晉月萍，蘇雪梅

他汀類(lèi)藥物是目前臨床最常用的調(diào)脂藥物，通過(guò)抑制膽固醇合成過(guò)程中的限速酶3－羥基－3－甲基戊二酰輔酶A（HMG－CoA）還原酶，而發(fā)揮其強(qiáng)大的調(diào)脂作用。瑞舒伐他汀可對(duì)心血管系統(tǒng)發(fā)揮有益影響［1］。瑞舒伐他汀具有抵制心肌梗死后心臟重構(gòu)，改善左室功能的作用［2］，改善冠狀動(dòng)脈血流緩慢的糖尿病患者冠狀動(dòng)脈血流儲(chǔ)備［3］?？梢允鎻埓笫箅x體主動(dòng)脈［4，5］，那么瑞舒伐他汀是否有可能通過(guò)舒張冠狀動(dòng)脈，增加冠脈血流呢？目前有關(guān)瑞舒伐他汀對(duì)冠狀動(dòng)脈作用如何還未見(jiàn)報(bào)道。因此，本研究通過(guò)離體血管張力實(shí)驗(yàn)觀察瑞舒伐他汀對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈的作用及其可能的機(jī)制，為瑞舒伐他汀在臨床治療中的合理應(yīng)用提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 雄性Wistar大鼠，由山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)為醫(yī)動(dòng)字第070102。

1.2 試劑 瑞舒伐他汀，L－NAME，iberiotoxin，格列本脲，4－氨基吡啶和氯化鋇購(gòu)自Sigma公司；其余試劑均為國(guó)產(chǎn)試劑純。1.2 生理性營(yíng)養(yǎng)液 正常生理鹽營(yíng)養(yǎng)液（PSS）成分為：NaCl 144mmol／L，KCl 5.8mmol／L，MgCl21.2mmol／L，CaCl22.5 mmol／L，Glucose 11.1mmol／L，HEPES 5。上述營(yíng)養(yǎng)液均用1 mmol／L NaOH 將pH 值調(diào)至7.4，預(yù)熱至37℃。實(shí)驗(yàn)中所述濃度均為浴管內(nèi)試劑的終濃度。

1.3 離體大鼠腎動(dòng)脈血管環(huán)的制備 大鼠擊頭致暈后，立即取出腎臟，浸入4 ℃的PSS液中。冠狀動(dòng)脈血管環(huán)的制備：用大頭針?lè)謩e固定心臟的心尖端和升主動(dòng)脈端于平皿，在左心耳下面尋找冠狀動(dòng)脈，順著冠狀動(dòng)脈的走向鈍性分離，在前降支處剪取2mm 的血管環(huán)。將兩根直徑為40μm 的鎢絲穿入管腔，固定血管環(huán)在Multi Myograph System－610M 浴槽內(nèi)傳感器上，浴槽內(nèi)含有溫度控制在37 ℃，持續(xù)通以100%O2的PSS 5 mL。標(biāo)本平衡穩(wěn)定60 min 后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)，平衡期間每隔15 min 用37℃預(yù)熱的新鮮PSS更換浴槽內(nèi)液體一次。血管環(huán)的張力變化通過(guò)DMT 換能系統(tǒng)采集，并用Chart 5.3生物信號(hào)采集分析軟件記錄在計(jì)算機(jī)上。

1.4 瑞舒伐他汀對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈的舒張作用 在基礎(chǔ)狀態(tài)下，向浴槽內(nèi)加入苯腎上腺素（Phe，10－5mmol／L）。待血管環(huán)收縮穩(wěn)定，達(dá)到平臺(tái)后，向浴槽內(nèi)累積加入瑞舒伐他汀（10－7mmol／L～3×10－5mmol／L），使其在浴槽中的終濃度0.5個(gè)對(duì)數(shù)級(jí)倍增高，建立瑞舒伐他汀的累積對(duì)數(shù)濃度反應(yīng)曲線（LCCRC），觀察瑞舒伐他汀對(duì)Wistar大鼠冠狀動(dòng)脈的舒張作用。

1.5 L－NAME和鉀通道阻斷劑對(duì)瑞舒伐他汀引起大鼠冠狀動(dòng)脈舒張的影響 在基礎(chǔ)狀態(tài)下，向浴槽內(nèi)加入苯腎上腺素（10－5mmol／L）。待血管環(huán)收縮穩(wěn)定，達(dá)到平臺(tái)后，向浴槽內(nèi)加入一氧化氮合酶（NOS）抑制劑L－NAME（100μmol／L）和不同鉀通道阻斷劑：iberiotoxin（100nmol／L），格列本脲（glibenclamide，0.1 mmol／L），4－氨 基 吡 啶（4－aminopyridine，1 mmol／L）和 氯 化 鋇（BaCl2，1mmol／L）。血管環(huán)活動(dòng)再次達(dá)到平臺(tái)后，向浴槽內(nèi)累積加 入 瑞 舒 伐 他 ?。?0－7mmol／L～10－5mmol／L），觀 察LNAME和不同鉀通道阻斷劑對(duì)瑞舒伐他汀引起大鼠冠狀動(dòng)脈舒張作用的影響。

2 結(jié) 果

2.1 瑞舒伐他汀對(duì)離體大鼠冠狀動(dòng)脈的舒張作用 瑞舒伐他汀可濃度依賴性舒張苯腎上腺素預(yù)收縮的大鼠離體冠狀動(dòng)脈，其最大舒張效應(yīng)可達(dá)（64.31±3.44）%，見(jiàn)圖1。

2.2 L－NAME對(duì)瑞舒伐他汀舒張離體大鼠冠狀動(dòng)脈的影響

瑞舒伐他汀對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈的舒張作用可被NOS抑制劑L－NAME顯著抑制（P＜0.05，見(jiàn)圖1）。

圖1 L－NAME對(duì)瑞舒伐他汀舒張大鼠離體冠狀動(dòng)脈的影響

2.3 鉀通道阻斷劑對(duì)瑞舒伐他汀舒張離體大鼠冠狀動(dòng)脈的影響 為了觀察K＋通道是否參與瑞舒伐他汀的舒血管作用，使用不同亞型K＋通道阻斷劑：iberiotoxin（100nmol／L），格列本脲（0.1 mmol／L），4－氨基吡啶（1 mmol／L）和氯化鋇（BaCl2，1 mmol／L）。在此濃度，這些藥物分別可以特異性阻斷KCa通道，KATP通道，KV 通道及KIR 通道。結(jié)果顯示，iberiotoxin，格列本脲，4－氨基吡啶和BaCl2均可抑制瑞舒伐他汀對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈的舒張作用（P＜0.05，見(jiàn)圖2）。

圖2 鉀通道阻斷劑對(duì)瑞舒伐他汀舒張大鼠離體冠狀動(dòng)脈的影響

3 討 論

他汀類(lèi)藥物瑞舒伐他汀有直接的降壓作用［4］，并可舒張大鼠主動(dòng)脈［5，6］。而本研究結(jié)果顯示，瑞舒伐他汀還可舒張大鼠冠狀動(dòng)脈，并且其舒張作用與NO 及鉀通道有關(guān)。瑞舒伐他汀對(duì)離體冠狀動(dòng)脈的直接作用是舒張，且具有濃度依賴性。在沒(méi)有冠狀動(dòng)脈大血管病變的前提下，瑞舒伐他汀有可能通過(guò)調(diào)節(jié)冠狀動(dòng)脈微血管，改善冠狀動(dòng)脈血流量，增加心肌供血供氧。

NO 是體內(nèi)重要的舒血管物質(zhì)。NO 在內(nèi)皮NOS的作用下由左旋精氨酸轉(zhuǎn)化而來(lái)，通過(guò)激活鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶，增加環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷（cGMP）含量，抑制細(xì)胞外Ca2＋內(nèi)流和抑制細(xì)胞內(nèi)Ca2＋釋放而使平滑肌舒張。許多藥物通過(guò)增加血管內(nèi)皮細(xì)胞NO 生成發(fā)揮舒血管作用［7］。本實(shí)驗(yàn)利用NOS抑制劑L－NAME，觀察瑞舒伐他汀舒張冠狀動(dòng)脈與NO 的關(guān)系。結(jié)果表明，瑞舒伐他汀對(duì)冠狀動(dòng)脈的舒張作用可被L－NAME明顯抑制，說(shuō)明瑞舒伐他汀對(duì)冠狀動(dòng)脈的舒張作用是NO 依賴的。

K＋通道在血管平滑肌上分布廣泛，是調(diào)節(jié)血管平滑肌張力的重要機(jī)制之一。K＋通道活性的改變可使動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞膜電位去極化或超極化，是參與動(dòng)脈血管舒縮調(diào)節(jié)的重要機(jī)制［8］。目前認(rèn)為血管平滑肌細(xì)胞上主要有四種K＋通道：①電壓依賴性鉀通道：膜去極化時(shí)活性升高，為平滑肌細(xì)胞膜電位的重要調(diào)節(jié)因素；②鈣激活鉀通道：與Ca2＋內(nèi)流相關(guān)，可調(diào)節(jié)膜電位，與小動(dòng)脈張力關(guān)系密切；③內(nèi)向整流鉀通道：調(diào)節(jié)多種類(lèi)型阻力血管平滑肌細(xì)胞的膜電位，與外部鉀誘導(dǎo)的血管舒張有關(guān)；④ATP 敏感性鉀通道（KATP）：與細(xì)胞代謝的變化相關(guān)，是多種藥物和內(nèi)源性血管活性物質(zhì)的作用靶點(diǎn)。4－氨基吡啶，iberiotoxin，BaCl2和格列本脲分別為它們的特異抑制劑。K＋通道開(kāi)放，K＋外流，細(xì)胞膜超極化，血管平滑肌張力下降，血管舒張。很多體內(nèi)主要的血管活性物質(zhì)、藥物可通過(guò)影響K＋通道而改變血管平滑肌張力［9］。K＋通道可能介導(dǎo)瑞舒伐他汀的舒血管作用。本研究采用離體血管張力實(shí)驗(yàn)探討不同鉀通道是否參與瑞舒伐他汀對(duì)冠狀動(dòng)脈的舒張作用。結(jié)果顯示，iberiotoxin（100 nmol／L）、格列本脲（0.1 mmol／L）、4－氨基吡啶（1 mmol／L）和BaCl2（1mmol／L）均可明顯抑制瑞舒伐他汀對(duì)腎動(dòng)脈的舒張作用。KATP通道、KCa通道、KV 通道、Kir通道可能與瑞舒伐他汀對(duì)冠狀動(dòng)脈的舒張作用有關(guān)。瑞舒伐他汀可舒張大鼠離體冠狀動(dòng)脈，其舒張作用可能與NO 和K＋通道有關(guān)。

［1］ 葉瑛，賈楠.瑞舒伐他汀的臨床研究進(jìn)展［J］.中國(guó)新藥與臨床雜志，2010，29（11）：813－816.

［2］ 張?zhí)m芳，王占啟，王艷飛，等.不同劑量瑞舒伐他汀對(duì)急性心肌梗死未行經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入術(shù)患者心室重構(gòu)影響的對(duì)比研究［J］.中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2011，14（35）：4064－4066.

［3］ 王芳，吳紅玲，黃鎮(zhèn)河，等.瑞舒伐他汀對(duì)冠狀動(dòng)脈血流緩慢的糖尿病患者冠狀動(dòng)脈血流儲(chǔ)備的影響［J］.中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2012，9（4）：46－48.

［4］ 陳林祥，余澤洪，容永怡，等.瑞舒伐他汀對(duì)高血壓患者的降壓作用［J］.中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志，2012，20（5）：460－462.

［5］ Ana Cecilia PP，Victor Manuel PA，Isabel WF，et al.Mechanism of the relaxant effect of rosuvastatin lactone on rat aortic rings［J］.Front Biosci（Elite Ed），2012，4：1787－1794.

［6］ López J，Mendoza R，Cleva Villanueva G，et al.Participation of K＋channels in the endothelium－dependent and endothelium－independent components of the relaxant effect of rosuvastatin in rat aortic rings［J］.J Cardiovasc Pharmacol Ther，2008，13（3）：207－213.

［7］ Friebe A，Koesling D.Regulation of nitric oxide－sensitive guanylyl cyclase［J］.Circ Res，2003，93（2）：96－105.

［8］ Nelson MT，Quayle JM.Physiological roles and properties of potassium channels in arterial smooth muscle［J］.Am J Physiol，1995，268（4Pt 1）：C799－C822.

［9］ Cairrao E，Alvarez E，Santos－Silva AJ，et al.Potassium channels are involved in testosterone－induced vasorelaxation of human umbilical artery［J］.Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol，2008，376（5）：375－383.