比較
在杏鮑菇枝條菌種制作過(guò)程中,枝條浸泡時(shí)間是影響枝條菌種制作的關(guān)鍵因素,對(duì)枝條含水量有顯著影響。浸泡時(shí)間較短,則枝條含水量低,會(huì)延長(zhǎng)菌種滿袋時(shí)間,影響菌種房的周轉(zhuǎn)速率,增加生產(chǎn)成本。
枝條浸泡中添加不同質(zhì)量濃度的生石灰對(duì)枝條滅菌前后的pH值均有影響,尤其對(duì)滅菌前pH值影響差異顯著。滅菌后處理間的pH值差異有所降低,原因可能是由于培養(yǎng)料具有一定的緩沖作用,同時(shí)生石灰與水和空氣中的CO2反應(yīng)生成CaCO3沉淀,導(dǎo)致pH值下降。
杏鮑菇在有豐富碳、氮源的條件下,菌絲生長(zhǎng)旺盛,產(chǎn)量較高[14]。杏鮑菇生產(chǎn)中所需的碳源主要來(lái)源于各種植物性原料,如棉籽殼、木屑、玉米芯等[15]。由于近幾年棉籽殼價(jià)格持續(xù)走高,以適當(dāng)?shù)哪拘继娲拮褮つ芙档鸵欢ǖ纳a(chǎn)成本。木屑透氣性較好,有利于菌絲的生長(zhǎng),能縮短發(fā)菌時(shí)間。但木屑不能完全替代棉籽殼,因?yàn)槟拘己勘让拮褮さ蚚16],隨著木屑增加到一定程度,碳氮比過(guò)大會(huì)影響菌絲蛋白合成,導(dǎo)致代謝異常,菌絲的分解作用減慢,發(fā)菌時(shí)間延長(zhǎng)。
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