胡衛(wèi)紅 丁宇杰 陸光華 徐韓 李霞 肖世富

阿爾茨海默病患者血清腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子水平研究

胡衛(wèi)紅 丁宇杰 陸光華 徐韓 李霞 肖世富

目的探討阿爾茨海默病(AD)與血清腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)水平的關(guān)系。方法采用酶聯(lián)免疫吸附法對46例AD患者(研究組)和44例正常對照者(對照組)的外周血清進行BDNF水平檢測。所有受試者均進行簡易精神狀態(tài)量表(MMSE)、Hachinski缺血指數(shù)(HIS)及漢密爾頓抑郁量表(HAMD)評定，AD患者用臨床癡呆評定量表(CDR)進行癡呆嚴重程度分級。結(jié)果研究組血清BDNF水平低于對照組(P＜0．01)。研究組輕度、中度與重度AD患者血清BDNF水平均低于對照組(P＜0．01)，重度AD血清BDNF水平低于輕度AD(P＜0．05)。研究組血清BDNF水平與年齡、病程呈負相關(guān)(P＜0．01)，與MMSE評分呈正相關(guān)(P＜0．01)。結(jié)論AD患者存在血清BDNF水平降低，且與其年齡、病程及癡呆程度顯著相關(guān)。

阿爾茨海默病腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子HAMD

阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)是一種慢性退行性神經(jīng)變性疾病，以老年斑、神經(jīng)元纖維纏結(jié)及神經(jīng)元脫失為主要病理特征［1］。腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain－derived neurotrophic factor，BDNF)是一種作用廣泛而有效的神經(jīng)營養(yǎng)因子，對神經(jīng)元有保護作用，在神經(jīng)元的生長、分化、突觸可塑性、神經(jīng)元的存活和修復(fù)過程中發(fā)揮著重要作用，并可能參與了AD的病理過程［2，3］。有研究顯示外周血清BDNF水平與腦皮質(zhì)BDNF水平呈正相關(guān)［4］，因此血清BDNF水平可在一定程度上反映腦中BDNF的變化。然而目前有關(guān)AD與血清BDNF的關(guān)系尚存在著矛盾的結(jié)論。因此，本研究擬以AD患者為對象，進一步探討AD與血清BDNF水平的關(guān)系。

1 對象與方法

1．1 對象研究組為2012年6月～2013年5月上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬精神衛(wèi)生中心住院及門診就診的年齡≥60歲的老年患者。符合美國國立神經(jīng)疾病及交流障礙與卒中研究所－阿爾茨海默病及相關(guān)疾病學(xué)會(NINCDS－ADRDA)制定的很可能AD(probable AD)診斷標(biāo)準(zhǔn)。簡易精神狀態(tài)量表(MMSE)＜17分(文盲)、20分(小學(xué))、24分(中學(xué)以上)，Hachinski缺血指數(shù)(HIS)＜4分，漢密爾頓抑郁量表(HAMD)＜7分。共納入AD患者46例，其中男24例，女22例;年齡62～89歲，平均年齡(75．65±5．04)歲。受教育情況:文盲12例，小學(xué)17例，中學(xué)以上17例。并根據(jù)臨床癡呆評定量表(CDR)分值將AD分為輕度15例、中度19例、重度12例。對照組為健康志愿者。MMSE評分28～30分，HIS＜4分，HAMD＜7分。無高血壓及神經(jīng)精神科疾病史，無內(nèi)分泌疾病及癡呆家族史。收集健康受試者44名，其中男22名，女22名;年齡60～88歲，平均年齡(74．58±5．26)歲。受教育情況:文盲8名，小學(xué)16名，中學(xué)以上20名。以上所有受試者或家屬均知情同意。

1．2 實驗方法所有受試者均于上午6時采集空腹靜脈血5 ml，室溫靜置凝集1h，以2500r/min離心10 min，取血清分裝于EP管中，置于－20℃冰箱冷凍保存。采用雙抗體夾心ABC－ELISA法測定血清BDNF濃度。試劑盒由上海舜田生物科技有限公司提供，一板96孔，靈敏度:最小可測人BDNF達0．6 ng/ml。重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)＜10%，板間變異系數(shù)＜15%。

1．3 統(tǒng)計分析采用SPSS16．0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理。兩組間均數(shù)比較采用獨立樣本t檢驗;多組間均數(shù)比較采用方差分析;相關(guān)性分析應(yīng)用Pearson相關(guān)分析。P＜0．05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．1 兩組血清BDNF水平比較研究組血清BDNF水平為(17．34±3．15)ng/ml，對照組為(22．15± 5．63)ng/ml，研究組血清BDNF水平低于對照組(t= 4．857，P＜0．01)。

2．2 不同嚴重程度AD患者與對照組血清BDNF水平比較研究組輕度AD患者血清BDNF水平為(19．03±2．41)ng/ml，中度AD患者為(17．14± 2．05)ng/ml，重度AD患者為(15．26±3．17)ng/ml;對照組為(22．15±5．63)ng/ml。方差分析顯示:4組血清BDNF水平比較有顯著性差異(F=6．835，P＜0．01);采用SNK法進一步多重分析顯示:輕度、中度與重度AD患者血清BDNF水平均低于對照組(P＜0．01);重度AD血清BDNF水平低于輕度AD(P＜0．05)，而輕度與中度以及中度與重度AD之間比較無顯著性差異(P＞0．05)。

2．3 血清BDNF水平與AD患者年齡、病程及MMSE得分Pearson相關(guān)分析患者年齡(r=－0．568，P= 0．001)、病程(r=－0．374，P=0．004)與血清BDNF水平呈顯著負相關(guān)，而MMSE評分與患者血清BDNF水平呈顯著正相關(guān)(r=0．285，P=0．007)。

3 討論

BDNF是德國神經(jīng)生物學(xué)家Barde等于1982年首次從豬腦中純化，發(fā)現(xiàn)具有防止神經(jīng)元死亡功能的一種堿性蛋白質(zhì)［2］，而AD是一種慢性進行性神經(jīng)變性疾病，因此，BDNF與AD的關(guān)系近年來備受關(guān)注。一些研究顯示Aβ可以下調(diào)BDNF表達，損害其在軸突內(nèi)的運輸［5］。Aβ還可以損害BDNF誘導(dǎo)的有關(guān)基因表達［6］。而給予外源性BDNF可以逆轉(zhuǎn)Aβ所致的神經(jīng)變性改變，如突觸密度降低、突觸營養(yǎng)不良、神經(jīng)細胞固縮和海馬萎縮［7］。因此，Aβ沉積可能是導(dǎo)致AD患者腦內(nèi)BDNF降低的重要因素，而BDNF則是重要的神經(jīng)保護因子。

在外周血清的研究中，也有較多的研究顯示AD患者存在BDNF水平的降低［8～10］。Lee GJ等［11］的研究還顯示AD患者不但存在血清BDNF水平的下降，且還與MMSE評分密切相關(guān)。Pláteník J等［12］報道血清BDNF水平下降主要與中重度AD相關(guān)。但也有不一致報道。O’Bryant SE等［13］的研究顯示血清BDNF水平在AD和健康對照組無顯著差異。Nagata T等［14］也報道AD患者血清BDNF水平與癡呆程度無顯著相關(guān)性，只是與攻擊行為密切相關(guān)。還有研究顯示AD患者存在血清BDNF水平增高［15］。因此，外周血清BDNF水平與AD的關(guān)系目前尚不能作出肯定的結(jié)論。

本研究通過對46例AD患者與44例正常對照者血清BDNF水平的研究顯示，AD患者存在血清BDNF水平的顯著降低，且與癡呆嚴重程度呈正相關(guān)，而與年齡、病程呈負相關(guān)。這與有關(guān)報道基本一致［11，16］。但本研究也存在不足，樣本偏小，為橫斷面研究，因此，尚須前瞻性、大樣本的研究來進一步證實。

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Serum brain-derived neurotrophic factor levels in Alzheimer’s disease．

HU Weihong，DING Yujie，LU Guanghua，et al．Department of Geriatrics，Shanghai Mental Health Center，Medical School of Shanghai Jiaotong University，Shanghai 201108，China

ObjectiveTo explore the correlation between level of serum brain－derived neurotrophic factor(BDNF)and Alzheimer’s disease(AD)．MethodsSerum level of BDNF were measured in 46 patients with AD(study gorup)and 44 healthy controls(control group)by enzyme－linked immunosorbant assay．All subjects were assessed with Mini Mental State Examination(MMSE)，Hachinski Ischemic Score(HIS)and Hamilton Depression Scale(HAMD)．The severity of AD was evaluated according to Clinical Dementia Rating Scale(CDR)．ResultsSerum level of BDNF were significantly lower in AD patients than that in control group(P＜0．01)．Serum BDNF level in patients with mild AD，moderate AD and severe AD were all significantly lower than that in control group(P＜0．01)．Serum BDNF level in patients with severe AD was significantly lower than that in mild AD(P＜0．05)．Serum BDNF level in study group was significantly negatively correlated with age and duration(P＜0．01)，and was significantly positively correlated with score of MMSE(P＜0．01)．ConclusionsSerum level of BDNF is low in patients with AD and is correlated with age，duration and the severity of AD．

Alzheimer’s diseaseBrain－derived neurotrophic factorHAMD

R742

A

1009－7201(2014)－06－0424－03

10．3969/j．issn．1009－7201．2014．06．007

2014－08－01)

201108，上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬精神衛(wèi)生中心

丁宇杰，E－mail:xiaojie－d@163．com