盛慶壽 王 武

廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院(廣西 南寧，530011)

原發(fā)性肝癌按組織學(xué)分類可分為肝細(xì)胞癌(HCC)、膽管細(xì)胞癌(CC)和混合型肝癌，其中以HCC 最為常見(jiàn)，是全球第五大常見(jiàn)腫瘤，死亡率排在第三位［1］。肝癌起病隱蔽，大多數(shù)肝癌患者確診時(shí)已處于肝癌晚期，已經(jīng)不能接受外科手術(shù)治療。在傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)中肝癌屬于“積聚”、“癥瘕”、“鼓脹”等病范圍，中醫(yī)腫瘤界發(fā)展了“癌毒”概念，認(rèn)為正氣虛損是原發(fā)性肝癌發(fā)生發(fā)展的內(nèi)在因素，癌毒內(nèi)生是原發(fā)性肝癌發(fā)生發(fā)展的病理基礎(chǔ)，“癌毒”是惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移最根本的因素［2］。而現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為肝癌的發(fā)生是一個(gè)多因素、多步驟的生物學(xué)過(guò)程，肝癌細(xì)胞的增殖、侵襲需要依賴新生血管。血管的生成與肝癌的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和復(fù)發(fā)均有明顯的相關(guān)性。隨著中藥現(xiàn)代化的發(fā)展，傳統(tǒng)中藥中所篩選的低毒、有效的抗肝癌活性成分成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。筆者將就中藥及中藥提取物通過(guò)抑制肝癌血管生成抗肝癌方面的研究予以探討，并就其抗肝癌血管生成機(jī)制研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 肝癌與血管生成

肝癌是典型的富血管腫瘤，血管生成作用在肝癌生長(zhǎng)中最為典型［3］。在肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)的前期，其僅能夠依靠周圍組織彌散的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來(lái)維持生長(zhǎng)，腫瘤生長(zhǎng)較為緩慢，極少發(fā)生轉(zhuǎn)移。當(dāng)其直徑超過(guò)2mm 時(shí)，隨著肝癌細(xì)胞需氧量的增大，而原有扭曲擴(kuò)張的血管在運(yùn)輸血液上效率很低，內(nèi)部供血不足，很容易缺氧，氧的不足會(huì)抑制癌基因的表達(dá)或抑癌基因的失活，肝癌細(xì)胞必須要形成供給自身的血管。因此為了進(jìn)一步增殖其激活了血管生成促進(jìn)因子，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞的激活、增殖、遷移并生成新的血管［4］。這些新生血管的內(nèi)皮細(xì)胞相比于正常血管內(nèi)皮細(xì)胞具有更強(qiáng)的血管生成能力和藥物抵抗能力，而且血管生長(zhǎng)分布往往不規(guī)則，具有異常的血液流動(dòng)和過(guò)多的滲漏，無(wú)正常的血管功能。這種異常的血管改變最典型的表現(xiàn)是引起微脈管系統(tǒng)動(dòng)脈化和毛細(xì)血管化［3］，幫助腫瘤組織更快速的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)。肝癌血管生成是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，涉及多種血管生成調(diào)控因子間相互協(xié)調(diào)，以及一些小分子物質(zhì)和基因表達(dá)的改變，從而促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞激活、基底膜降解、增殖、遷移、管道化，形成新的毛細(xì)血管網(wǎng)［5］。血管生成調(diào)控因子是促進(jìn)或者抑制血管形成的一類天然物質(zhì)，在腫瘤血管生成過(guò)程中起著主導(dǎo)作用。其種類非常多，當(dāng)前研究較多的包括血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)及其受體(vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR)、基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)及其抑制劑(tissue inhibitor of metalloproteinase，TIMP)、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 (transforming growth factor，TGF)、腫瘤壞死因子 (tumor necrosis factor，TNF)-α、環(huán)氧化酶(cyclooxygenase，COX)-2 等。Hanahan等［6］在1996年提出“血管生成開(kāi)關(guān)”(angiogenic switch)的概念，認(rèn)為腫瘤中與血管生成相關(guān)的抑制因子和促進(jìn)因子之間的平衡被打破是腫瘤血管生成的關(guān)鍵。當(dāng)前臨床上使用的抗血管生成類靶向藥物主要分為兩大類:單克隆抗體如貝伐單抗，貝伐單抗能與人VEGF 結(jié)合并阻斷其生物活性而用于多種癌癥的治療;另一類為酪氨酸激酶抑制劑，代表藥物是索拉菲尼。索拉菲尼是一種多靶向的激酶抑制劑，其主要通過(guò)阻斷Ras-Raf-MAPK 通路直接抑制癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移［7］。這類藥物雖然能在一定程度上起到抑瘤作用，延長(zhǎng)晚期肝癌患者生存時(shí)間，但是都不可避免出現(xiàn)耐藥現(xiàn)象，療效并不持久［8，9］。

2 中藥抗肝癌血管生成的研究

中醫(yī)藥療法治療肝癌時(shí)來(lái)已久，在肝癌特別是晚期肝癌的治療中，中醫(yī)中藥與外科手術(shù)、介入治療、放化療相結(jié)合可明顯提高抗癌療效，減少不良反應(yīng)，預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)，這已得到學(xué)術(shù)界的廣泛認(rèn)同。并且多種中藥及中藥提取物、中成藥、中藥復(fù)方制劑都顯示了較好的抗肝癌作用，在臨床上得到使用。近年的研究表明，某些中藥及中藥提取物或復(fù)方制劑通過(guò)抑制肝癌血管生成，表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗肝癌生長(zhǎng)作用，其中部分藥物的抗血管機(jī)制已經(jīng)得到明確。目前認(rèn)為這些藥物主要通過(guò)以下幾個(gè)方面對(duì)肝癌血管生成進(jìn)行調(diào)控。

2.1 調(diào)控血管生成調(diào)控因子 在中藥及其提取物抗HCC 血管生成方面，當(dāng)前研究的較多的血管生成調(diào)控因子是VEGF、MMP 及其他因子。

2.1.1 下調(diào)VEGF 表達(dá) VEGF 及其受體VEGFR -1、VEGFR-2、VEGFR-3 等是目前發(fā)現(xiàn)最重要的一類血管生成調(diào)控因子，受體與VEGF 的結(jié)合后發(fā)生自身磷酸化，誘發(fā)一系列信號(hào)傳導(dǎo)，而在肝癌的血管生成中起著關(guān)鍵作用［10］。其促血管生成機(jī)制涉及加速血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和分化、促進(jìn)MMP 產(chǎn)生、增強(qiáng)NO 合酶(NOS)表達(dá)等。VEGF 是多種肝癌血管生成抑制劑的干預(yù)靶點(diǎn)，也是目前研究的熱點(diǎn)。貓人參根是一種廣泛用于HCC 治療的傳統(tǒng)中藥，Guo 等［11］將其分離提取物(total saponin from root of Actinidia valvata Dunn，TSAVD)作用于H22肝癌細(xì)胞和H22 肝癌大鼠模型，發(fā)現(xiàn)TSAVD 處理組的腫瘤體積和血管密度都較其他組更小。通過(guò)圖像分析系統(tǒng)定量分析提示，TSAVD 處理組的bFGF 表達(dá)低于對(duì)照組，其中高劑量組的bFGF 表達(dá)較低劑量組低，同時(shí)高劑量組的VEGF 表達(dá)也和其余兩組具有差異性。提示貓人參根通過(guò)下調(diào)VEGF 和bFGF 表達(dá)而具有顯著的抗HCC 血管生成作用。青蒿琥酯是從菊科艾屬植物黃花蒿中分離出來(lái)的活性成分，臨床上用于抗瘧治療，但近年研究發(fā)現(xiàn)其具有較強(qiáng)的抗腫瘤作用。盛慶壽等［12］用免疫組化法觀察青蒿琥酯對(duì)H22 荷瘤小鼠腫瘤組織VEGF 表達(dá)，發(fā)現(xiàn)青蒿琥酯具有下調(diào)腫瘤組織VEGF 表達(dá)的作用，從而認(rèn)為青蒿琥酯的抑瘤作用與下調(diào)VEGF 表達(dá)有關(guān)。Shirakami 等［13］發(fā)現(xiàn)兒茶素通過(guò)抑制HCC 細(xì)胞VEGF-VEGFR 軸而實(shí)現(xiàn)抗HCC血管生成作用，研究發(fā)現(xiàn)兒茶素能明顯降低HCC 細(xì)胞的VEGFR-2 和VEGF 水平，其機(jī)制可能是兒茶素對(duì)ERK 和Akt 蛋白激活的抑制減少了VEGF mRNA 表達(dá)、VEGF 的產(chǎn)生和VEGFR-2 激活，這種抗血管生成機(jī)制也在一項(xiàng)對(duì)EF24 (一種姜黃素類似物)［14］的研究當(dāng)中被提出。Jie 等［15］對(duì)黃連素的研究還發(fā)現(xiàn)，黃連素不僅能抑制HCC 細(xì)胞的VEGF 分泌和VEGF 基因轉(zhuǎn)錄，在實(shí)驗(yàn)中還觀察到這種抑制作用同時(shí)影響到人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移和血管形成，可能也影響到HCC 細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞之間可能存在的某種聯(lián)系，從而發(fā)揮其抗HCC血管生成的作用。

2.1.2 下調(diào)MMP 表達(dá) MMP 是一個(gè)蛋白水解酶大家族，TIMP 是MMP 的特異性抑制劑，兩者之間的平衡關(guān)系主要影響細(xì)胞外基質(zhì)的降解代謝，在腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移、增殖等方面起著重要的作用。同時(shí)MMP 也是一類重要的血管生成調(diào)控因子，其降解細(xì)胞外基質(zhì)的作用，為內(nèi)皮細(xì)胞的移行創(chuàng)造條件，也會(huì)促進(jìn)腫瘤血管生成。MMP 家族被研究的最多的是MMP2和MMP9。

較多學(xué)者研究MMP 在中藥及中藥提取物抗HCC 時(shí)的變化，并將MMP 列為血管生成的一個(gè)觀測(cè)指標(biāo)。人參皂苷是源自中藥人參中的一種活性成分，人參皂苷compound K (CK)是一種源于人參皂苷Rb1、Rb2、Rc 的人體腸道菌代謝產(chǎn)物［16］。Ming 等［17］的研究發(fā)現(xiàn)，CK 處理組的人肝癌細(xì)胞株MHCC97-H 相對(duì)于處理組，除了顯著地抑制細(xì)胞集落形成，抑制細(xì)胞粘附、侵襲、轉(zhuǎn)移能力外，通過(guò)明膠酶譜檢測(cè)和蛋白質(zhì)印跡法還發(fā)現(xiàn)其中MMP2、MMP9 表達(dá)水平明顯降低，同時(shí)發(fā)現(xiàn)對(duì)NF-KB P65 核易位的抑制表明MMP 表達(dá)的抑制作用可能和NF-KB 信號(hào)的激活有關(guān)。青蒿素能打破人肝癌HepG2 細(xì)胞系的MMP-TIMP 平衡，而對(duì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、侵襲力、細(xì)胞周期轉(zhuǎn)換起明顯抑制作用［18］。此外，苦參堿也被發(fā)現(xiàn)具有類似機(jī)制［19］。由于MMP 在腫瘤血管生成過(guò)程中的重要性，提示了這些中藥提取物或許同樣具有潛在的抗HCC 血管生成作用。

2.1.3 對(duì)其他血管生成調(diào)控因子的調(diào)控 此外，扶正抑瘤顆粒［20］和姜黃素［21］能顯著提高HepG2 細(xì)胞內(nèi)TNF-α 水平。染料木黃酮對(duì)HepG2 細(xì)胞內(nèi)的COX-2 和VEGF 表達(dá)能起到抑制作用［22］，這可能和染料木黃酮對(duì)Akt 通路和核因子kB (nuclear factor of kB，NF-kB)的抑制有關(guān)。

2.2 調(diào)控血管生成調(diào)控因子上游因子 腫瘤血管生成因子上游因子能通過(guò)對(duì)某些血管生成調(diào)控因子如VEGF 的調(diào)控，間接發(fā)揮其抗腫瘤血管生成作用。中藥及中藥提取物抑制HCC 血管生成的研究中，涉及的血管生成上游因子主要有信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄活化因子3 (STAT3)和NF-kB 兩大類。

2.2.1 抑制STAT3 活性 STAT3 是一個(gè)關(guān)鍵的信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活蛋白。近年來(lái)，對(duì)STAT3 信號(hào)通路在肝癌的發(fā)生發(fā)展中的作用越來(lái)越受到重視，較多的研究表明STAT3 傳導(dǎo)通路可以調(diào)控肝癌血管的生成［23，24］，而最近的研究也表明很多中藥提取物都可能通過(guò)調(diào)控STAT3 信號(hào)通路途徑發(fā)揮良好的抗肝癌血管生成作用，并對(duì)STAT3 的抗肝癌機(jī)制進(jìn)行了相關(guān)研究。Rajendran 等［25］發(fā)現(xiàn)厚樸酚通過(guò)對(duì)STAT3 上游激酶c-Src、杰納斯活化激酶(Janus Activated Kinase，JAK)1，JAK2 的抑制作用，在抑制HCC 細(xì)胞內(nèi)STAT3 的誘導(dǎo)激活方面具有時(shí)間和劑量的依賴性。而下調(diào)的STAT3 活性和其引起的酪氨酸磷酸酶SHP-1 的表達(dá)有關(guān)。STAT3 的抑制導(dǎo)致了參與HCC 細(xì)胞增殖、存活、血管生成的各自基因產(chǎn)物受到抑制，提示其潛在的抗肝癌及其他癌癥作用。相似的結(jié)論同樣出現(xiàn)在對(duì)吳茱萸堿［26］、β-七葉皂苷［27］的研究中。Peramaiyan 等［28］對(duì)南蛇藤醇的研究進(jìn)一步表明，南蛇藤醇可能在STAT3 的酪氨酰磷酸化過(guò)程中阻斷了Src 和JAKs 的協(xié)同作用。同時(shí)觀察到其對(duì)核轉(zhuǎn)運(yùn)和EGF (表皮生長(zhǎng)因子)誘導(dǎo)的STAT3 活性以及幾個(gè)受STAT3調(diào)控 的基因如細(xì)胞增殖(cyclin D1)、抗凋亡基因產(chǎn)物(Bcl-2，Bcl-xL，survivin，Mcl-1)和血管生成基因產(chǎn)物(VEGF)具有抑制作用，表明南蛇藤醇的抗肝癌作用是通過(guò)了多種機(jī)制進(jìn)行的。此外，Carlisi 等［29］的研究發(fā)現(xiàn)，歐苷菊和TRAIL (腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體)在HepG2，Hep3B，SK-Hep1三種細(xì)胞系內(nèi)的的聯(lián)合治療具有協(xié)同作用，歐苷菊增加了死亡受體TRAIL-R1 和-R2 總量的蛋白或者mRNA 水平，而這種作用可能也和STAT 蛋白的形成活性有關(guān)。

2.2.2 抑制NF-kB 活性 核因子kB 蛋白家族是一種多效性的轉(zhuǎn)錄因子，可以與多種基因啟動(dòng)子部位的kB 位點(diǎn)發(fā)生特異性的結(jié)合從而促進(jìn)其轉(zhuǎn)錄表達(dá)，參與細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、炎癥，及免疫反應(yīng)、凋亡等多種基因表達(dá)調(diào)控，與炎癥反應(yīng)、腫瘤細(xì)胞增殖和凋亡有著密切聯(lián)系。有研究發(fā)現(xiàn)，通過(guò)抑制HCC 細(xì)胞內(nèi)NF-kB 信號(hào)通路的激活，能降低VEGF、MMP 表達(dá)而達(dá)到抑制HCC 血管生成的作用［30］。研究發(fā)現(xiàn)很多中藥提取物具有抑制HCC 細(xì)胞NF-kB 活性的作用，Yu 等［31］將各組HepG2 細(xì)胞培養(yǎng)在含不同劑量(10、50、100、200μm)白藜蘆醇的無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)，對(duì)照組用無(wú)血清DMEM 培養(yǎng)基，并通過(guò)western bloting、RT-PCR 等方法進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，相對(duì)于對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的NF-kB 活性受到明顯抑制，并觀察到VEGF 蛋白和mRNA 表達(dá)也均明顯降低。同時(shí)進(jìn)行的體外試驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組裸鼠移植瘤內(nèi)增生的血管內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量明顯減少，微血管密度下降。表明白藜蘆醇對(duì)HCC 血管生成具有抑制作用，并支持了NF-kB 信號(hào)通路對(duì)VEGF 表達(dá)有抑制作用這一觀點(diǎn)。三椏烏藥提取物［32］同樣能夠降低HCC 細(xì)胞內(nèi)NF-kB 的轉(zhuǎn)錄活性，以及IGF-1 誘導(dǎo)的VEGF 表達(dá)，其機(jī)制可能是藥物減弱了IGF-1R上游靶點(diǎn)如AKt、Atat3、ErK 的活性，而對(duì)HCC 的血管生成和細(xì)胞存活起到直接的損害作用。此外，對(duì)苦馬豆素［33］和黃芪皂苷［34］的研究也發(fā)現(xiàn)了其對(duì)HCC 細(xì)胞NF-kB 活性的抑制作用。

2.2.3 調(diào)控其他血管生成調(diào)控因子上游因子 除NF-kB 和STAT3 外，還有一些相關(guān)中藥提取物的研究指標(biāo)涉及到HCC細(xì)胞VEGF 表達(dá)和血管生成，如:牛樟芝［35］的生物制品ACMFB 具有顯著抑制HCC 腫瘤生長(zhǎng)和腫瘤細(xì)胞生存能力的作用，并能抑制內(nèi)皮細(xì)胞遷移和血管生成活性。同時(shí)觀察到AC-MFB可以下調(diào)HCC 細(xì)胞內(nèi)的缺氧誘導(dǎo)因子-1α 水平，而抑制HCC細(xì)胞內(nèi)的VEGF 產(chǎn)生。芹黃素［36］的抗血管生成活性研究除了觀察到芹黃素能下調(diào)huh-7 細(xì)胞內(nèi)的VEGF 和MMP-8 表達(dá)，還發(fā)現(xiàn)細(xì)胞遷移的抑制和波形蛋白、I 型膠原的下調(diào)相一致，提示了波形蛋白可能是肝癌腫瘤血管生成的關(guān)鍵因素并且是抗血管生成活性的靶點(diǎn)。

3 結(jié)語(yǔ)

抗血管生成研究作為肝癌治療的新研究方向，給眾多的中晚期肝癌患者帶來(lái)了曙光。索拉菲尼等抗血管生成藥物的上市，在延長(zhǎng)肝癌患者生存時(shí)間，提高生活質(zhì)量方面具有著重大意義，但這些藥物仍不可避免的存在耐藥的問(wèn)題，療效并不持久。傳統(tǒng)中醫(yī)中藥在肝癌治療和預(yù)防方面已經(jīng)顯示了顯著的療效。運(yùn)用現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)傳統(tǒng)中藥及中藥提取物進(jìn)行分析，不僅能使傳統(tǒng)中藥的抗肝癌療效機(jī)制得以闡明，使中藥的抗肝癌機(jī)制更加系統(tǒng)和科學(xué)，而更容易被世人認(rèn)同;同時(shí)作為抗肝癌血管生成藥物開(kāi)發(fā)的一個(gè)方向，具有無(wú)耐藥、低成本、低毒的優(yōu)勢(shì)，以及較強(qiáng)的臨床應(yīng)用潛在價(jià)值和廣闊的開(kāi)發(fā)前景。同時(shí)近年相關(guān)研究還存在著以下問(wèn)題:①肝癌的血管生成是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，而大多數(shù)研究指標(biāo)都集中在主要的幾個(gè)血管生成調(diào)控因子上，對(duì)其他種類眾多的血管生成調(diào)控因子研究并不多。②盡管目前已經(jīng)有華蟾素、紫杉醇等抗癌中藥用于肝癌的治療并且取得較好療效，顯示了開(kāi)發(fā)中藥抗癌新藥的巨大潛力。但在中藥抑制肝癌血管生成方面，多數(shù)研究仍處于實(shí)驗(yàn)階段，僅限于細(xì)胞和動(dòng)物試驗(yàn)，還缺乏后續(xù)研究，尚沒(méi)有令人信服的成果出現(xiàn)。

［1］Huynh H.Molecularly targeted therapy in hepatocellular carcinoma［J］.Biochem Pharmacol，2010，80 (5):550 -560.

［2］杜琴，胡兵，沈克平，等.肝癌中醫(yī)病機(jī)與治法研究［J］.世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2010，5 (9):814 -817.

［3］Yang ZF，Poon RT.Vascular changes in hepatocellular carcinoma［J］.Anat Rec (Hoboken)，2008，291 (6):721 -734.

［4］Ferrara N.Vascular endorthelial growth factor as a target for anticancer therapy［J］.Oncologist，2004，9 (suppl 1):2 -10.

［5］Semela D，Dufour JF.Angiogenesis and hepatocellular carcinoma［J］.Journal of Hepatoloy，2004，41 (5):864 -880.

［6］Hanahan D，F(xiàn)olkman J.Patterns and emerging mechanisms of the angiogenic switch during tumorigenesis ［J］.Cell，1996，86 (3):353 -364.

［7］Kerbel RS.Tumor angiogenesis ［J］.The New England Journal of Medicine，2008，358 (19):2039 -2049.

［8］Welker MW，Trojan J.Anti-angiogeneses in hepatocellular carcinoma treatment:currunt evidence and future perspectives ［J］.World J Gastroenteril，2011，17 (26):3075 -3081.

［9］Hui Jun Zhou，Jia Li Zhang Ao Li，et al.Dihydroartemisinin improves the efficiency of chemotherapeutics in lung carcinomas in vivo and inhibits murine Lewis lung carcinoma cell line growth in vitro［J］.Cancer Chemother Pharmacol，2010，66 (1):21 -29.

［10］Poon RT，Ho Jw，Tong CS，et al.Prognostic significance of serum vascular endothelial growth factor and endostatin in patients with hepatocellular carcinoma ［J］.Br J Surg，2004，91 (10):1354 -1360.

［11］Guo Yin Zheng，Hai Liang Xin，Yan Fen XU，et al.Total Saponin from root of actinidia valvata dunn in hibits hepatoma 22 growth and metastasis in vivo by suppression angiogenesis ［J］.Evid Based Complement Alternat Med，2012，2012:432814.

［12］盛慶壽，張華，農(nóng)慧，等.青蒿琥酯對(duì)H22 小鼠腫瘤VEGF 表達(dá)的影響［J］.中國(guó)藥理與臨床，2008，24 (2):8 -10.

［13］Shirakami Y，Shimizu M，Adachi S，et al.(-) -Epigallocatechin gallate suppresses the growth of human hepatocellular carcinoma cells by inhibiting activation of the vascular endothelial growth factor-vascular endothelial growth factor receptor axis ［J］.Cancer Sci，2009，100 (10):1957 -1962.

［14］Liu H，Liang Y，Wang L，et al.In vivo and in vitro suppression of hepatocellular carcinoma by EF24，a curcumin analog ［J］.PLoS one，2012，7 (10):e48075.

［15］Jie S，Li H，Tian Y.et al.Berberine inhibits angiogenic potential of Hep G2 cell line through VEGF down-regulation in vitro ［J］.J Gastroenterol Hepatol，2011，26 (1):179 -185.

［16］M.Karlkura，T.Miyase，H.Tanizawa，et al.Studies on absorption，distribution，excretion and metabolism of ginseng saponins.VII.Comparison of the decomposition modes of ginsenoside-Rb1 and-Rb2 in the digestive tract of rats ［J］.Chem Pharm Bull，1991，39 (9):2357 -2361.

［17］Ming Y，Chen，Z，Chen L，et al.Ginsenoside compound K attenuates metastatic growth of hepatocellular carcinoma，which is associated with the translocation of nuclear factor-KB p65 and reduction of matrix metalloproteinase-2/9 ［J］.Planta Med，2011，77 (5):428 -433.

［18］Weifeng T，F(xiàn)eng S，Xiangji L，et al.Artemisinin inhibits in vitro and in vivo invasion and metastasis of human hepatocellular carcinoma cells［J］.Phytomedicine，2011，18 (2 -3):158 -162.

［19］Yu Hb，Zhang Hf，Li Dy，et al.Matrine inhibits matrix metalloproteinase-9 expression and invasion of human hepatocellular carcinoma cells［J］.J Asian Nat Prod Res，2011，13 (3):242 -250.

［20］Cao Z，Liao L，Chen X，et al.Enhancement of antitumor activity of low-dose 5-fluorouracil by combination with Fuzheng-Yiliu granules in hepatoma 22 tumor-bearing mice ［J］.Integr Cancer Ther，2013，12(2):174 -181.

［21］Wang Wz，Li L，Liu My，et al.Curcumin induces FasL-related apoptosis through p38 activation in human hepatocellular carcinoma Huh7 cells ［J］.Life Sci，2013，92 (6 -7):352 -358.

［22］Ma Y，Wang J，Liu L，et al.Genistein potentiates the effect of arsenic trioxide against human hepatocellular carcinoma:role of Akt and nuclear factor-κB ［J］.Cancer Lett，2011，301 (1):75 -84.

［23］Subramaniam A，Shanmugam MK，Perumal E，et al.Potential role of signal transducer and activator of transcription (STAT)3 signaling pathway in inflammation，survival，proliferation and invasion of hepatocellular carcinoma ［J］.Biochim Biophys Acta，2013，1835 (1):46 -60.

［24］Wang Xh，Liu Br，Qu B，et al.Silencing STAT3 may inhibit cell growth through regulating signaling pathway，telomerase，cell cycle，apoptosis and angiogenesis in hepatocellular carcinoma:potential uses for gene therapy ［J］.Neoplasma，2011，58 (2):158 -171.

［25］Rajendran P，Li F，Shanmugam MK，et al.Honokiol inhibits signal transducer and activator of transcription-3 signaling，proliferation，and survival of hepatocellular carcinoma cells via the protein tyrosine phosphatase SHP-1 ［J］.J Cell Physiol，2012，227 (5):2184 -2195.

［26］Yang J，Cai X，Lu W，et al.Evodiamine inhibits STAT3 signaling by inducing phosphatase shatterproof 1 in hepatocellular carcinoma cells［J］.Cancer Lett，2013，328 (2):243 -251.

［27］Tan Sm，Li F，Rajendran P，et al.Identification of beta-escin as a novel inhibitor of signal transducer and activator of transcription 3/Janus-activated kinase 2 signaling pathway that suppresses proliferation and induces apoptosis in human hepatocellular carcinoma cells ［J］.J Pharmacol Exp Ther，2010，334 (1):285 -293.

［28］Rajendran P，Li F，Shanmugam MK，et al.Celastrol suppresses growth and induces apoptosis of human hepatocellular carcinoma through the modulation of STAT3/JAK2 signaling cascade in vitro and in vivo ［J］.Cancer Prev Res (Phila)，2012，5 (4):631 -643.

［29］Carlisi D，D'Anneo A，Angileri L，et al.Parthenolide sensitizes hepatocellular carcinoma cells to TRAIL by inducing the expression of death receptors through inhibition of STAT3 activation ［J］.J Cell Physiol，2011，226 (6):1632 -1641.

［30］Wu Jm，Sheng H，Saxena R，et al.NF-kappaB inhibition in human hepatocellular carcinoma and its potential as adjunct to sorafenib based therapy ［J］.Cancer Lett，2009，278 (2):145 -155.

［31］Yu Hb，Zhang Hf，Zhang X，et al.Resveratrol inhibits VEGF expression of human hepatocellular carcinoma cells through a NF-kappa Bmediated mechanism ［J］.Hepatogastroenterology，2010，57(102-103):1241 -1246.

［32］Freise C，Ruehl M，Erben U，et al.A hepatoprotective Lindera obtusiloba extract suppresses growth and attenuates insulin like growth factor-1 receptor signaling and NF-kappaB activity in human liver cancer cell lines ［J］.BMC Complement Altern Med，2011，11 (1):3 -9.

［33］You N，Liu W，Wang T，et al.Swainsonine inhibits growth and potentiates the cytotoxic effect of paclitaxel in hepatocellular carcinoma in vitro and in vivo ［J］.Oncol Rep，2012，28 (6):2091 -2100.

［34］Auyeung KK，Law PC，KO JK，Astragalus saponins induce apoptosis via an ERK-independent NF-kappaB signaling pathway in the human hepatocellular HepG2 cell line ［J］.Int J Mol Med，2009，23 (2):189 -196.

［35］Liu Ym，Liu Yk，Lan Kl，et al.Medicinal Fungus Antrodia cinnamomea Inhibits Growth and Cancer Stem Cell Characteristics of Hepatocellular Carcinoma ［J］.Evid Based Complement Alternat Med，2013，2013:569 -737.

［36］Kim Br，Jeno Yk，Nam Mj.A mechanism of apigenin-induced apoptosis is potentially related to anti-angiogenesis and anti-migration in human hepatocellular carcinoma cells ［J］.Food Chem Toxicol，2011，49 (7):1626 -1632.