肖 紅

蘇州大學(xué)附屬常熟一院,江蘇常熟215500

病理診斷能為我們提供診療依據(jù)，并有助于預(yù)防疾病的惡化，進(jìn)一步保證了患者的生命安全，我們有必要找到一套合理有效的方式，提高病理診斷的有效性。而制片質(zhì)量是影響病理診斷結(jié)果的重要因素，相關(guān)工作者必須按照規(guī)范進(jìn)行操作，防止任何差錯(cuò)產(chǎn)生，并建立一套完善的質(zhì)量控制與保證體系，切實(shí)提高切片質(zhì)量，促進(jìn)病理診斷技術(shù)的進(jìn)步[1]。質(zhì)量控制在病理技術(shù)中的具體應(yīng)用可以表現(xiàn)在如下幾點(diǎn)上。

1 合理進(jìn)行設(shè)備管理

儀器設(shè)備是進(jìn)行所有醫(yī)療工作的基礎(chǔ)，所以我們要在保證各個(gè)科室配備有先進(jìn)儀器設(shè)備的同時(shí)，進(jìn)一步加強(qiáng)儀器設(shè)備的維護(hù)與保養(yǎng)工作，以使儀器設(shè)備在應(yīng)該發(fā)揮效果的時(shí)候，發(fā)揮出最佳效果。

2 保障試劑的質(zhì)量

各種試劑直接或間接接觸標(biāo)本切片，是影響切片質(zhì)量和診斷結(jié)果的重要因素。作為病理工作人員，要切實(shí)保障試劑的質(zhì)量，應(yīng)該做到：

2.1 對(duì)試劑進(jìn)行合理分類

病理診斷所使用的試劑種類極多，固定、染色、脫水等環(huán)節(jié)都需要用到，數(shù)量繁雜，光是染色劑就包括瑞氏染色劑、DNA和RNA染色劑、吉姆薩染色劑等等一系列試劑，如果不進(jìn)行合理的分類，很容易造成使用和管理混亂[2]。

2.2 加強(qiáng)采購(gòu)與配置管理

采購(gòu)與配置，是保證所使用的試劑符合要求的重要環(huán)節(jié)，我們必須通過(guò)合法渠道，采購(gòu)質(zhì)量過(guò)關(guān)的原料，并按照操作標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行試劑配置，防止出現(xiàn)染色不佳、制片不良等情況。

3 制片過(guò)程控制

制片過(guò)程包括十幾個(gè)詳細(xì)步驟，每一個(gè)環(huán)節(jié)都需要我們認(rèn)真對(duì)待。

3.1 病理檔案管理方面

必須保證標(biāo)本與檔案一一對(duì)應(yīng)、檔案與患者一一對(duì)應(yīng)，在標(biāo)本的轉(zhuǎn)接過(guò)程中，要著重注意編號(hào)登記、名字檢驗(yàn)等工作，對(duì)標(biāo)本進(jìn)行不定期檢查，固定液不足時(shí)還需做好相應(yīng)的補(bǔ)充工作。

3.2 組織固定方面

組織固定是為了使組織在失去活性之后，還能盡可能保持原先的狀態(tài)，是我們進(jìn)行病理分析的依據(jù)[3]。首先，病理組織的固定必須及時(shí)，并且嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，否者難以有效凝聚組織細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)，進(jìn)而導(dǎo)致蛋白質(zhì)沉淀變性不夠，組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)難以維持；其次，固定液必須按要求配置，最常用的固定液是4%中性甲醛溶液，此外還有乙醇-甲醛的混合固定液等；最后，固定液的使用也有相應(yīng)的規(guī)范，大塊組織必須先切成小塊組織，再通過(guò)固定液進(jìn)行固定，持續(xù)4 h左右，取材脫水時(shí)，還需再進(jìn)行切割，保證組織塊長(zhǎng)寬不超過(guò)22 mm，厚度小于2 mm。

3.3 組織脫水方面

脫水，就是用某種化學(xué)試劑置換經(jīng)過(guò)固定處理后，組織細(xì)胞中的水分的過(guò)程。常用的處理方法是乙醇脫水，替換過(guò)程中，乙醇濃度需逐漸從70%濃度上升至100%濃度，以完全替換組織細(xì)胞內(nèi)的水分，需要注意的是，高濃度乙醇的脫水時(shí)間決不能過(guò)長(zhǎng)，否者會(huì)使組織變脆，影響后續(xù)切片工作[4]。

3.4 組織包埋方面

包埋是制片前的重要步驟，可以支撐脆弱的組織，使其易于切削。一般我們采取石蠟包埋，可以有效保證切片的厚度，便于連續(xù)切片，保存時(shí)間也比較長(zhǎng)。然而石蠟包埋對(duì)溫度的要求非常高，溫度過(guò)低會(huì)使石蠟?zāi)?，?dǎo)致包埋不平，嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致切片不完整，溫度過(guò)高又容易使組織發(fā)脆，所以我們必須嚴(yán)格控制包埋溫度在67℃左右。

3.5 標(biāo)本制片方面

包埋結(jié)束，即可進(jìn)行制片了，這一環(huán)節(jié)無(wú)疑是病理診斷的重中之重，很多方面都需要我們注意。①嚴(yán)格控制切片厚度在5.0 μm內(nèi)；②染色過(guò)程中，保證切片核漿分化明顯、對(duì)比清晰，適度控制，防止因伊紅過(guò)染，出現(xiàn)染色過(guò)紅、蘇木精過(guò)染，出現(xiàn)染色過(guò)藍(lán)；③組織切片必須保證結(jié)構(gòu)完整、薄厚均勻、平整無(wú)痕；④可配合進(jìn)行快速診斷，但時(shí)間必須嚴(yán)格控制在30mim之內(nèi)，防止組織損壞；⑤貼片之前需要對(duì)蠟片進(jìn)行展平處理，可先浸泡于10%乙醇溶液中，再置于恒溫水箱中展平，貼片時(shí)注意將切片置于載玻片中央偏右處，對(duì)于有表皮或粘膜面的切片，要使表皮、粘膜在下，真皮、肌層在上，方便觀察；⑥烤片要注意溫度與時(shí)間要求，一般溫度比包埋溫度要高5℃，時(shí)間控制在15～30 min內(nèi)，使石蠟粘貼牢固；⑦在切片染色前，必須進(jìn)行脫蠟處理，以防止影響染色，導(dǎo)致著色模糊不清；⑧分化可以有效加深顏色對(duì)比度，提高染色效果，但其時(shí)間長(zhǎng)短很重要，過(guò)短會(huì)使細(xì)胞核、細(xì)胞漿對(duì)比不明顯，過(guò)長(zhǎng)又會(huì)使細(xì)胞核出現(xiàn)過(guò)染或褪色的情況，需要重點(diǎn)注意；⑨脫水過(guò)程對(duì)標(biāo)本切片的透明度影響極大，脫水不徹底，會(huì)直接導(dǎo)致標(biāo)本鏡下觀察模糊，一般我們采取的試劑是1～2級(jí)無(wú)水乙醇或者石碳酸二甲苯，但不管使用哪種方案，都必須保證脫水徹底；⑩封片常用中性樹(shù)膠，然而中性樹(shù)膠長(zhǎng)期放置之后容易酸化，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞核褪色，需要注意，另外，對(duì)中性樹(shù)膠的稀釋要求也非常高，稀釋過(guò)度影響切片美觀，且易產(chǎn)生缺膠現(xiàn)象，稀釋不夠又容易產(chǎn)生氣泡，影響切片質(zhì)量。最后，還有一點(diǎn)特別值得注意，那就是決不能讓切片出現(xiàn)干涸的情況，尤其是在染色過(guò)程中，因極易出現(xiàn)這種情況，需要我們時(shí)刻留意，切片干涸會(huì)產(chǎn)生龜裂，形成黑核，嚴(yán)重影響切片質(zhì)量，所以在完全染色后，必須做鏡下觀察，檢查制片質(zhì)量[5]。

4 結(jié)語(yǔ)

病理制片技術(shù)，在臨床、教育、科研等各方面都有廣泛的應(yīng)用價(jià)值，其本質(zhì)，就是為了提供高質(zhì)量的標(biāo)本切片，以供專業(yè)人員進(jìn)行病理診斷，所謂的高質(zhì)量，一般有這些要求：切片完整、薄厚均勻、無(wú)褶皺損傷；貼片烤片科學(xué)合理；染色清晰、對(duì)比分明；脫水充分、標(biāo)本透明度高；切片無(wú)龜裂、黑核出現(xiàn)；標(biāo)本清潔無(wú)污染；標(biāo)簽清晰，與患者一一對(duì)應(yīng)等。

高質(zhì)量的病理切片，不僅對(duì)病理技術(shù)人員的專業(yè)素養(yǎng)有極高的要求，需要我們具備極高的制片技術(shù)，還嚴(yán)格考驗(yàn)著我們的社會(huì)道德感，尤其是責(zé)任心與同情心。為了滿足病理制片的要求，我們亟需建立健全一套完整的質(zhì)量控制與質(zhì)量保證體系，然而現(xiàn)階段我們還找不到這樣一個(gè)科學(xué)而規(guī)范的管理控制體系，因而各科室有必要聯(lián)系自己的實(shí)際工作情況，嘗試進(jìn)行簡(jiǎn)單的質(zhì)量控制，以保證這樣科學(xué)有效的醫(yī)療方式，能進(jìn)一步保證患者的生命安全。一般而言，我們可依據(jù)各種國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，制定一套院方自己的操作標(biāo)準(zhǔn)，嚴(yán)格按照這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)來(lái)，在進(jìn)行標(biāo)本接受、轉(zhuǎn)接，檔案生成、管理，組織預(yù)處理、紙片等過(guò)程時(shí)，切實(shí)注意保證標(biāo)本質(zhì)量。

筆者相信，只要病理技術(shù)人員刻苦專研，努力學(xué)習(xí)，精益求精地不斷探索，病理技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值一定會(huì)得到大幅提升，不僅會(huì)使診斷結(jié)果更加準(zhǔn)確，還能促進(jìn)醫(yī)療學(xué)科相關(guān)科研教育的發(fā)展，進(jìn)一步推動(dòng)整個(gè)行業(yè)的進(jìn)步。

[1]馬恒輝，周曉軍.病理技術(shù)質(zhì)量控制常見(jiàn)問(wèn)題與對(duì)策[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2011(5):533-536.

[2]沈琴.病理技術(shù)質(zhì)量控制的探討[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2011(12):138-139.

[3]羅燦嶠，莫木瓊，鐘覺(jué)民.病理HE切片常見(jiàn)的質(zhì)量問(wèn)題及處理方法[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2010（1）：39-40.

[4]王春陽(yáng)，李世紅，尹惠蘭.病理制片技術(shù)中的常見(jiàn)問(wèn)題及對(duì)策[J].承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2009(2):210-211.

[5]葛英順.常規(guī)病理工作中遇到的技術(shù)問(wèn)題及解決辦法分析[J].青海醫(yī)藥雜志,2010(4):54-55.