趙正據(jù)，成 昊，向一鳴，吳 劍，羅菊英

血管內皮生長因子對尤文肉瘤的診斷及預后價值

趙正據(jù)，成 昊，向一鳴，吳 劍，羅菊英

目的 研究血清中的血管內皮生長因子(VEGF)在尤文肉瘤中的表達，為尤文肉瘤的診斷及預后的判斷提供依據(jù)。方法 將本院骨科自2009年1月～2012年11月間18例組織病理學上診斷為尤文肉瘤而尚未進行過放、化療的患者納入本研究的病例組，分別收集所有患者化療前和化療后的血液樣本，測量血清中VEGF的水平。此外，選擇20名來本院體檢的正常人作為健康對照組，亦檢測其血清VEGF水平。 結果 18例尤文肉瘤患者平均血清VEGF水平為4547.78 pg/ml，健康對照組為175.8 pg/ml，前者比后者顯著升高(P<0.01)。此外，在進行過新輔助化療的患者，其化療后的血清VEGF較化療前顯著下降(P<0.01)。結論 尤文肉瘤患者的血清VEGF水平顯著增高，比較化療前/后血清VEGF水平，可作為判斷患者預后的標志。

內皮生長因子；尤文肉瘤；診斷；預后

尤文肉瘤作為骨髓間胚層支架細胞演變而來的未分化的網(wǎng)狀細胞肉瘤，其發(fā)病率居于小兒原發(fā)惡性骨腫瘤的第2位，占原發(fā)性骨腫瘤的10%～15%。其惡性度高，發(fā)展快，病程短，早期即可廣泛轉移，預后不良，治療及預后關鍵在于對局部原發(fā)病灶的控制及全身化療效果的評估[1]。若能找到一種能夠對監(jiān)測尤文肉瘤病灶發(fā)展及化療效果的指標，則對尤文肉瘤患者的治療及預后具有極其重要的價值。腫瘤的生物學表明其生長及轉移必然伴隨血管的發(fā)生[2]，而血管內皮生長因子(VEGF)是刺激血管發(fā)生的最強血管因子，其作為主要的血管生長因子，能夠誘導內皮細胞增殖并增加血管內皮細胞的通透性，從而激活血管內皮生長因子受體途徑，觸發(fā)促進內皮細胞生長、遷移的信號通路。而組織中VEGF的表達與腫瘤發(fā)生、發(fā)展高度相關，且被證明在治療許多惡性腫瘤的過程中具有判斷預后的價值[3]。由于ELISA法比組織免疫組化染色法具有定量測量的優(yōu)勢[4]，所以本研究選用ELISA法測量血清VEGF水平，旨在觀察血清VEGF在尤文肉瘤中的表達，以研究其在尤文肉瘤的診斷及預后判斷中的價值。

1 對象與方法

1.1 研究對象 收集咸寧市中心醫(yī)院骨科及湖北科技學院附屬二院外科2009年1月～2012年11月間組織病理學上診斷為尤文肉瘤而尚未進行過放、化療的患者，并與患者簽訂研究知情同意書。排除繼發(fā)性腫瘤；之前進行過放、化療及手術治療；發(fā)生遠處轉移；<2歲或>75歲的患者。共納入18例符合納入標準的尤文肉瘤患者。另同期計算機隨意抽取20名來本院健康體檢的正常人作為健康對照組，年齡、性別等與病例組無顯著性差異。

1.2 方法 18例患者根據(jù)標準化治療方案制定新輔助化療策略進行治療，包括長春新堿、放線菌素D、環(huán)磷酰胺，并與依托泊苷和異環(huán)磷酰胺交替運用。分別于患者進行化療前和化療后，抽取患者的5 ml血液樣本，使用人VEGF LISA試劑盒(Bender Medsystem,Austria)檢測血清VEGF水平。通過MRI圖像測量原發(fā)腫瘤的長、寬、高，運用公式 π/6×長×寬×高，計算出腫瘤的體積。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行分析，采用Mann-Whitney U檢驗比較兩組患者的血清VEGF水平，而治療前/后的比較，運用Wilcoxon 配對秩和檢驗；相關性分析運用Pearson相關性檢驗。以α= 0.05為檢驗水準。

2 結果

18例患者中，男性10例，女性8例，平均12.44(7～18)歲，病灶發(fā)生部位以股骨最常見(10例)，其次為脛骨4例、肱骨2例及其他2例。MRI圖像測量原發(fā)腫瘤的平均大小為213(31～1443)ml，其中<100 ml的3例；≥100 ml的15例。

病例組血清VEGF水平為(4547.78±2103.45)pg/ml，而健康對照組血清VEGF水平為(175.8±90.5)pg/ml，表明血清VEGF水平在尤文肉瘤的患者中出現(xiàn)顯著性升高(P<0.01)。此外，病例組進行17個周期的化療后，血清VEGF水平較之化療前明顯降低(2468.57 pg/ml vs 4547.78 pg/ml，P<0.01)。

整個研究中，隨訪時間為8～24個月，平均12個月。期間共有8例發(fā)生了肺部轉移，其中1例患者死亡。肺轉移患者總體生存率為87.5%，而非肺轉移患者的總體生存率為100%。

3 討論

很多研究發(fā)現(xiàn)，VEGF作為血管內皮特異性有絲分裂素及存活因子，能夠增加血管的通透性，并能促進骨髓分化出更多的原始細胞，在新血管的生成中起到關鍵的調節(jié)作用，從而在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮作用。臨床一些研究已經證實，VEGF密切相關于血管的發(fā)生及許多腫瘤的預后[5]。之前的大多數(shù)研究都傾向于用免疫組化分析尤文肉瘤的活檢組織，而本研究中，通過VEGF進行定量分析所得出的結論，與通過組織活檢進行免疫組化分析及基因檢測所得結論一致[6-7]。在相關VEGF與堿性成纖維細胞因子(bFGF)在小兒惡行腫瘤中作用的研究中[8]，檢測病例組與健康對照組尿與血清中的VEGF及bFGF，發(fā)現(xiàn)血清VEGF與年齡、性別、腫瘤大小之間不存在相關性，但所有原始神經外胚層腫瘤患者與淋巴瘤患者血清中VEGF出現(xiàn)了顯著性的增高，且在接受化療后，血清中VEGF出現(xiàn)顯著下降，bFGF未受到影響。然而此研究未進一步闡述血清中VEGF出現(xiàn)下降的原因。

從取樣便捷性方面考慮，提取尿中VEGF顯然比血清中VEGF要顯得方便得多，但Pavlakovic等[8]的研究結果發(fā)現(xiàn)，升高的VEGF主要來源于腫瘤組織，且腫瘤患者與正常人的尿中VEGF的差異性不大。他們的研究也未發(fā)現(xiàn)血清VEGF水平與年齡、性別、腫瘤大小存在相關性。在本研究中，18例腫瘤患者與健康對照組相比，血清VEGF水平出現(xiàn)了顯著的增高(P<0.01)。本研究還發(fā)現(xiàn)病例組化療后血清VEGF水平出現(xiàn)顯著下降(P<0.01)，因此認為，VEGF水平檢測在化療反應中可起到監(jiān)測的作用，即對比化療前/后血清VEGF水平差異，則可能作為判斷預后的指標。而另外一些研究者也得到過類似的研究結果[9]。雖然本研究中有8例患者發(fā)生肺轉移，但是未發(fā)現(xiàn)血清VEGF水平與肺轉移及總體存活率之間存在相關性，與Rutkowski等[9]的報道類似。另外一些研究者則認為，VEGF在尤文肉瘤是個獨立因素[10]。Zhou等[11]研究發(fā)現(xiàn)，骨髓細胞參與了尤文肉瘤中新生腫瘤血管的形成，且VEGF在這個過程中起到關鍵的作用，認為VEGF受體抗體可用于治療尤文肉瘤。

由于本研究病例數(shù)太少，且僅發(fā)生1例患者死亡，最終無法完成Kaplan-Meier曲線。但是本次研究足以認定尤文肉瘤患者血清VEGF水平出現(xiàn)了顯著的增高，而且比較化療前/后血清VEGF水平可作為判斷患者預后的標志，即血清中VEGF與尤文肉瘤的生物學行為密切相關。

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Value of vascular endothelial growth factor in the diagnosis and prognosis of Ewing's sarcoma

Zhao Zhengju1,Cheng Hao1,Xiang Yiming3,Wu Jian3,Luo Juying2

1.Department of Surgery,Clinical College;2.School of Nursing,Hubei University of Science and Technology;3.Department of Vertebral Column Joint,Central Hospital of Xianning City,Xianning,Hubei,437100,China

Objective To study the expression of vascular endothelial growth factor(VEGF)in Ewing's sarcoma,and to provide reference for its diagnosis and prognosis.Methods Eighteen patients,who were histopathologically diagnosed as Ewing's sarcoma and had not

chemotherapy or radiotherapy yet between January 2009 and November 2012,were selected as the case group.The blood samples of all the patients before and after the chemotherapy were collected,and the level of VEGF in their sera was detected.Furthermore,20 healthy people who received the health examination in the hospital were selected as control group.And the VEGF level in their sera was also detected.Results The average level of serum VEGF of 18 cases of Ewing's sarcoma was 4547.78 pg/ml,and that of the control group was 175.8 pg/ml.Compared with the latter one,the former significantly increased(P<0.01).Among the patients receiving the neoadjuvant chemotherapy,their levels of serum VEGF significantly decreased after the chemotherapy(P<0.01).Conclusion The serum VEGF level of the patients with Ewing's sarcoma significantly increases.The comparison between the VEGF level before and after the chemotherapy may be used as a marker for the prognosis of those patients.

vascular endothelial growth factor;Ewing's sarcoma;diagnosis;prognosis

湖北科技學院校級科研基金資助項目(KY09082)

437100 湖北 咸寧，湖北科技學院臨床學院外科(趙正據(jù)，成 昊)，護理學院(羅菊英)；湖北省咸寧市中心醫(yī)院脊柱關節(jié)外科(向一鳴，吳 劍)

羅菊英，電話：15872836020；E-mail：luojuying2012@163.com

R 738.1

A

1004-0188(2014)01-0012-03

10.3969/j.issn.1004-0188.2014.01.005

2013-07-16)