傅紹喜 鄭偉紅 劉領波

摘要： 目的：探討分泌性中耳炎（secretory otitis media，SOM）與胃食管反流?。╣astroesophageal reflux disease， GERD）相關因素分析。方法：抽取分泌性中耳炎患者鼓室積液45例，對積液中的胃蛋白酶（Pepsin）使用酶聯(lián)反應免疫吸附法（ELISA法）測定，并用酶標儀測定其含量并行相關分析。結果：檢出含有胃蛋白酶陽性患者31例，陽性率68.9%，其含量0.659±0.46μg/ml。討論：反流的胃內容物可能進入鼻咽及中耳，GERD可引發(fā)分泌性中耳炎，分泌性中耳炎與胃食管反流病有關。

關鍵詞：分泌性中耳炎；胃食管反流??；胃蛋白酶；鼓室積液

【中圖分類號】R453【文獻標識碼】 A【文章編號】1002-3763（2014）09-0130-02分泌性中耳炎（secretory otitis media，SOM）是以傳導性聾及鼓室積液（包含漿液、黏液及漿—黏液）為特征的中耳非化膿性炎癥疾病[1]。其發(fā)病機制是否與胃食管反流?。℅ERD）有關，國內外專家學者對其研究甚少。Tasker等[2]證明食管炎中反流的胃內容物可以進入鼻咽部和中耳，導致了中耳炎的發(fā)生；國內學者周長華等[3] 也證明分泌性中耳炎的發(fā)病因素可能與胃食管反流病有關。

本研究在我院耳鼻喉科門診2012.7—2013.11月抽取鼓室積液45例，采用酶聯(lián)反應免疫吸附法（ELISA法），檢測其中胃蛋白酶的含量，觀察與分析分泌性中耳炎與胃食管反流病的關系，為分泌性中耳炎的臨床治療提供新的理論依據?，F(xiàn)將結果報告如下。

1 材料及方法

1.1 實驗材料

1.1.1 臨床資料：采用全國最新的分泌性中耳炎診斷標準[4]為診斷依據。選取2012.7—2013.11月在青海大學附屬醫(yī)院耳鼻喉科抽取的45例鼓室積液為樣本，所有病例均填寫詳細的調查表格。其中男29例，女16例，年齡2-52歲，中位數(shù)30.7±4.5歲；

1.1.2 主要試劑及設備：人胃蛋白酶ELISA試劑盒（北京久峰潤達生物技術有限公司）；Elx800酶標儀（美國BIO-TAK INSTRUMENTS.INC公司）。

1.2 實驗方法

1.2.1 樣本取材：使用鼓膜穿刺術（tympanotomy）抽吸鼓室液體，后將樣本移入1.5ml無菌離心管，離心20分鐘（3000轉/分）后，收集上清液，放置于冰箱（-20℃）中保存待查。

1.2.2 觀察指標：嚴格按照人胃蛋白酶ELISA試劑盒說明書操作，批內變異系數(shù)<9%，批間變異系數(shù)<15%。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫定量測定中耳積液胃蛋白酶水平。讀取OD在450nm波長值。從標準曲線計算樣品胃蛋白酶的含量。

1.3 統(tǒng)計學處理：所有數(shù)據均采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件分析，數(shù)據均以平均數(shù)±標準差表示。

2 結果

45例分泌性中耳炎患者鼓室積液使用P/N法定性測定，其中含有胃蛋白酶31例，陽性率68.9%。將胃蛋白酶稀釋為0.1μg/ml-10μg/ml之間，根據在450nm出的吸光度與濃度關系制成標準曲線。根據方程可測得鼓室積液中胃蛋白酶含量為（0.659±0.46μg/ml），

由此推測反流的胃內容物可能進入鼻咽及中耳，GERD可引發(fā)分泌性中耳炎。中耳胃蛋白酶的存在可作為GERD食管外的一種表現(xiàn)，將來可能通過處理GERD來治療胃酸反流導致的中耳炎，其機制為：通過抑制胃酸的反流，控制胃蛋白酶逆行上移經鼻咽部和咽鼓管進入中耳腔，從而可以避免患者接受鼓膜造口術及其他有創(chuàng)治療。

3 討論

分泌性中耳炎又稱為滲出性中耳炎（otitis media with effusion，OME）、卡他性中耳炎（catarrhal otitis media），如積液粘稠呈膠凍狀者，又稱為膠耳。中醫(yī)稱為“耳閉”。分泌性中耳炎是耳鼻咽喉頭頸外科常見疾病，尤其多發(fā)于兒童，發(fā)病率有逐年增高的趨勢。其臨床癥狀主要表現(xiàn)為傳導性耳聾及鼓室積液，伴有輕微的耳痛，耳鳴，耳閉塞感，嚴重者可見極度內陷的鼓膜。國際上召開過多次關于分泌性中耳炎的專題研討會，證明其病因可能與免疫系統(tǒng)發(fā)育不成熟、病毒感染、神經性炎癥機制改變、乳突氣化不良、咽鼓管功能不良等有關。在引起咽鼓管功能不良的各種原因中，GERD為其主要熱點之一。咽鼓管功能不良可能歸因于反流后酸性環(huán)境下的黏膜炎癥、膽汁酸的毒性及酸的滲透作用，尤其是胃蛋白酶的水解破壞，這一系列反應都受蛋白水解活性調節(jié)[5]。

Tasker等[2]使用ELISA法得出，82%患者中耳滲出液中有胃蛋白酶原的存在，且測出胃蛋白酶的濃度高于血清濃度1000倍。從而認為：食管炎中反流的胃內容物可以進入鼻咽部和中耳，導致了中耳炎的發(fā)生。另有Lieu等[6]實驗：測得分泌性中耳炎泌出液中胃蛋白酶和胃蛋白酶原的陽性率77%。Crapko等[7]對已行鼓膜置管的20例分泌性中耳炎患兒的鼓室積液中的胃蛋白酶使用Western Blot法進行分析，結果表明：胃蛋白酶陽性率為60%， 這也證明了中耳炎的發(fā)病因素可能與胃食管反流病有關。

OReilly等[8]對患有分泌性中耳炎的小兒（n=509）進行流行病學調查，發(fā)現(xiàn)20%小兒鼓室積液中可檢出胃蛋白酶，平均濃度為202.4±329.1ng/ml（12.5～2303ng/ml），結果表明胃蛋白酶很有可能是分泌性中耳炎發(fā)病的危險因素。

本研究，旨在對分泌性中耳炎和胃食管反流病的關系進行探討。通過實驗觀察到：45例鼓室積液中有31例測得胃蛋白酶，其陽性率為68.9%，含量為0.659±0.46μg/ml，從而證明分泌性中耳炎的發(fā)病因素及病理過程可能與胃食管反流病有關，以便為分泌性中耳炎的臨床治療提供新的理論依據。

參考文獻

[1] 黃選兆，汪吉寶，孔維佳.實用耳鼻咽喉頭頸外科學[M].2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：848-855.

[2] Tasker A，Dettmar PW， Panetti M，et al. Is gastricrc reflux a cause of otitis media with effusion in children[J]. Laryngoscope.2002，112：1930.

[3] 周長華.胃食管反流疾病與分泌性中耳炎[J].聽力學及言語疾病雜志.2010，18：200.

[4] 遲放魯，王正敏.中耳炎的分類和診斷[J].中國眼耳鼻喉科雜志。2004，5：137.