胡冬華,賀 帥,和東亮,陳雪梅,鐘 婷

(長春中醫(yī)藥大學(xué),長春130117)

本文就大黃素提取純化及金絲桃素的合成研究進(jìn)行了研究,現(xiàn)將試驗結(jié)果,報道如下。

1 大黃素提取分離

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗儀器 JT502N型電子天平,上海精天電子儀器有限公司;DHG-9240A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱,上海精宏實驗設(shè)備有限公司;TU-1810紫外可見分光光度計,北京譜析通用儀器有限責(zé)任公司;KQ-250型超聲波清洗器,昆山市超聲儀器有限公司;VECTOR53型傅里葉紅外變換光譜儀,769YP-15A粉末壓片機(jī)。

1.1.2 試驗試劑 乙醇(95%)、乙醚、鹽酸、碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、乙酸乙酯均購自北京化工廠,冰醋酸購自西隴化工廠。

1.2 試驗方法

1.2.1 大黃素的提取 文獻(xiàn)記載中藥材虎杖中含有豐富的大黃素成分[1-3]。將中藥材虎杖粉碎至粗粉取100 g,用適量95%的乙醇溶液潤浸0.5h,加入600 mL 95%乙醇加熱回流1.5 h,傾出液體,同法操作2次,合并提取液,過濾,濾液旋蒸回收乙醇至無醇味,得到富含大黃素的深紅色液體。

1.2.2 大黃素的純化 向深紅色液體中加入200 mL乙醚萃取1次,100 mL乙醚萃取3次,合并乙醚液即得總游離蒽醌溶液。分別用5%NaHCO3,3%NaHCO3水溶液各80 mL洗滌乙醚液,同法操作3次,保留乙醚液。然后用5%Na2CO3水溶液80 mL萃取乙醚液,分出Na2CO3液,同法萃取3次,合并Na2CO3萃取液。最后用濃鹽酸調(diào)節(jié)Na2CO3萃取液的pH值為1～2析出大黃素粗品沉淀,經(jīng)多次考察,pH值為1時效果最好。抽濾,用水洗滌沉淀至中性。用冰醋酸進(jìn)行重結(jié)晶,在烘箱中烘至恒重,即得大黃素結(jié)晶。

2 金絲桃素的合成

2.1 試驗材料

2.1.1 試驗儀器 85-2數(shù)顯恒溫磁力攪拌器,金壇市大地自動化儀器廠;VECTOR53型傅里葉變換光譜儀;200w日光燈。

2.1.2 試驗試劑 大黃素,自制純化;氫醌,北京化工廠;氫氧化鉀,天泰化工廠。

2.2 試驗方法 1)金絲桃素的合成 準(zhǔn)確稱取大黃素135 mg,氫醌110 mg,氫氧化鉀 84 mg,蒸餾水15 mL,將上述反應(yīng)物逐次加入到50 mL的錐形瓶中,放入小型攪拌機(jī),加膠塞打孔,在錐形瓶中通入N2后封管,置于電加熱磁力攪拌器上,控溫90°,200 w日光燈光照反應(yīng)4 h,引發(fā)反應(yīng)后,迅速將溶液轉(zhuǎn)入反應(yīng)釜內(nèi),150℃連續(xù)加熱36 h。隨著反應(yīng)的進(jìn)行,混合物的顏色逐漸由紅轉(zhuǎn)黑,直至最終反應(yīng)物成為黑色黏稠狀物質(zhì)。反應(yīng)結(jié)束后取出黏稠狀黑色物質(zhì),加入6 mol/L HCl調(diào)至pH=3,濾出沉淀,水洗至中性,晾干后得到黑色金絲桃素固體。2)紅外光譜法檢測金絲桃素對金絲桃素的合成品進(jìn)行了紅外圖譜分析,VECTOR53型傅立葉變換紅外光譜儀 ,OPUS操作軟件,掃描光譜范圍4000-400 cm-1,掃描次數(shù)：32次。

2.3 結(jié)果與討論 對金絲桃素的合成產(chǎn)物進(jìn)行紅外圖譜分析,各基團(tuán)的吸收區(qū)域表明該化合物與金絲桃素結(jié)構(gòu)特征相符[4-7]。

表1 金絲桃素的紅光光譜解析

3 結(jié)論

金絲桃素(hypedein)具有抗抑郁、抗腫瘤、抗病毒、抗菌消炎等藥理活性,是當(dāng)前國際研究繼人參、銀杏葉、紅豆杉之后的熱點(diǎn)之一,具有重大的新藥開發(fā)價值[8]。但是金絲桃素在貫葉連翹等植物中的含量只有萬分之幾,提取分離后只能得到極少量的金絲桃素,還會破壞天然植被。本實驗研究表明,大黃素與金絲桃素具有相關(guān)的結(jié)構(gòu),大黃素能夠用于價格昂貴的金絲桃素的合成。合成產(chǎn)品金絲桃素經(jīng)紅外、紫外分光光度法等現(xiàn)代分析手段定性定量分析表征。本工作改進(jìn)了金絲桃素的合成條件,縮短了合成時間,降低了合成成本,對于中藥有效成分金絲桃素的合成具有重要的理論意義和實際應(yīng)用價值。

[1]湯媛,劉明星,蘇江濤,等.金絲桃素的合成工藝改進(jìn)[J].合成化學(xué),2009,17(4)：498-502.

[2]何麗一,羅淑榮.中國大黃屬植物成分的分離及含量測定[J].藥學(xué)學(xué)報,1980,15(9)：555-558.

[3]郭金鳳,崔一民,趙俠,等.薄層層析法鑒別虎杖中的成分[J].中國藥事,1997,11(1)：52-53.

[4]Miskovsky P.Hypericin——a new antiviral and antitumor photosensitizer：mechanism of action and interaction with biological macromolecules[J].Curr Drug Targets,2002,3(1)：55-84.

[5]王力,張娜,張秀清,等.金絲桃素合成酶基因的克隆及其表達(dá)[J].華北農(nóng)學(xué)報,2005,20(4)：1-3.

[6]Kin S W,Park J H,Yang S D,et al.Facile synthesis and Radio Iodine labeling of hypericin[J].Bull KoreasChem Soc,2004,25(8)：1147-1150.

[7]Mazur Y B,Lavie H,David.Preparation of hypericin USA[J].Pat.Application,1990,7：604-613.

[8]張健,李俊,李芳,等.貫葉連翹中金絲桃素的測定[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué),2000,17(4)：279-281.