劉 曼 張明諫 李小兵 劉光晶 王玉亮 張 建 劉 寧

1，25-二羥維生素D3對(duì)嚴(yán)重燙傷小鼠應(yīng)激反應(yīng)的影響

劉 曼1張明諫2△李小兵2劉光晶2王玉亮3張 建1劉 寧2

目的 探討1，25-二羥維生素D3[1，25-(OH)2VitD3]對(duì)嚴(yán)重燙傷小鼠應(yīng)激狀態(tài)下胰島素抵抗和炎癥反應(yīng)的影響。方法130只小鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為健康組10只，實(shí)驗(yàn)組Ⅰ、實(shí)驗(yàn)組Ⅱ、對(duì)照組各40只。實(shí)驗(yàn)組Ⅰ、實(shí)驗(yàn)組Ⅱ和對(duì)照組制成30%全身體表面積（TBSA）Ⅲ度燙傷模型。每隔1日晨8時(shí)，實(shí)驗(yàn)組Ⅰ小鼠1，25-(OH)2VitD31 μg· kg-1+0.6 mL花生油灌胃；實(shí)驗(yàn)組Ⅱ1，25-(OH)2VitD34 μg·kg-1+0.6 mL花生油灌胃；對(duì)照組0.6 mL花生油灌胃。分別于傷后1、3、7、14 d測(cè)空腹血糖（FBG）、空腹胰島素（FIns）、血清腫瘤壞死因子（TNF）-α濃度和創(chuàng)面組織核因子（NF）-κB陽(yáng)性率。結(jié)果（1）實(shí)驗(yàn)組Ⅰ、實(shí)驗(yàn)組Ⅱ和對(duì)照組各時(shí)點(diǎn)胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）、血清TNF-α水平和創(chuàng)面組織NF-κB表達(dá)陽(yáng)性率均數(shù)均高于健康組水平。（2）實(shí)驗(yàn)組Ⅰ和實(shí)驗(yàn)組Ⅱ傷后同一時(shí)點(diǎn)HOMA-IR均低于對(duì)照組，且實(shí)驗(yàn)組Ⅱ低于實(shí)驗(yàn)組Ⅰ（P＜0.05）；同一組內(nèi)不同時(shí)點(diǎn)傷后第3天HOMA-IR均數(shù)最高，以后逐漸降低（P＜0.05）。（3）實(shí)驗(yàn)組Ⅰ和實(shí)驗(yàn)組Ⅱ傷后同一時(shí)點(diǎn)血清TNF-α水平、創(chuàng)面組織NF-κB表達(dá)陽(yáng)性率均低于對(duì)照組，且實(shí)驗(yàn)組Ⅱ低于實(shí)驗(yàn)組Ⅰ（P＜0.05）；同一組內(nèi)不同時(shí)點(diǎn)血清TNF-α水平、創(chuàng)面組織NF-κB表達(dá)陽(yáng)性率均逐漸降低（P＜0.05）。結(jié)論1，25-(OH)2VitD3能夠減輕嚴(yán)重燙傷小鼠應(yīng)激狀態(tài)下胰島素抵抗作用和炎癥反應(yīng)。

骨化三醇；燒傷；胰島素抵抗；腫瘤壞死因子-α；NF-κB；小鼠；1，25-二羥維生素D3

嚴(yán)重?zé)齻髾C(jī)體產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，常有糖代謝紊亂和胰島素抵抗（insulin resistance，IR）。同時(shí)，機(jī)體發(fā)生炎癥反應(yīng)生成大量腫瘤壞死因子（TNF）-α，TNF-α可間接激活核因子(NF)-κB，NF-κB激活后又促進(jìn)TNF-α的表達(dá)與釋放[1]。有文獻(xiàn)報(bào)道，血清TNF-α水平和胰島素抵抗程度呈正相關(guān)[2]。1，25-二羥維生素D3[1，25-(OH)2VitD3]可調(diào)節(jié)鈣磷代謝，還有改善胰島素抵抗和抗炎等作用[3-4]。本研究通過觀察1，25-(OH)2VitD3對(duì)嚴(yán)重燙傷小鼠胰島素抵抗指數(shù)、血清TNF-α濃度和創(chuàng)面組織NF-κB表達(dá)的影響，探討1，25-(OH)2VitD3對(duì)嚴(yán)重燙傷小鼠傷后應(yīng)激反應(yīng)的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要試劑和儀器 1，25-(OH)2VitD3（Sigma公司，美國(guó)），花生油（Spectrum公司，美國(guó)），磺胺嘧啶銀霜（上海江萊生物科技有限公司）；化學(xué)發(fā)光法胰島素定量檢測(cè)試劑盒（北京北方生物試劑研究所）；小鼠TNF-α ELISA檢測(cè)試劑盒（RayBiotech公司，美國(guó)）；兔抗小鼠NF-κB p50多克隆抗體（南京川博生物技術(shù)有限公司），羊抗鼠/兔二抗檢測(cè)試劑盒、DAB顯色試劑盒（上海太陽(yáng)生物公司），三諾安穩(wěn)血糖儀、血糖試紙（長(zhǎng)沙三諾生物傳感技術(shù)有限公司）。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)小鼠分組 選擇健康SPF級(jí)KM小鼠130只（軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心），雌雄各半，體質(zhì)量28～32 g，鼠齡6～8周。按隨機(jī)數(shù)字表法將小鼠分成4組，健康組（不燙傷）10只，實(shí)驗(yàn)組Ⅰ（燙傷后用藥）、實(shí)驗(yàn)組Ⅱ（燙傷后用藥）和對(duì)照組（燙傷后不用藥）各40只。分籠飼養(yǎng)各組，常規(guī)動(dòng)物飼料喂食。

1.1.3 燙傷模型的建立 適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，實(shí)驗(yàn)組Ⅰ、實(shí)驗(yàn)組Ⅱ和對(duì)照組小鼠背部用6%Na2S脫毛，腹腔注射4%水合氯醛（40 mg·kg-1）麻醉，麻醉成功后脫毛區(qū)置于100℃熱水12 s，制成30%全身體表面積（TBSA）Ⅲ度燙傷模型（病理切片證實(shí)）。傷后立即腹腔注射2 mL·kg-11%TBSA乳酸鈉林格液復(fù)蘇，傷后第2天給予半量。創(chuàng)面涂抹2%磺胺嘧啶銀霜抗感染1次/d。

1.1.4 藥物干預(yù)方法 每隔1日晨8時(shí)，給予實(shí)驗(yàn)組Ⅰ小鼠1，25-(OH)2VitD31 μg·kg-1+0.6 mL花生油灌胃，給予實(shí)驗(yàn)組Ⅱ小鼠1，25-(OH)2VitD34 μg·kg-1+0.6 mL花生油灌胃，給予對(duì)照組小鼠0.6 mL花生油灌胃。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 標(biāo)本的采集和制備 小鼠禁食過夜，于晨8時(shí)斷頭處死后取血。健康組小鼠一次處死，實(shí)驗(yàn)組Ⅰ、實(shí)驗(yàn)組Ⅱ和對(duì)照組小鼠分別于燙傷后1、3、7、14 d各處死10只。小鼠血液離心后收集0.8 mL血清置-80℃保存。同時(shí)取創(chuàng)面組織1.0 cm×1.0 cm，用10%中性福爾馬林液保存。

1.2.2 空腹血糖（FBG）和空腹胰島素（FIns）水平測(cè)定 每次采血時(shí)用血糖儀即時(shí)測(cè)FBG。用化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)血清FIns水平。

1.2.3 胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）的計(jì)算 用穩(wěn)態(tài)模式法（HOMA）計(jì)算HOMA-IR，公式為：HOMA-IR=FBG(mmol/L)× FIns(mU/L)/22.5。

1.2.4 小鼠血清TNF-α的水平測(cè)定 取出-80℃保存的血清標(biāo)本于常溫放置30 min后，用小鼠TNF-α ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)小鼠血清TNF-α的濃度。

1.2.5 免疫組織化學(xué)法測(cè)創(chuàng)面組織NF-κB陽(yáng)性率 創(chuàng)面組織標(biāo)本常規(guī)石蠟包埋切片，免疫組化試劑盒染色。NF-κB陽(yáng)性呈棕黃色顆粒，主要在細(xì)胞漿和（或）細(xì)胞核中表達(dá)。高倍鏡下（×400倍）隨機(jī)讀取5個(gè)不同的視野，計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞及陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，創(chuàng)面組織NF-κB陽(yáng)性率（%）=陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)×100%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS 18.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)和處理。計(jì)量資料均以±s表示，采用單因素方差分析（ANOVA），組間多重比較用LSD-t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組實(shí)驗(yàn)小鼠不同時(shí)點(diǎn)HOMA-IR值的比較 健康組小鼠HOMA-IR均數(shù)為4.75±0.48。實(shí)驗(yàn)組Ⅰ、實(shí)驗(yàn)組Ⅱ和對(duì)照組小鼠傷后不同時(shí)點(diǎn)HOMAIR均數(shù)均高于健康組水平（實(shí)驗(yàn)組Ⅱ第14天與健康組比較，P＞0.05，余與健康組比較均P＜0.05）。同一時(shí)點(diǎn)不同組間比較，實(shí)驗(yàn)組Ⅰ和實(shí)驗(yàn)組Ⅱ小鼠傷后HOMA-IR均數(shù)均低于對(duì)照組水平，且實(shí)驗(yàn)組Ⅱ低于實(shí)驗(yàn)組Ⅰ，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表1。同一組不同時(shí)點(diǎn)比較，燙傷小鼠傷后第3天HOMA-IR均數(shù)達(dá)最高，以后逐漸降低；同一組內(nèi)燙傷小鼠傷后不同時(shí)點(diǎn)HOMA-IR比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

Table 1 Comparison of HOMA-IR value in different times between three groups of experimental mice表1 各組實(shí)驗(yàn)小鼠傷后不同時(shí)間HOMA-IR值的比較（n=10±s）

Table 1 Comparison of HOMA-IR value in different times between three groups of experimental mice表1 各組實(shí)驗(yàn)小鼠傷后不同時(shí)間HOMA-IR值的比較（n=10±s）

＊＊P＜0.01；F1：同組不同時(shí)點(diǎn)比較，F(xiàn)2：同一時(shí)點(diǎn)不同組間比較；各組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；表2、3同

組別實(shí)驗(yàn)組Ⅰ實(shí)驗(yàn)組Ⅱ?qū)φ战MF1 29.196＊＊28.476＊＊116.260＊＊F2第1天7.04±0.43 6.03±0.61 10.52±0.56 204.165＊＊第3天7.76±1.04 6.77±0.50 11.32±0.86 105.470＊＊第7天6.03±0.34 5.29±0.47 8.48±0.46 244.276＊＊第14天5.41±0.36 4.80±0.47 6.65±0.51 43.843＊＊

2.2 各組實(shí)驗(yàn)小鼠不同時(shí)點(diǎn)血清TNF-α水平的比較 健康組小鼠血清TNF-α水平為（364.10±46.13）ng/L。實(shí)驗(yàn)組Ⅰ、實(shí)驗(yàn)組Ⅱ和對(duì)照組小鼠傷后不同時(shí)點(diǎn)血清TNF-α水平均數(shù)均高于健康組水平，實(shí)驗(yàn)組Ⅱ小鼠傷后第14天血清TNF-α水平均數(shù)接近于健康組水平（實(shí)驗(yàn)組Ⅱ第14天與健康組比較，P＞0.05；余與健康組比較，P＜0.05）。同一時(shí)點(diǎn)不同組間比較，實(shí)驗(yàn)組Ⅰ和實(shí)驗(yàn)組Ⅱ小鼠傷后血清TNF-α水平均低于對(duì)照組水平，且實(shí)驗(yàn)組Ⅱ低于實(shí)驗(yàn)組Ⅰ；同一時(shí)點(diǎn)各組實(shí)驗(yàn)小鼠傷后血清TNF-α水平兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。同一組不同時(shí)點(diǎn)比較，燙傷小鼠傷后血清TNF-α水平第1天最高，以后逐漸降低；同一組內(nèi)燙傷小鼠傷后不同時(shí)點(diǎn)血清TNF-α水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

Table 2 Comparison of serum TNF-α levels in different times between three groups of experimental mice表2 各組實(shí)驗(yàn)小鼠傷后不同時(shí)間血清TNF-α水平的比較（n=10，ng/L±s）

Table 2 Comparison of serum TNF-α levels in different times between three groups of experimental mice表2 各組實(shí)驗(yàn)小鼠傷后不同時(shí)間血清TNF-α水平的比較（n=10，ng/L±s）

組別實(shí)驗(yàn)組Ⅰ實(shí)驗(yàn)組Ⅱ?qū)φ战MF2第7天602.30±125.90 483.85±84.45 723.30±118.81 11.592＊＊第14天491.40±106.02 377.75±67.77 618.50±156.98 10.751＊＊F1 14.257＊＊25.538＊＊15.381＊＊組別實(shí)驗(yàn)組Ⅰ實(shí)驗(yàn)組Ⅱ?qū)φ战MF2第1天828.15±97.56 717.25±76.90 927.55±45.84 18.938＊＊第3天713.10±148.87 583.45±123.04 829.20±73.55 10.615＊＊

2.3 各組實(shí)驗(yàn)小鼠創(chuàng)面組織NF-κB免疫組織化學(xué)染色結(jié)果 見表3。健康組小鼠皮膚組織NF-κB表達(dá)的陽(yáng)性率為（13.67±6.28）%。實(shí)驗(yàn)組Ⅰ、實(shí)驗(yàn)組Ⅱ和對(duì)照組小鼠傷后不同時(shí)點(diǎn)創(chuàng)面組織NF-κB表達(dá)的陽(yáng)性率均高于健康組水平，實(shí)驗(yàn)組Ⅱ小鼠傷后第7天創(chuàng)面組織NF-κB表達(dá)的陽(yáng)性率接近于健康組水平（實(shí)驗(yàn)組Ⅱ第7天與健康組比較，P＞0.05；余與健康組比較，P＜0.05）。同一時(shí)點(diǎn)不同組間比較，實(shí)驗(yàn)組Ⅰ和實(shí)驗(yàn)組Ⅱ小鼠傷后創(chuàng)面組織NF-κB表達(dá)的陽(yáng)性率均低于對(duì)照組，且實(shí)驗(yàn)組Ⅱ低于實(shí)驗(yàn)組Ⅰ，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。同一組不同時(shí)點(diǎn)比較，燙傷小鼠傷后創(chuàng)面組織NF-κB表達(dá)陽(yáng)性率均為第1天最高，以后逐漸降低；同一組內(nèi)燙傷小鼠傷后不同時(shí)點(diǎn)創(chuàng)面組織NF-κB表達(dá)陽(yáng)性率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。燙傷后3 d各組創(chuàng)面組織NF-κB的表達(dá)情況見圖1。

Table 3 Comparison of the positive expression rate(%) of NF-κB in wound tissues between three groups of experimental mice at different times表3 各組實(shí)驗(yàn)小鼠傷后不同時(shí)間創(chuàng)面組織中NF-κB表達(dá)的陽(yáng)性率比較 （n=10，%±s）

Table 3 Comparison of the positive expression rate(%) of NF-κB in wound tissues between three groups of experimental mice at different times表3 各組實(shí)驗(yàn)小鼠傷后不同時(shí)間創(chuàng)面組織中NF-κB表達(dá)的陽(yáng)性率比較 （n=10，%±s）

組別實(shí)驗(yàn)組Ⅰ實(shí)驗(yàn)組Ⅱ?qū)φ战MF2第1天68.10±12.16 55.02±12.04 79.68±12.10 12.643＊＊第3天53.11±14.01 30.18±9.64 69.49±8.65 32.131＊＊第7天30.13±11.77 15.87±6.28 62.54±12.31 52.076＊＊F1 22.737＊＊42.413＊＊5.977＊＊

Figure 1 The expression of NF-κB in scalded tissue at the 3th day after burn injury（DAB,×400）圖1 燙傷后3 d NF-κB在各組創(chuàng)面組織中的表達(dá)（DAB,×400）

3 討論

嚴(yán)重?zé)齻髾C(jī)體發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)，陳新龍等[5]通過正常血糖高胰島素葡萄糖鉗夾實(shí)驗(yàn)證實(shí)，嚴(yán)重?zé)齻髾C(jī)體處于高分解狀態(tài)，對(duì)胰島素的敏感性下降，組織細(xì)胞糖代謝異常，產(chǎn)生胰島素抵抗。此時(shí)，機(jī)體血糖升高，加重傷后機(jī)體的代謝紊亂，加重創(chuàng)面感染和多器官功能障礙等[6]。燒傷后早期炎癥反應(yīng)也是應(yīng)激反應(yīng)的組成部分。減輕嚴(yán)重?zé)齻笠葝u素抵抗和早期炎癥反應(yīng)可減輕燒傷后機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)。

維生素D主要來(lái)自膳食營(yíng)養(yǎng)，部分由皮膚合成。嚴(yán)重?zé)齻?，膳食攝入量減少限制維生素D的攝入，正常皮膚的毀損影響維生素D的合成。維生素D在體內(nèi)經(jīng)過25-羥基化和1-α羥基化后成為1，25-(OH)2VitD3，從而發(fā)揮其生物學(xué)的作用[7]。1，25-(OH)2VitD3主要作用是維持血清鈣磷濃度的穩(wěn)定，還可調(diào)節(jié)胰島素的敏感性、減輕炎癥反應(yīng)等[3-4]。

1，25-(OH)2VitD3可直接抑制過氧化物酶體增殖物活化受體(PPAR)-γ的表達(dá)，并抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化為脂肪細(xì)胞，從而發(fā)揮其抗脂肪形成的作用；亦能夠直接激活PPAR-δ，調(diào)節(jié)脂肪組織和骨骼肌中的脂肪酸代謝，改善胰島素抵抗[8-9]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，嚴(yán)重燙傷小鼠傷后產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，血糖升高，引起胰島素抵抗，傷后第3天達(dá)高峰，以后逐漸降低。隔日分別給予實(shí)驗(yàn)組Ⅰ和實(shí)驗(yàn)組Ⅱ燙傷小鼠1，25-(OH)2VitD31 μg·kg-1和4 μg·kg-1后，2組傷后HOMA-IR均較對(duì)照組低，且實(shí)驗(yàn)組Ⅱ較實(shí)驗(yàn)組Ⅰ低。表明1，25-(OH)2VitD3可改善嚴(yán)重?zé)齻鸬囊葝u素抵抗反應(yīng)。

巨噬細(xì)胞可產(chǎn)生TNF-α、白細(xì)胞介素（IL）-6及NO等炎性因子，它可表達(dá)維生素D受體（VDR），亦可表達(dá)維生素D-25-羥化酶和1α-羥化酶，能夠催化維生素D成為1，25-(OH)2VitD3，1，25-(OH)2VitD3可抑制炎性因子分泌，從而發(fā)揮抗炎作用[10]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，小鼠血清TNF-α水平和創(chuàng)面組織NF-κB表達(dá)陽(yáng)性率升高。隔日分別給予實(shí)驗(yàn)組Ⅰ和實(shí)驗(yàn)組Ⅱ燙傷小鼠1，25-(OH)2VitD31 μg·kg-1和4 μg· kg-1后，2組傷后血清TNF-α水平和創(chuàng)面組織NF-κB表達(dá)陽(yáng)性率均較對(duì)照組低，且實(shí)驗(yàn)組Ⅱ較實(shí)驗(yàn)組Ⅰ低。嚴(yán)重燙傷后第3天實(shí)驗(yàn)小鼠胰島素抵抗達(dá)高峰，此時(shí)創(chuàng)面組織NF-κB表達(dá)也明顯升高，實(shí)驗(yàn)組Ⅰ和實(shí)驗(yàn)組Ⅱ創(chuàng)面組織NF-κB表達(dá)低于對(duì)照組，且實(shí)驗(yàn)組Ⅱ表達(dá)率低于實(shí)驗(yàn)組Ⅰ，三者均高于健康組水平。表明1，25-(OH)2VitD3可減輕嚴(yán)重?zé)齻蟮难装Y反應(yīng)。維生素D3亦可降低應(yīng)激機(jī)體C-反應(yīng)蛋白（CRP）的水平，從而減輕其激活補(bǔ)體引起的炎性反應(yīng)，進(jìn)而說(shuō)明這一點(diǎn)。

總之，嚴(yán)重燙傷小鼠傷后給予1，25-(OH)2VitD3灌胃可以減輕胰島素抵抗，降低血清TNF-α水平和創(chuàng)面組織NF-κB表達(dá)陽(yáng)性率，提示1，25-(OH)2VitD3可以減輕嚴(yán)重?zé)齻∈髠髴?yīng)激反應(yīng)，1，25-(OH)2VitD3適宜補(bǔ)充劑量有待深入研究。

[1]Baker RG,Hayden MS,Ghosh S.NF-κB,inflammation,and metabolic disease[J].Cell Metabolism,2011,13(1):11-22.doi:10.1016/j. cmet.2010.12.008.

[2]Deng HP,Chai JK.The effects and mechanisms of insulin on systemic inflammatory response and immune cells in severe trauma,burn injury,and sepsis[J].Int Immunopharmacol,2009,9(11):1251-1259. doi:10.1016/j.intimp.2009.07.009.

[3]Chiu KC,Chu A,Go VL,et al.Hypovitaminosis D is associated with insulin resistance and β cell dysfunction[J].The American Journal of Clinical Nutrition,2004,79(5):820-825.

[4]劉佩意，陳相，蔣卓勤，等.早期補(bǔ)充維生素D對(duì)幼年哮喘大鼠肺組織炎癥因子的影響[J].中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2011,45(7)：645-649.

[5]陳新龍，夏照帆，韋多，等.燒傷后胰島素抵抗的實(shí)驗(yàn)研究[J].第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2004,25(10):1049-1051.

[6]Wang X,Wang Y,Peng D,et al.Changes in the inositol lipid signal system and effects on the secretion of TNF-α by macrophages in severely scalded mice[J].Burns,2011,37(8):1378-1385.doi:10.1016/ j.burns.2011.07.013.

[7]Holick MF.Vitamin D status:measurement,interpretation and clinicalapplication[J].AnnalsEpidemiol,2009,19(2):73-78.doi: 10.1016/j.annepidem.2007.12.001.

[8]Lee S,Lee DK,Choi E,et al.Identification of a functional vitamin D response element in the murine insig-2 promoter and its potential role in the differentiation of 3T3-L1 preadipocytes[J].Mol Endocrinol，2005,19(2):399-408.

[9]Dunlop TW,V?is ?nen S,Frank C,et al.The human peroxisome proliferator-activated receptor delta gene is a primary target of 1 alpha, 25-dihydroxyvitamin D3 and its nuclear receptor[J].J Mol Biol, 2005,349(2):248-260.

[10]Chagas CE,Borges MC,Martini LA,et al.Focus on vitamin D,inflammation and type 2 diabetes[J].Nutrients,2012,4(1):52-67. doi:10.3390/nu4010052.

（2013-10-15收稿 2014-01-15修回）

（本文編輯 魏杰）

Effect of 1,25-Dihydroxyvitamin D3on Alleviating the Stress Response in Severely Scalded Mice

LIU Man1,ZHANG Mingjian2,LI Xiaobing2,LIU Guangjing2,WANG Yuliang3,ZHANG Jian1,LIU Ning2
1 The First Central Clinical College of Tianjin Medical University,Tianjin 300192,China;2 Department of Plastic and Burn, The First Center Hospital of Tianjin;3 The Key Laboratory of Critical Care of Medicine Ministry of Health

ObjectiveTo explore the effect of 1,25-dihydroxyvitamin D3[1,25-(OH)2VitD3]on insulin resistance and inflammatory response in mice with severe burns under stress.MethodsOne hundred and thirty mice were randomly divided into healthy group(n=10),experimental groupⅠ(n=40),experimental groupⅡ(n=40)and control group(n= 40).The model mice were scalded to 30%of total body surface area(TBSA)burnt(Ⅲ°)in experimental groupⅠ,the experimental groupⅡand control group.Mice in experimental groupⅠwere given by gavaging 1,25-(OH)2VitD3(1 μg·kg-1)with 0.6 mL peanut oil at 8 am for every other day.At the same time and by the same way,mice in experimental groupⅡ

1,25-(OH)2VitD3(4 μg·kg-1)with 0.6 mL peanut oil,and mice in control group received only 0.6 mL peanut oil.The serum levels of fasting blood glucose(FBG),fasting insulin(FIns),TNF-α concentration,and the NF-κB positive rate in wound tissues were determined respectively on day1,day3,day7 and day14 after burn.Results(1)The values of insulin resistance index(HOMA-IR),serum TNF-α and the NF-κB positive rate in wound tissues were higher at different time points in experimental groupⅠ,experimental groupⅡand control group than those in healthy group.(2)The levels of HOMA-IR at the same time points were significantly lower in experimental groupⅠand experimental groupⅡthan those in control group,and the value was significantly lower in experimental groupⅡthan that of experimental groupⅠ(P＜0.05).The level of HOMAIR was the highest at day 3 and then gradually decreased at the different time points in the same group(P＜0.05).(3)The serum levels of TNF-α and NF-κB positive rate of wound tissues at the same time points were significantly lower in experimental groupⅠand experimental groupⅡthan those in control group,and the value was significantly lower in experimental groupⅡthan that of experimental groupⅠ(P＜0.05).The serum level of TNF-α and NF-κB positive rate of wound tissues were gradually decreased at the different time points in same group(P＜0.05).Conclusion1,25-(OH)2VitD3can reduce the insulin resistance and inflammatory response in mice with severe burns under stress.

calcitriol;burns;insulin resistance;tumor necrosis factor-alpha;NF-kappa B;mice;1,25-dihydroxyvitamin D3

R644

A

10.3969/j.issn.0253-9896.2014.05.014

1天津醫(yī)科大學(xué)一中心臨床學(xué)院（郵編300192）；2天津市第一中心醫(yī)院整形與燒傷外科；3衛(wèi)生部危重病急救醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

△通訊作者 E-mail:zhangmingjian@hotmail.com