吉鴻武 鄭 川 李海山 謝 磊 張寧寧 梅 凡

（北京市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，北京市 100044）

瘦肉精快速檢測(cè)卡的質(zhì)量驗(yàn)證與評(píng)價(jià)

吉鴻武 鄭 川 李海山 謝 磊 張寧寧 梅 凡

（北京市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，北京市 100044）

為篩選出品質(zhì)優(yōu)良的 “瘦肉精”快速檢測(cè)卡，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，本文通過(guò)測(cè)定 “檢測(cè)閾值、假陰性率、假陽(yáng)性率”3個(gè)驗(yàn)證參數(shù)，對(duì)6個(gè)廠家的18批次產(chǎn)品的質(zhì)量進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果表明，共15批次的產(chǎn)品符合國(guó)家相關(guān)部門(mén)要求；建議監(jiān)管單位在采購(gòu) “瘦肉精”檢測(cè)卡時(shí)，一定要進(jìn)行產(chǎn)品質(zhì)量驗(yàn)證試驗(yàn)；在條件受限時(shí)可優(yōu)先對(duì) “檢測(cè)閾值”和 “假陰性率”進(jìn)行驗(yàn)證。

瘦肉精；快速檢測(cè)卡；質(zhì)量驗(yàn)證；參數(shù)

因此，在 “瘦肉精”檢測(cè)卡購(gòu)置前進(jìn)行質(zhì)量驗(yàn)證是確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確有效的重要手段。為篩選出品質(zhì)優(yōu)良的產(chǎn)品，提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，保障畜產(chǎn)品安全，本試驗(yàn)聯(lián)系工作實(shí)際，對(duì)6個(gè)廠家18批次產(chǎn)品的質(zhì)量進(jìn)行驗(yàn)證，分析驗(yàn)證結(jié)果并提出建議，供同行參考。

1 材料

空白豬尿樣品：從北京市某屠宰場(chǎng)采集豬尿液30份，用液-質(zhì)聯(lián)方法未檢測(cè)出鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇。

鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇的標(biāo)準(zhǔn)品。

鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液 （1 mg/mL）：稱(chēng)取鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇標(biāo)準(zhǔn)品約10.0 mg，分別置于l0 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度。貯存于-18℃冰箱中，有效期為1年。

鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇標(biāo)準(zhǔn)中間工作液 （10 g/mL）。用微量移液器移取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液100 L，置于10 mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度。貯存于-18℃冰箱中，有效期為1個(gè)月。

微量移液器：?jiǎn)蔚?～1000 L。

“瘦肉精”檢測(cè)卡。樣品的檢測(cè)限為：鹽酸克倫特羅2或3mg/L、萊克多巴胺3或5mg/L、沙丁胺醇5mg/L。

陰性豬尿樣品：取空白豬尿樣品1份5 mL，置于50 mL塑料瓶中。再分別移取適量鹽酸克倫特羅的標(biāo)準(zhǔn)中間工作液加入空白豬尿中，配制濃度為0和鹽酸克倫特羅檢測(cè)卡檢測(cè)限的1/2，混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。用同樣的方法分別制備萊克多巴胺、沙丁胺醇的陰性豬尿樣品。

隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，社會(huì)的進(jìn)步，涌現(xiàn)出越來(lái)越多的新型能源，而且為了滿(mǎn)足綠色環(huán)保發(fā)展需求，社會(huì)對(duì)于煤炭需求量逐年降低，煤炭?jī)r(jià)格也長(zhǎng)期處于低位徘徊，使得煤炭供給能力一直處于過(guò)剩狀態(tài)，最終導(dǎo)致供應(yīng)關(guān)系出現(xiàn)失衡。此外，隨著行業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展，供給側(cè)問(wèn)題也逐漸浮出水面，煤炭企業(yè)經(jīng)濟(jì)效益每況愈下。所以，為了使煤炭行業(yè)實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略，需要實(shí)施供給側(cè)結(jié)構(gòu)性改革，為煤炭行業(yè)注入新活力，幫助煤炭企業(yè)提高經(jīng)濟(jì)收益。

陽(yáng)性添加樣品：取空白豬尿樣品1份5mL，置于50 mL塑料瓶中。再移取適量鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)中間工作液加入空白豬尿中，配制濃度為鹽酸克倫特羅檢測(cè)卡檢測(cè)限的1和2倍，混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。用同樣的方法制備萊克多巴胺、沙丁胺醇陽(yáng)性豬尿樣品。

2 方法

2.1 驗(yàn)證參數(shù)及判定標(biāo)準(zhǔn)

檢測(cè)閾值：即試劑條能檢測(cè)出來(lái)的最低濃度值。當(dāng)檢測(cè)閾值等于檢測(cè)卡的檢測(cè)限時(shí)，該檢測(cè)卡為合格；當(dāng)其小于或大于檢測(cè)限時(shí)，會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性率或假陰性率的產(chǎn)生。

假陰性率和假陽(yáng)性率：國(guó)內(nèi)外對(duì)于快速檢測(cè)技術(shù)的基本原則是 “絕不能有假陰性，但允許有一定的假陽(yáng)性”。按照農(nóng)業(yè)部獸藥殘專(zhuān)家委員會(huì)評(píng)審快速檢測(cè)卡備案的有關(guān)要求，快速檢測(cè)卡的假陽(yáng)性率應(yīng)小于10%。

2.2 檢測(cè)卡的使用步驟及結(jié)果判讀

按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)對(duì)樣品進(jìn)行前處理，用滴管滴加 2～3滴（約 70 L）檢測(cè)液樣品到劑卡孔內(nèi)。加后計(jì)時(shí)，反應(yīng)2～5分鐘后判讀結(jié)果，檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定，保存30分鐘后結(jié)果不會(huì)發(fā)生變化。結(jié)果判定：C線顯色，T線不顯色，判為陽(yáng)性；C線顯色，T線顯色，判為陰性。

表1 各公司 “瘦肉精”檢測(cè)卡質(zhì)量驗(yàn)證結(jié)果

2.3 檢測(cè)限測(cè)定

用鹽酸克倫特羅檢測(cè)卡分別對(duì)陰性豬尿樣品、陽(yáng)性豬尿樣品進(jìn)行檢測(cè)，每個(gè)樣品兩個(gè)重復(fù)，記錄下來(lái)呈現(xiàn)陽(yáng)性的最低濃度值。如果高濃度陽(yáng)性豬尿樣品也不呈現(xiàn)陽(yáng)性，則配制濃度更高的陽(yáng)性豬尿樣品進(jìn)行檢測(cè)，直至出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果為止。

2.4 假陽(yáng)性率的測(cè)定

取空白的豬尿樣品30份，每份量為10mL，按照陰性豬尿樣品的制備方法，制備60份陰性豬尿樣品。用檢測(cè)卡檢測(cè)，每個(gè)樣品做兩個(gè)重復(fù)，統(tǒng)計(jì)假陽(yáng)性數(shù)，按照下面的公式計(jì)算假陽(yáng)性率。

假陽(yáng)性率=假陽(yáng)性數(shù)/樣品總數(shù)×100%

2.5 假陰性率的測(cè)定。取空白的豬尿樣品30份，每份量為10 mL，按照陽(yáng)性豬尿樣品的制備方法，制備60份陽(yáng)性豬尿樣品，用檢測(cè)卡進(jìn)行檢測(cè)，每個(gè)樣品做兩個(gè)重復(fù)，統(tǒng)計(jì)假陰性數(shù)，按照下面的公式計(jì)算假陰性率。

假陰性率=假陰性數(shù)/樣品總數(shù)×100%

3 結(jié)果與分析

本研究使用6個(gè)廠家18批次的“瘦肉精”檢測(cè)卡對(duì)120份樣品進(jìn)行了檢測(cè)限、假陽(yáng)性率、假陰性率的驗(yàn)證，結(jié)果見(jiàn)表1。

3.1 質(zhì)量驗(yàn)證的必要性

從驗(yàn)證結(jié)果來(lái)看，每個(gè)公司的檢測(cè)卡產(chǎn)品均存在檢測(cè)閾值偏高、假陽(yáng)性或假陰性的問(wèn)題，產(chǎn)品質(zhì)量良莠不齊，個(gè)別公司的產(chǎn)品質(zhì)量不符合國(guó)家要求。所以，畜產(chǎn)品加工企業(yè)或者監(jiān)管部門(mén)在采購(gòu) “瘦肉精”檢測(cè)卡時(shí)，一定要進(jìn)行產(chǎn)品質(zhì)量驗(yàn)證試驗(yàn)，以避免結(jié)果誤判和資金浪費(fèi)。

3.2 檢測(cè)閾值的測(cè)定

從表1可以看出，大部分產(chǎn)品的檢測(cè)閾值與檢測(cè)限一致；但1號(hào)與6號(hào)產(chǎn)品的檢測(cè)閾值超出檢測(cè)限2倍左右，產(chǎn)品判定為不合格。因此，我們?cè)谶x擇產(chǎn)品時(shí)，應(yīng)當(dāng)首先剔除這2個(gè)不合格產(chǎn)品。當(dāng)檢測(cè)閾值高于或低于檢測(cè)限時(shí)，會(huì)出現(xiàn)一定的假陰性率或假陽(yáng)性率，導(dǎo)致問(wèn)題畜產(chǎn)品流入市場(chǎng)或增加確認(rèn)經(jīng)費(fèi)的投入，因此檢測(cè)閾值是快速檢測(cè)卡質(zhì)量驗(yàn)證的首要指標(biāo)。

3.3 假陰性率的測(cè)定

由于通過(guò)檢測(cè)閾值去掉了2個(gè)產(chǎn)品，因此本試驗(yàn)并未發(fā)現(xiàn)假陰性產(chǎn)品，假陰性率為0，剩余產(chǎn)品符合國(guó)家有關(guān)要求。除了產(chǎn)品本身的問(wèn)題，引起假陰性的原因還包括：個(gè)別樣本中含有較為特殊物質(zhì)或亞型成分，檢測(cè)卡受潮、活性下降或失活，在超過(guò)規(guī)定時(shí)間后讀取結(jié)果等。因此，在產(chǎn)品確定后，應(yīng)當(dāng)規(guī)范檢測(cè)卡的保管和使用。

3.4 假陽(yáng)性率的問(wèn)題

結(jié)果顯示，共有6批次產(chǎn)品存在假陽(yáng)性，其中1個(gè)產(chǎn)品的假陽(yáng)性率超過(guò)10%，判定為不合格。當(dāng)檢測(cè)卡靈敏度過(guò)高，尿液中含有和 “瘦肉精”類(lèi)似代謝物或樣品已被污染 （例如自來(lái)水中殘留的漂白粉，屬于強(qiáng)氧化劑，會(huì)影響抗原抗體反應(yīng)的進(jìn)行）時(shí)，都將導(dǎo)致出現(xiàn)假陽(yáng)性。此時(shí)須用其他方法確認(rèn)該檢測(cè)結(jié)果。

3.5 驗(yàn)證參數(shù)的選擇

檢測(cè)卡的驗(yàn)證參數(shù)共3個(gè)，分別是：檢測(cè)閾值、假陰性率、假陽(yáng)性率。檢測(cè)閾值是非常重要的，只有二者相等時(shí)，才可進(jìn)一步進(jìn)行驗(yàn)證。同時(shí)，假陰性率也比較重要，根據(jù)國(guó)家相關(guān)規(guī)定，檢測(cè)卡用于篩選方法時(shí)，假陰性率必須為零。而一定的假陽(yáng)性率是國(guó)家允許的。由于產(chǎn)品質(zhì)量驗(yàn)證試驗(yàn)涉及到液-質(zhì)聯(lián)用儀等設(shè)備材料，且過(guò)程較復(fù)雜，對(duì)試驗(yàn)條件和資金有一定要求。因此，在試驗(yàn)條件受限的情況下，可優(yōu)先對(duì)“檢測(cè)閾值”、 “假陰性率”這兩個(gè)參數(shù)進(jìn)行驗(yàn)證。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)通過(guò)質(zhì)量驗(yàn)證，根據(jù)檢測(cè)閾值、假陰性率、假陽(yáng)性率3個(gè)驗(yàn)證參數(shù)，證明6家公司共15批次的產(chǎn)品符合國(guó)家相關(guān)部門(mén)要求。同時(shí)，由于產(chǎn)品存在差異，監(jiān)管單位在采購(gòu) “瘦肉精”檢測(cè)卡時(shí)，一定要進(jìn)行產(chǎn)品質(zhì)量驗(yàn)證試驗(yàn)；在試驗(yàn)條件受限的情況下，可優(yōu)先對(duì) “檢測(cè)閾值”、 “假陰性率”進(jìn)行驗(yàn)證。

S816.7；S851.34

A

1673-4645（2013）03-0065-02

2013-02-26