于敏，吳騰，趙桂榮，張河霞，烏恩其木格，秦培林

(內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)集團(tuán)股份有限公司，呼和浩特011550)

0 引 言

糖精鈉(學(xué)名：鄰磺酰苯酰亞胺鈉 )[1]，甜度是蔗糖的500倍，溶液濃度大時(shí)有苦味[2，3]。苯甲酸是羧基直接相連接在苯環(huán)碳原子的最簡(jiǎn)單的芳香酸[4]。是一種常用的食品消毒防腐劑[5]。山梨酸(化學(xué)名稱：2，4-己二烯)[6]，還能抑制有害微生物的繁殖與生長(zhǎng)[7-8]。安賽蜜是目前世界上第四代甜味劑。

乳與乳制品中檢測(cè)糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、安賽蜜等項(xiàng)目時(shí)如何配置標(biāo)準(zhǔn)品國(guó)標(biāo)方法中沒(méi)有明確規(guī)定，在開(kāi)展檢測(cè)項(xiàng)目時(shí)會(huì)遇到新舊標(biāo)準(zhǔn)品如何比對(duì)的問(wèn)題。一般情況下標(biāo)準(zhǔn)品配制成單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品和混合標(biāo)準(zhǔn)品后使用，配制方法對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品的比對(duì)有一定的影響。通過(guò)實(shí)驗(yàn)對(duì)不同的配制方法進(jìn)行研究滿足不同批次標(biāo)準(zhǔn)品的對(duì)比要求。

1 實(shí) 驗(yàn)

1.1 儀器與設(shè)備

Dionex U3000型 高效液相色譜儀(配有紫外檢測(cè)器)， 恒溫水浴鍋，10 mL容量瓶，100 mL容量瓶，10～100 L移液器

1.2 試劑

(1)苯甲酸單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品10 mg/L。準(zhǔn)確吸取苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(1.00 g/L)100 uL，用1∶1甲醇水溶液定容至10 mL容量瓶中。

(2)山梨酸單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品10 mg/L。準(zhǔn)確吸取山梨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(1.00 g/L)100 uL，用1∶1甲醇水溶液定容至10 mL容量瓶中。

(3)安賽蜜單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品10 mg/L。準(zhǔn)確吸取安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(1 000 mg/L)100 uL，用1∶1甲醇水溶液定容至10 mL容量瓶中。

(4)糖精鈉單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品10 mg/L。準(zhǔn)確吸取糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(1.00g/L)100 uL，用1∶1甲醇水溶液定容至10 mL容量瓶中。

(5)苯甲酸、山梨酸、安賽蜜、糖精鈉混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品10 mg/L。準(zhǔn)確吸取苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(1.00 g/L)、山梨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(1.00 g/L)、安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(1 000 mg/L)、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(1.00 g/L)各100 uL，用1∶1甲醇水溶液定容至10 mL容量瓶中。

(6)磷酸鹽緩沖鹽。分別稱取2.5 g磷酸二氫鉀和2.5 g磷酸氫二鉀，用水溶解并定容于1 000 mL的容量瓶中。

1.3 色譜條件

流動(dòng)相為磷酸緩沖鹽-甲醇(95:5)；色譜柱為C18柱(250×4.6mm,5um)；流速為1.0 mL/min；柱溫為38℃；進(jìn)樣量為10 uL；波長(zhǎng)為227 nm。

1.4 樣品處理

稱樣20 g于100 mL容量瓶,加入25 mL氫氧化鈉(濃度0.1 mol/L)搖勻，70℃水浴15 min,冷卻后用硫酸溶液(濃度0.5 mol/L)調(diào)pH值為7.0～8.0，加入2 mL亞鐵氰化鉀和2 mL乙酸鋅，用力搖勻，靜置15 min，用甲醇定容至刻度，至少放置2 h，過(guò)濾上機(jī)檢測(cè)。

2 方 法

2.1 陽(yáng)性樣品檢測(cè)

取糖精鈉陽(yáng)性樣品處理后，在上述色譜條件下檢測(cè)，分別用糖精鈉單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品和苯甲酸、山梨酸、安賽蜜、糖精鈉混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品作為標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行檢測(cè)糖精鈉。檢測(cè)數(shù)據(jù)如表1所示。

表1 單混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)糖精鈉結(jié)果及精密度

由表1可以看出，糖精鈉單標(biāo)工作液與混標(biāo)工作液檢測(cè)結(jié)果精密度不符合GB 21703-2010,乳與乳制品中苯甲酸和山梨酸的測(cè)定方法要求。

2.2 峰面積測(cè)量

不同日期，分別配制苯甲酸、山梨酸、安賽蜜、糖精鈉單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品與苯甲酸、山梨酸、安賽蜜、糖精鈉混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品，在上述同一色譜條件下，檢測(cè)峰面積，結(jié)果如表2～表6所示。

表2 苯甲酸單混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品峰面積對(duì)比數(shù)據(jù) mAu·min

表3 山梨酸單混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品峰面積對(duì)比數(shù)據(jù) mAu·min

表4 安賽蜜單混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品峰面積對(duì)比數(shù)據(jù) mAu·min

由表2～表6結(jié)果可以看出，苯甲酸、山梨酸單標(biāo)工作液與混標(biāo)工作液峰面積沒(méi)有顯著的差異。

表5 糖精鈉單混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品峰面積對(duì)比數(shù)據(jù) mAu·min

表6 單混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)苯甲酸回收率數(shù)據(jù)

安賽蜜、糖精鈉單標(biāo)工作液與混標(biāo)工作液峰面積有顯著的差異，即：在相同檢測(cè)條件下檢測(cè)混標(biāo)工作液的峰面積要大于單標(biāo)工作的峰面積。

2.3 回收率檢測(cè)

選取一個(gè)滅菌乳樣品，在其中分別添加2個(gè)不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)苯甲酸、山梨酸、安賽蜜、糖精鈉，分別用苯甲酸、山梨酸、安賽蜜、糖精鈉單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品和苯甲酸、山梨酸、安賽蜜、糖精鈉混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品作為標(biāo)準(zhǔn)品，進(jìn)行回收率平行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如表6-表9所示。

表7 單混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)山梨酸回收率數(shù)據(jù)

表8 單混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)安賽蜜回收率數(shù)據(jù)

由表6～表9可以看出，混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品與單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)苯甲酸回收率都符合GB 21703-2010,乳與乳制品中苯甲酸和山梨酸的測(cè)定方法中回收率的要求；混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品與單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)山梨酸回收率其檢測(cè)值沒(méi)有顯著的差異；混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)安賽蜜、糖精鈉回收率其檢測(cè)值較小，且符合GB 21703-2010,乳與乳制品中苯甲酸和山梨酸的測(cè)定方法中回收率的要求。而用單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)安賽蜜、糖精鈉回收率其檢測(cè)值較大，回收率超出GB 21703-2010,乳與乳制品中苯甲酸和山梨酸的測(cè)定方法中回收率的要求。

表9 單混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)糖精鈉回收率數(shù)據(jù)

3 結(jié) 論

通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：安賽蜜、糖精鈉單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品與混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品峰面積有顯著的差異，驗(yàn)收安賽蜜、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)，最好使用相同的配置方法。即：新舊標(biāo)準(zhǔn)品都配成單標(biāo)工作液或都配成混標(biāo)工作液進(jìn)行驗(yàn)收比對(duì)，否則很可能會(huì)出現(xiàn)驗(yàn)收不合格而實(shí)際標(biāo)準(zhǔn)品是合格的情況。

通過(guò)回收率試驗(yàn)結(jié)果表明，安賽蜜、糖精鈉用混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)時(shí)，其回收率符合GB 21703-2010,乳與乳制品中苯甲酸和山梨酸的測(cè)定方法中回收率的要求。而用單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)時(shí)其回收率超出GB 21703-2010,乳與乳制品中苯甲酸和山梨酸的測(cè)定方法中回收率的要求，檢測(cè)安賽蜜、糖精鈉樣品和回收率時(shí)最好使用混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品；苯甲酸、山梨酸檢測(cè)用單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品與混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)，沒(méi)有顯著的差異。

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