胡 玲，蘇 雷，商琰紅，王志宇，李小芳，焦 進(jìn)，陳春燕

（1. 河北大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，河北 保定 071000；2. 安國(guó)市醫(yī)院，河北 安國(guó) 071200 ）

結(jié)直腸癌患者血清淀粉樣蛋白、D二聚體和CA724水平對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)

胡 玲1，蘇 雷1，商琰紅1，王志宇1，李小芳1，焦 進(jìn)1，陳春燕2

（1. 河北大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，河北 保定 071000；2. 安國(guó)市醫(yī)院，河北 安國(guó) 071200 ）

目的…研究結(jié)直腸癌患者血液中血清淀粉樣蛋白(SAA)、D二聚體和CA724指標(biāo)的變化對(duì)結(jié)直腸癌患者腫瘤轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)、評(píng)估。方法…選擇結(jié)直腸癌患者58例及良性疾病患者55例，于術(shù)前采血并檢測(cè)SAA、血漿D二聚體和CA724的水平，隨后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。另外，結(jié)直腸癌患者組內(nèi)按照術(shù)后病理分期（AJCC/UICC）分為無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組、有區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組，對(duì)3組間SAA、D二聚體、CA724進(jìn)行比較。結(jié)果…結(jié)直腸癌患者的SAA、D二聚體、CA724水平較對(duì)照組顯著升高（P＜0.05） 。SAA在結(jié)直腸癌患者無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組、有區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；CA724在無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組、有區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在結(jié)直腸癌患者的各亞組中，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組的SAA、D二聚體水平明顯高于有區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組、無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組（P＜0.05）。結(jié)論…檢測(cè)血液SAA、CA724及D二聚體水平對(duì)篩選結(jié)直腸癌患者區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移可能有一定的指導(dǎo)意義。

結(jié)直腸癌；血清淀粉樣蛋白；D二聚體；CA724

血清淀粉樣蛋白A （SAA）是一組多形性蛋白，產(chǎn)生于同一基因編碼，分子質(zhì)量約12 ku。SAA大多數(shù)由肝細(xì)胞產(chǎn)生，只有少數(shù)產(chǎn)生于心臟、骨骼肌等肝外組織器官。SAA水平可在腫瘤、炎癥、創(chuàng)傷患者體內(nèi)反應(yīng)性升高至1 000倍[1]。它是脊椎動(dòng)物的急性反應(yīng)蛋白之一[2]。D二聚體作為纖維蛋白單體的降解產(chǎn)物，其高表達(dá)可特異性地反映出增多的凝血酶和繼發(fā)性增強(qiáng)的纖溶活性，這一過(guò)程代表著激活了患者機(jī)體內(nèi)凝血和纖溶的雙重系統(tǒng)[3]。在消化道腫瘤、卵巢腫瘤、乳腺腫瘤、肺部腫瘤、胰腺腫瘤患者體內(nèi)可檢測(cè)出CA724，其分子質(zhì)量大于200 ku，這是一種黏蛋白型腫瘤標(biāo)志物，也是一種廣譜糖類(lèi)蛋白腫瘤標(biāo)志物。采用SAA 、D二聚體和CA724水平檢測(cè)，前瞻性探討結(jié)直腸癌患者上述指標(biāo)的水平變化以及其與結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系，從而確定凝血指標(biāo)結(jié)合炎性介質(zhì)因子預(yù)測(cè)結(jié)直腸癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的臨床價(jià)值，將研究結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1．1 臨床資料選取

結(jié)直腸癌組：研究納入2010年6月至2012年6月就診于河北大學(xué)附屬醫(yī)院普外科及腫瘤科住院治療的結(jié)直腸癌患者，病例共58例，其中男性占30例，女性占28例，年齡28～76歲，中位年齡61 歲。同時(shí)選擇對(duì)照組：55例，男28例，女27例，年齡26～65歲，中位年齡 51 歲，均為河北大學(xué)附屬醫(yī)院體檢中心體檢的健康者。采血前1周無(wú)服藥史，排除血液高凝狀態(tài)疾病。所有結(jié)直腸癌患者治療中，手術(shù)方案根據(jù)結(jié)直腸癌手術(shù)方式分為根治性結(jié)直腸癌手術(shù)和姑息性結(jié)直腸癌手術(shù)，經(jīng)病理細(xì)胞學(xué)檢查證實(shí)為惡性腫瘤。根據(jù)病理及影像學(xué)檢查結(jié)果，所有結(jié)直腸癌患者分為：無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組、有區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組。排除標(biāo)準(zhǔn)：潰瘍病史患者；具有明確體征的心血管、血栓或外周血管疾病的患者；1個(gè)月內(nèi)有感染、創(chuàng)傷的患者；長(zhǎng)期口服或腸外應(yīng)用抗凝藥物者。

1.2 標(biāo)本采集及檢測(cè)

1.2.1 SAA檢測(cè)

儀器和試劑產(chǎn)自德靈公司，測(cè)定方法采用免疫定時(shí)散射比濁法。所有入組患者于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下，抽取靜脈血3 mL，將靜脈血置于促凝管中，在室溫下將標(biāo)本凝固2 h，在4℃下，以3 000 r/min的標(biāo)準(zhǔn)，將標(biāo)本離心10 min后，取出標(biāo)本，將離心半徑設(shè)定為15 cm。分離出標(biāo)本血清，使用試劑盒嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。同步，采集患者靜脈血送臨床血液檢驗(yàn)室行血細(xì)胞分析檢測(cè)，用以排除感染。

1.2.2 D二聚體檢測(cè)

選用枸櫞酸鈉抗凝管，真空采血管內(nèi)含有0.3 mL固定量的抗凝劑，配比量按照采血量∶枸櫞酸鈉＝9∶1，真空采血管為負(fù)壓，可保證從受檢者血管采血2.7 mL。以此方法分別采集惡性腫瘤組清晨空腹靜脈血與健康組清晨空腹靜脈血備用，2 h內(nèi)由全自動(dòng)止血、凝血分析儀完成測(cè)定。

1.2.3 CA724檢測(cè)

儀器和試劑均由羅氏公司提供，測(cè)定方法采用化學(xué)發(fā)光法，所有受檢者均取清晨空腹靜脈血3 mL送檢河北大學(xué)附屬醫(yī)院臨床免疫實(shí)驗(yàn)室測(cè)定血清CA724值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS16.0軟件處理所有數(shù)據(jù)資料。計(jì)量資料以x±s表示。計(jì)數(shù)資料采用t檢驗(yàn)，結(jié)直腸癌患者中D二聚體、SAA、CA724水平分別在各亞組的比較是否具有差異采用方差分析及兩兩比較的方法來(lái)進(jìn)行分析，P＜0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

研究的58例，其中直腸癌35例，結(jié)腸癌23例（2例位于降結(jié)腸，7例位于橫結(jié)腸，11例位于乙狀結(jié)腸，3例位于升結(jié)腸）。50例患者行結(jié)直腸癌根治性手術(shù)，8例患者行結(jié)直腸癌姑息性手術(shù)。術(shù)后病理診斷示12例黏液腺癌，46例腺癌；3例高分化腺癌，19例低分化腺癌，23例中分化腺癌，1例未分化腺癌。無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組31例，有區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組19例，有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組8例。

2.1 結(jié)直腸癌組與對(duì)照組D二聚體、SAA和CA724水平

結(jié)直腸癌患者的SAA、D二聚體、CA724水平較對(duì)照組顯著升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表1。

表1 結(jié)直腸癌組和對(duì)照組D二聚體、SAA、CA724水平比較(

表1 結(jié)直腸癌組和對(duì)照組D二聚體、SAA、CA724水平比較(

?

2.2 D二聚體、SAA和CA724在不同亞組水平

SAA水平及D二聚體在結(jié)直腸癌患者無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組、有區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；在結(jié)直腸癌患者的各亞組中，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組的SAA、D二聚體水平明顯高于有區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組、無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組（P＜0.05）；CA724在無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組、有區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表 2。

表2 不同分組間D二聚體、SAA、CA724水平比較()

表2 不同分組間D二聚體、SAA、CA724水平比較()

與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組比較，@t=2.51，P＜0.05；@@t=2.36，P＜0.05；#t=2.46，P＜0.05；##t=2.41，P＜0.05。

?

3 討 論

SAA是一種急性期蛋白，其主要由肝臟細(xì)胞中APP的基因轉(zhuǎn)錄合成。目前多種研究顯示SAA也可協(xié)助于惡性腫瘤的診治。Gutfeld等[4]研究顯示，SAA在結(jié)腸腺癌與腺瘤組織中濃度升高，尤其在局部浸潤(rùn)的癌組織中高表達(dá)。有研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤的進(jìn)展與轉(zhuǎn)移可能和炎癥反應(yīng)相關(guān)，為應(yīng)用SAA等炎性介質(zhì)對(duì)結(jié)直腸癌進(jìn)行術(shù)前評(píng)估提供了理論依據(jù)[5]。汪曉東等[6]報(bào)道SAA與結(jié)直腸癌局部進(jìn)展和轉(zhuǎn)移相關(guān)，并濃度隨病情進(jìn)展逐漸升高。Glojnaric等[7]的研究顯示，80%～100%的結(jié)直腸癌患者血清SAA 濃度升高，且SAA在進(jìn)行相關(guān)干預(yù)措施后無(wú)法降至正常水平，提示SAA可作為結(jié)直腸癌隨訪的臨床檢測(cè)指標(biāo)。本研究中，結(jié)直腸癌患者SAA水平較對(duì)照組明顯升高；而且，在結(jié)直腸癌人群中，SAA水平在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組呈高表達(dá)。與上述文獻(xiàn)結(jié)果一致。

惡性腫瘤尤其是晚期患者表現(xiàn)出凝血功能異常，其血液呈現(xiàn)高凝、易栓狀態(tài)，此狀態(tài)恰有利于腫瘤生長(zhǎng)中的血管再生。D二聚體是纖維蛋白單體的一種特異性交聯(lián)蛋白產(chǎn)物，當(dāng)患者體內(nèi)繼發(fā)性纖溶活性增強(qiáng)，其濃度升高。惡性腫瘤細(xì)胞基質(zhì)中的穩(wěn)定骨架構(gòu)成是由交聯(lián)的纖維蛋白完成的，進(jìn)一步可促進(jìn)惡性腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞的生成，為腫瘤細(xì)胞遷移、擴(kuò)散創(chuàng)造有利條件。有研究表明，D二聚體水平與腫瘤生成、腫瘤轉(zhuǎn)移、進(jìn)展密切相關(guān)[8]。本研究中，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組的D二聚體水平顯著高于無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組、有區(qū)域淋巴結(jié)及無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組。也就間接證明了此期腫瘤生長(zhǎng)的加劇。有研究報(bào)道[9]顯示：腫瘤轉(zhuǎn)移患者中，肝臟轉(zhuǎn)移患者的D二聚體水平升高最為顯著，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組次之，但皮膚等軟組織轉(zhuǎn)移患者該指標(biāo)無(wú)明顯升高。Masatoshi等[10]的研究顯示，結(jié)直腸癌患者體內(nèi)D二聚體表達(dá)與腫瘤的浸潤(rùn)深度、淋巴轉(zhuǎn)移、血管侵犯、肝臟轉(zhuǎn)移等有密切相關(guān)，證實(shí)結(jié)直腸癌患者D二聚體的表達(dá)與腫瘤分期正相關(guān)性。

CA724是一種糖鏈抗原，屬于黏蛋白類(lèi)癌胚抗原，不存在于正常組織、滲液及良性腫瘤中，常協(xié)助于消化系統(tǒng)惡性腫瘤的診治。有研究[11]報(bào)道，對(duì)胃腸癌的特異性為96.2%，且與腫瘤的浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。但也有研究[12]顯示，CA724已作為腫瘤標(biāo)志物被廣泛應(yīng)用于結(jié)直腸癌的診斷和隨訪，但由于其敏感度和特異度均不高而限制其臨床應(yīng)用。本研究結(jié)果顯示，CA724在結(jié)直腸癌體內(nèi)水平高表達(dá)，但在不同分期中表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，此結(jié)論與汪曉東等[6]研究結(jié)果一致。

對(duì)于術(shù)前患者，臨床常選用增強(qiáng)CT、MRI和腔內(nèi)超聲進(jìn)行新輔助治療患者的評(píng)估及篩選，腔內(nèi)超聲對(duì)腫瘤浸潤(rùn)深度的診斷價(jià)值高，CT對(duì)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移具優(yōu)勢(shì)，但兩者對(duì)局部淋巴結(jié)浸潤(rùn)的準(zhǔn)確度表現(xiàn)均不佳，對(duì)臨床分期造成一定影響，而PET-CT因費(fèi)用昂貴，并不為腫瘤患者普遍接受。臨床治療中，新輔助化療可以降低結(jié)直腸癌患者的局部復(fù)發(fā)率、提高遠(yuǎn)期生存率及保肛率[13]。但對(duì)于如何篩選患者從而制定個(gè)體化治療，存在一定困難。本文研究通過(guò)對(duì)血液SAA、D二聚體檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，其水平高低可以反映淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，對(duì)結(jié)直腸癌患者術(shù)前分期評(píng)估，提供了新的思路，但對(duì)其參考值設(shè)定尚需大量的臨床研究。因此，血液SAA、D二聚體、CA724水平可作為結(jié)直腸癌的篩查指標(biāo)，并且SAA及D二聚體水平對(duì)篩選結(jié)直腸癌患者區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有一定的臨床指導(dǎo)意義。

[1] KOHNO N, AKIYAMA M, KYOIZUMI S, et al. New serum indicator of activity of interstitial pneumonitis: Sialylated carbohydrate antigen KL-6[J]. Chest, 1989, 96(1): 68-73.

[2] CHEN Y, HYRIEN O, WILLIAMS J, et al. Interleukin(IL)-1A and IL-6: applications to the predictive diagnostic testing of radiation pneumonitis[J]. Int J Radiat Oncol Biol Phys, 2005, 62: 260-266.

[3] TSENG C S, LO H W, CHEN P H, et al. Clinical significance of plasma D-dimer levels and serum VEGF levels in patients with hepatocellular carcincma[J]. Hepatogastroenterology, 2004, 51(59): 1454-1458.

[4] GUTFELD O, PRUS D, ACKERMAN Z, et al. Expression of serum amyloid A, in normal, dyspl astic, and neoplastic human colonicmucosa: implication for a role in colonic tumorigenesis[J]. J Histochem Cytochem, 2006, 54(1): 63-73．

[5] MAZHAR D, NGAN S. C-reactive protein and colorecta1 cancer [J]. QJM, 2006, 99(8): 555-559．

[6] 汪曉東, 高命, 呂東吳, 等. 炎性介質(zhì) CRP 和 SAA 與腫瘤標(biāo)記物 CEA、CA19-9 和 CA724 術(shù)前聯(lián)合評(píng)估結(jié)直腸癌[J]. 臨床腫瘤學(xué)雜志, 2009, 14(4): 336 -340．

[7] GLOJNARIC I, CASL M T, SIMIC D, et al．Serum amyloid A(SAA)in colorectal carcinoma [J]. Clin Chem Lab Med, 2001, 39(2): 129-133．

[8] 張麗中, 趙智, 吳濱. 惡性腫瘤患者血漿纖維蛋白原和 D-二聚體含量的測(cè)定及其臨床意義[J]. 腫瘤研究與臨床, 2006, 18(11): 759-760.

[9] 胡玲, 楊華, 蘇雷, 等. 180 例惡性腫瘤病人血液高凝狀態(tài)的臨床研究[J]. 醫(yī)學(xué)研究與教育, 2010, 27(5): 30-32.

[10] MASATOSHI O, YOSHITAKE A, TAKASHI O, et al. High preoperative plasma D-dimer level is associtated with advanced tumor and short sur. vival after curative resection in patients with colorectal cancer[J]. Jpn J Clin Oncol, 2001, 31(8): 388.

[11] 鐘善傳, 劉滌睱, 涂暉, 等. IL-6、CEA、CA19-9 和 CA72-4 對(duì)胃癌的診斷價(jià)值[J]. 標(biāo)記免疫分析與臨床, 2010, 18(4): 235-238.

[12] YCHOU M, DUFF0UR J, KRAMAR A, et al. Clinical significance and prognostic value of CA724 compared with CEA and CA199 in patients with gastric cancer[J]. Disease Markers, 2000, 16: 105-110．

[13] 汪曉東, 李亞倫, 邱萌, 等. 多學(xué)科協(xié)作診治模式下新輔助化療對(duì)直腸癌手術(shù)的影響[J]. 中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志, 2008, 15(2): 136-139．

（責(zé)任編輯：高艷華）

The changes of serum amyloid A (SAA), plasma D-dimer and tumer marker CA724 for predicting tumor metastasis of patients with colorectal cancer

HU Ling1, SU Lei1, SHANG Yanhong1, WANG Zhiyu1, LI Xiaofang1, JIAO Jin1, CHEN Chunyan2
(1. Medical Oncology, Affiliated Hospital of Hebei University, Baoding 071000, China; 2. The Hospital of Anguo, Anguo 071200, China)

Objective To explore the changes of serum amyloid A (SAA), plasma D-dimer and tumer marker CA724 for predicting tumor metastasis of patients with colorectal cancer. Methods Preoperative SAA, D-dimer and CA724 were measured in 58 patients with colorectal and 55 patients with benign disease, and they were analyzed with statistics method. In addition, according to pathological TNM (AJCC/UICC TNM), the patients with colorectal were divided into no metastasis group, regional lymph node metastasis group and distant metastasis group for comparing SAA, D-dimer and CA724 between groups. Results SAA, D-dimer and CA724 levels were significantly higher in patients with colorectal carcinoma than those with benign diseases (P＜0.05). SAA test showed that there was statistical significance between no metastasis group, regional lymph node metastasis group and distant metastasis group, and there was no statisticalsignificance by CA724. SAA and D-dimer levels in distant metastasis group were obviously higher than that of no metastasis group and regional lymph node metastasis group (P＜0.05). Conclusion There is guiding significance for confirming regional lymph node metastasis and distant metastasis in patients with colorectal to detect SAA CA724 and D-dimer levels.

colon carcinoma and rectal carcinoma; serum amyloid A; CA724 antigen; D-dimer

R73

A

1674-490X(2014)01-0017-04

2013-04-16

胡玲（1980—），女，河北保定人，主治醫(yī)師，碩士，主要從事腫瘤學(xué)研究。E-mail: huling80hl@sohu.com