楊中良，楊秀云，胡慶禧，曲曉璐，李劍，劉衛(wèi)東*

(1.上海市浦東新區(qū)浦南醫(yī)院 重癥監(jiān)護(hù)室，上海 200125；2.上海市浦東新區(qū)浦南醫(yī)院 中西醫(yī)結(jié)合科，上海 200125；3.浙江省立同德醫(yī)院 內(nèi)科，浙江 杭州 310012；4.上海市藍(lán)十字醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所，上海 200125)

金威消石顆粒對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛作用的研究△

楊中良1，2，楊秀云3，胡慶禧2，曲曉璐2，李劍4，劉衛(wèi)東4*

(1.上海市浦東新區(qū)浦南醫(yī)院 重癥監(jiān)護(hù)室，上海 200125；2.上海市浦東新區(qū)浦南醫(yī)院 中西醫(yī)結(jié)合科，上海 200125；3.浙江省立同德醫(yī)院 內(nèi)科，浙江 杭州 310012；4.上海市藍(lán)十字醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所，上海 200125)

目的：探索金威消石顆粒對(duì)小鼠痛閾值的影響及對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的作用。方法：ICR小鼠60只隨機(jī)分入金威消石顆粒低、中、高劑量組、陽(yáng)性藥組和對(duì)照組，分別經(jīng)胃灌注不同劑量金威消石顆粒、雙氯芬酸鈉溶液和蒸餾水，以平板法檢測(cè)各小鼠給藥前及給藥后1,2,3,5 h的痛閾值。另取ICR小鼠60只，隨機(jī)分入上述5組，以上法經(jīng)胃灌注上述液體，每日1次，連續(xù)7 d。于末次給藥后1 h，各小鼠由腹腔注射0.7%醋酸溶液0.2 mL，計(jì)數(shù)注射后20 min內(nèi)各小鼠的扭體次數(shù)。結(jié)果：金威消石顆粒各劑量組在給藥后2，3，5 h時(shí)的痛閾值均明顯高于對(duì)照組(P<0.01)；各劑量組3 h和5 h痛閾值明顯高于各組給藥前基礎(chǔ)痛閾值和1 h痛閾值(P<0.01)。金威消石顆粒各劑量組醋酸致小鼠的平均扭體次數(shù)均明顯低于對(duì)照組(P<0.01)。結(jié)論：金威消石顆?？商岣逫CR小鼠熱板法痛閾值，減少醋酸致小鼠的扭體次數(shù)，具有明顯的鎮(zhèn)痛作用。

金威消石顆粒；痛閾值；扭體次數(shù)；鎮(zhèn)痛作用

膽石癥是臨床常見(jiàn)病、多發(fā)病之一，在我國(guó)人群中的發(fā)病率達(dá)0.9%～10.1%[1]。目前膽石癥的治療仍以手術(shù)為主,但手術(shù)并發(fā)癥發(fā)生率和再手術(shù)率均較高[2-3]。中藥治療膽結(jié)石有疏肝利膽、消溶結(jié)石、行氣止痛等方法,具有療效好、價(jià)格低廉、無(wú)毒副作用的特點(diǎn)[4-5]。但是，目前以現(xiàn)代科學(xué)手段對(duì)中草藥特別是中藥復(fù)方制劑的實(shí)驗(yàn)研究資料不多。金威消石顆粒是根據(jù)上海市浦東老中醫(yī)胡伯禽先生60多年治療經(jīng)驗(yàn)組方制成的顆粒劑，臨床試用顯示其具有排石和鎮(zhèn)痛作用。為量化評(píng)估金威消石顆粒的鎮(zhèn)痛作用，本課題組研究其對(duì)小鼠痛閾值的影響及抗醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的作用。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

選擇ICR小鼠120只，體重20～22 g。購(gòu)自上海西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。合格證：SCXK(滬)2003-0002。

1.2 藥物及試劑

金威消石顆粒由上海市時(shí)雨藥業(yè)有限公司生產(chǎn)(批號(hào)：110413)，每包5 g。雙氯芬酸鈉片由上海醫(yī)藥(集團(tuán))有限公司信誼制藥總廠生產(chǎn)(100 mg/片，批號(hào)：100201)，用時(shí)制粉，加蒸餾水并稀釋成830 mg·L-1的溶液；醋酸由上海市凌峰化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)(批號(hào)：101207)，用時(shí)稀釋成0.7%的溶液；蒸餾水。

1.3 方法

1.3.1 小鼠熱板法痛閾值測(cè)定實(shí)驗(yàn) 取60只ICR小鼠，于實(shí)驗(yàn)前1 d用熱板法對(duì)小鼠進(jìn)行痛閾篩選，熱板儀溫度控制在(55.0+0.5) ℃，將小鼠放在熱板上，記錄小鼠第1次舔后足的時(shí)間，作為該小鼠痛閾值[1]。將痛閾值<5 s或>30 s的小鼠剔除后，對(duì)入選小鼠進(jìn)行稱重，隨機(jī)分組，分為對(duì)照組(11只)、陽(yáng)性對(duì)照組(10只)及金威消石顆粒低劑量(10只)、中劑量(11只)、高劑量組(11只)。禁食不禁水，次日測(cè)定各組小鼠的痛閾值，取前后2次平均值作為基礎(chǔ)痛閾值。

低、中、高劑量組分別給予金威消石顆粒，加蒸餾水研磨并稀釋成濃度為66.5,133.0,266.0 g·L-1的混懸液，臨用前搖勻。20 mL·kg-1灌胃，給藥劑量相當(dāng)于1.33,2.66,5.32 g·kg-1，分別相當(dāng)于成人每千克體重臨床用量(0.53 g·kg-1)的2.5，5.0，10.0倍。陽(yáng)性對(duì)照組給予雙氯芬酸鈉溶液，20 mL·kg-1(16.6 mg·kg-1)灌胃。對(duì)照組每天給予蒸餾水20mL·kg-1灌胃。分別于灌胃后1，2，3，5 h以平板法測(cè)定小鼠的痛閾值，痛閾值超過(guò)60 s，則以60 s計(jì)。

1.3.2 醋酸致小鼠扭體實(shí)驗(yàn) 取60只ICR小鼠，隨機(jī)分入對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組及金威消石顆粒低、中、高劑量組，每組12只小鼠。各組給藥方法見(jiàn)1.3.1，5組均每天灌胃1次，連續(xù)7 d。

末次灌胃后1 h，各小鼠分別由腹腔注射0.2 mL的0.7%醋酸溶液，形成一個(gè)化學(xué)性刺激致痛模型，計(jì)數(shù)注射后20 min內(nèi)小鼠的扭體次數(shù)，并計(jì)算抑制率[6]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 不同劑量金威消石顆粒在不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)ICR小鼠熱板法痛閾值的影響

各組基礎(chǔ)痛閾值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，高劑量組和陽(yáng)性藥組給藥后1 h痛閾值均明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。金威消石顆粒不同劑量組及陽(yáng)性藥組在給藥后2，3，5 h時(shí)的痛閾值差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但均明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。金威消石顆粒各劑量組和陽(yáng)性藥組1，2，3，5 h痛閾值均明顯高于基礎(chǔ)痛閾值(P<0.01)；金威消石顆粒低劑量組和陽(yáng)性藥組3 h和5 h痛閾值明顯高于1 h痛閾值 (P<0.01)。詳見(jiàn)表1。

表1 不同劑量金威消石顆粒對(duì)ICR小鼠熱板法痛閾值的影響

注：與對(duì)照組比較，*P<0.01；與基礎(chǔ)痛閾值比較，#P<0.01；與1 h痛閾值比較，△P<0.01；下同

2.2 金威消石顆粒對(duì)醋酸致小鼠扭體次數(shù)的影響

金威消石顆粒不同劑量組醋酸致小鼠的平均扭體次數(shù)，均明顯低于對(duì)照組(P<0.01)，金威消石顆粒不同劑量組與陽(yáng)性藥組小鼠平均扭體次數(shù)無(wú)顯著差異(P>0.05)，見(jiàn)表2。

表2 金威消石顆粒對(duì)醋酸致小鼠扭體次數(shù)的影響

3 討論

膽結(jié)石分為膽固醇結(jié)石、膽色素結(jié)石和混合性結(jié)石，其產(chǎn)生癥狀主要取決于結(jié)石是否阻塞膽囊管，產(chǎn)生膽汁瘀積、感染[7-8]。中藥在排除膽石、控制炎癥、解除痙攣以及防止結(jié)石復(fù)發(fā)等方面療效肯定[4-5]。金威消石顆粒是根據(jù)上海市浦東老中醫(yī)胡伯禽先生60多年治療經(jīng)驗(yàn)組方制成的顆粒劑，臨床試用顯示其具有排石和鎮(zhèn)痛作用。本課題研究觀察金威消石顆粒對(duì)ICR小鼠平板法痛閾值及抗醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響，研究其鎮(zhèn)痛作用，為今后臨床推廣提供可靠的理論依據(jù)。

金威排石顆粒組方以疏肝利膽為主，即以金錢(qián)草和延胡索為君藥，有清熱利濕和疏肝理氣作用，以虎杖和威靈仙為臣藥有保肝、利膽、排石作用；佐以枳實(shí)和人工牛黃有疏肝理氣和利濕排石作用。其中延胡索為罌粟科植物延胡索的干燥塊莖，具有疏肝、理氣、止痛的功效，其主要成分延胡索乙素(1-THP)可抑制外周神經(jīng)自發(fā)放電，進(jìn)而抑制周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)的疼痛[9]。枳實(shí)行氣化滯，并可擴(kuò)張膽管，有利于排石[10]?；⒄饶苊黠@提高小鼠的痛閾值，具有明顯的抗炎鎮(zhèn)痛作用[11]。威靈仙利膽排石,為排石佳品，具有明顯的抗炎鎮(zhèn)痛作用[12]。本研究表明，與對(duì)照組相比，不同劑量的金威消石顆粒均可以提高ICR小鼠的熱板法致痛閾，降低醋酸致小鼠的扭體次數(shù)，提示其有明顯的鎮(zhèn)痛作用。金威消石顆粒的鎮(zhèn)痛作用與雙氯芬酸鈉相似，兩者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

總之，金威消石顆?？商岣逫CR小鼠熱板法痛閾值，減少醋酸致小鼠的扭體次數(shù)，具有明顯的鎮(zhèn)痛作用。

[1] 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)消化系統(tǒng)疾病專(zhuān)業(yè)委員會(huì).膽石癥中西醫(yī)結(jié)合診療共識(shí)[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011，31(8)：1041-1043.

[2] 王蒨,孫百軍,李東華,等.中藥利膽靈對(duì)膽色素結(jié)石患者引流膽汁中膽汁酸的影響[J].天津中醫(yī)藥,2007,24(2)：110-113.

[3] 馬玉紅,李栩.溫針?lè)ㄖ委熌懯g(shù)后尿潴留的臨床體會(huì)[J].天津中醫(yī)藥,2007,24(1)：29.

[4] 王恒杰,郭呂.中藥對(duì)膽石癥患者膽汁成分影響的研究進(jìn)展[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2010,12(9)： 213-215.

[5] 左予桐,高文遠(yuǎn),賈偉,等.中藥防治膽石癥的研究進(jìn)展[J].中國(guó)中藥雜志,2004,29(9)： 14-16，93.

[6] 豐艷梅,車(chē)曉俠. 復(fù)方虎杖燒傷凝膠抗炎鎮(zhèn)痛作用實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中國(guó)藥師, 2010,13(5)：620-622.

[7] Wang DQ, Cohen DE, Carey MC. Biliary lipids and cholesterol gallstone disease[J]. J Lipid Res，2009，50：S406-411.

[8] Venneman NG, Van Erpecum KJ. Pathogenesis of Gallstones[J]. Gastroenterol Clin N Am，2010，39(2)：171-183.

[9] 杜蘭芳,杜永平,徐暉,等.延胡索乙素對(duì)大鼠外周神經(jīng)疼痛作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)中醫(yī)急診,2009,18(5)：781-783.

[10] 張紅,孫明江,王凌.枳實(shí)的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].中藥材, 2009,32(11)：1787-1790.

[11] 楊溪琳.虎杖的現(xiàn)代藥用研究[J].中國(guó)社區(qū)醫(yī)師,2008,10(17)：24.

[12] 周薇,唐乾利,赫軍,等. “大黃靈仙湯”治療膽石癥29例臨床觀察[J].江蘇中醫(yī)藥,2008,40(6)：44-45.

AnalgesicEffectofJinweiLithiasis-eliminatingGranulesinMice

YANG Zhong-liang1，2,YANG Xiu-yun3,HU Qing-xi2,QU Xiao-lu2,LI Jian4,LIU Wei-dong4*

(1.Dept.ofICU,ShanghaiPunanHospitalofPudongNewDistrict,Shanghai200125,China;2.Dept.ofIntegratedTraditionalandWesternMedicine,ShanghaiPunanHospitalofPudongNewDistrict,Shanghai200125,China;3.Dept.ofInternalMedicine,TongdeHospitalofZhejiangProvince,Hangzhou310012,China;4.ShanghaiBlueCrossReasearchInstituteofMedicalScience,Shanghai200125,China)

Objective：To explore the influence of Jinwei lithiasis-eliminating granules on the pain threshold of mice and its effect on torsion numbers of acetic acid-induced mice.Methods:Sixty ICR mice were randomly distributed to three pilot groups(low-,middle-and high-dose group),positive drug group and control group.Aqueous solutions containing Jinwei lithiasis-eliminating granules(1.33,2.67,5.32 g·kg-1),diclofenac sodium tablet(16.6 mg·kg-1)and isovolemic distilled water were perfused by stomach for corresponding mice,respectively,and plate method was used to measure the pain thresholds of mice before and 1,2,3,5 h after stomach perfusion in each group.Another 60 mice were randomly distributed to the above-mentioned groups and managed by the same stomach perfusion,once daily,for 7 d.Each mouse was injected intra-peritoneally 0.2 mL of 0.7% acetic acid solution 1 h just after the final perfusion,and the torsion numbers of all mice during post-injection twenty minutes’ period was counted.Results:The mean pain thresholds of mice 2,3,5 h after stomach perfusion were significantly higher in three pilot groups than that in control group(P<0.01),whereas no significant difference when compared to positive drug group(P>0.05).The mean pain thresholds of mice 3 h and 5 h after stomach perfusion were significantly higher than those before and 1 h after stomach perfusion in the pilot groups(P<0.01).The mean torsion numbers of mice in three pilot groups were less than that in control group(P<0.01),no significant difference existed in the mean torsion numbers of mice between three pilot groups and positive drug group(P>0.05).Conclusion:Jinwei lithiasis-eliminating granules could increase the pain threshold of ICR mice by plate method and decrease the torsion numbers in acetic acid-induced mice,implying a considerable analgesic effect.

Jinwei lithiasis-eliminating granules;Pain threshold;Torsion number;Analgesic effect

2012-11-23)

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上海市衛(wèi)生局中醫(yī)藥開(kāi)發(fā)研究基金(2011XY011)

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劉衛(wèi)東，E-mail：liuwdpn@tom.com