馮麗

(遼寧醫(yī)學(xué)院醫(yī)療學(xué)院 遼寧錦州 121000)

隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,通過相關(guān)的研究表明,研究顯示,向生物體內(nèi)注射微小RNA片段,就有可能會(huì)干擾生物體自身的RNA獨(dú)特功能,使得有些蛋白質(zhì)沒有辦法組成,進(jìn)而“關(guān)閉”特定基因。有關(guān)專家認(rèn)為,使用RNA干擾技術(shù),可以在很大程度上從本源上找到辦法使致病基因“沉默”,在未來就非常有機(jī)會(huì)診治某些疑難雜癥。本文主要是通過研究小分子干擾RNA和反義寡核苷酸技術(shù)在不同方面的比較和實(shí)際應(yīng)用意義,找到兩者的優(yōu)勢(shì)點(diǎn)。

1 RNA干擾與反義寡核苷酸技術(shù)概念分析

RNA干擾是指因?yàn)槟繕?biāo)mRNA降解,以及抑制所導(dǎo)致的轉(zhuǎn)錄后基因沉默。其具有21-23個(gè)堿基的單鏈,也就是所謂的小分子干擾RNA,可以利用RNA干擾,有效,特異地間隔體內(nèi)同源基因表達(dá),促進(jìn)同源mRNA降解,使細(xì)胞體現(xiàn)出獨(dú)特的基因匱乏的類型。隨著社會(huì)的發(fā)展,人們逐漸在秀麗隱桿線蟲,以及哺乳動(dòng)物細(xì)胞等等中表明這種RNAi現(xiàn)象。一些專家在秀麗隱桿線蟲基因上,發(fā)現(xiàn)了RNAi的調(diào)控程序,觀察到RNAi是秀麗隱桿線蟲天生的抗病毒的免疫防御體系,是進(jìn)化過程中保守的序列特異的轉(zhuǎn)錄后的基因沉默制度。RNAi現(xiàn)象的觀察,為小分子干擾RNA治療法的應(yīng)用打下了夯實(shí)的基礎(chǔ)。在小分子干擾RNA療法存在之前,反義寡核苷酸療法一直被人們所應(yīng)用。DNA上出現(xiàn)的編碼蛋白質(zhì)的氨基酸信息的核苷酸酸序列,也可以叫做正義鏈,另一條與正義鏈相互補(bǔ)充的核苷酸序列也叫做反義鏈。反義寡核苷酸是一些可以同獨(dú)特的DNA,RNA以堿基互補(bǔ)配對(duì)的模式的融合,同時(shí)防止其轉(zhuǎn)錄與翻譯的短核酸片段。RNA干擾與反義寡核苷酸技術(shù),在分子生物學(xué)的基礎(chǔ)研究領(lǐng)域,和病毒感染,腫瘤和遺傳性疾病的治療方面表達(dá)出非常強(qiáng)大的特點(diǎn)和爆發(fā)力。相對(duì)而言,RNA干擾具有更強(qiáng)大的特點(diǎn)和爆發(fā)力,RNA干擾與反義寡核苷酸技術(shù)在非常多的領(lǐng)域都是有類似相同地方的[1]。

2 反義寡核苷酸與RNA干擾的區(qū)別

RNA干擾與反義寡核苷酸技術(shù),在分子生物學(xué)的基礎(chǔ)研究領(lǐng)域,和病毒感染,腫瘤和遺傳性疾病的治療方面表達(dá)出非常強(qiáng)大的特點(diǎn)和爆發(fā)力。相對(duì)而言,RNA干擾具有更強(qiáng)大的特點(diǎn)和爆發(fā)力,RNA干擾與反義寡核苷酸技術(shù)在非常多的領(lǐng)域都是有類似相同地方的。

3 小分子干擾RNA和反義寡核苷酸技術(shù)的比較

3.1 RNA與腫瘤

腫瘤,一般是因?yàn)榘┗蜻^度表達(dá),以控制癌癥基因失去控制,而引發(fā)的細(xì)胞惡性增生。通常來說,能夠使用小分子干擾RNA,在體內(nèi)單獨(dú)的控制某些基因的表達(dá),以期能夠起到診治的目的和效果。通過一些醫(yī)學(xué)專家的相關(guān)的試驗(yàn)結(jié)果可以清楚的看出,小分子干擾RNA能夠在很大程度上,控制腫瘤基因的突變和擴(kuò)展,可以抑制基因的生長(zhǎng)。當(dāng)前,很多醫(yī)學(xué)專家和學(xué)者,在不同的腫瘤細(xì)胞系上做出了非常全面的研究和應(yīng)用,觀察RNAi的醫(yī)學(xué)效果。在未來,小分子干擾RNA可以良好的用于腫瘤的治療上來[2]。

3.2 RNA分類

一般來說,可以分為單鏈RNA和雙鏈RNA,同單鏈的反義siRNAs相比,雙鏈siRNAs可以達(dá)到10-100倍地遞增RISC的構(gòu)成。如果只是單純的強(qiáng)化單鏈反義小分子干擾RNA的穩(wěn)定性,最終還是沒有辦法提升單鏈反義小分子干擾RNA的活躍度。通過一些醫(yī)學(xué)研究證明,雙鏈小分子干擾RNA自身獨(dú)有的雙鏈結(jié)構(gòu),比單鏈反義小分子干擾RNA活躍度要更強(qiáng)。

3.3 寡核苷酸陣列法分析

通常來看,寡核苷酸陣列法,主要是就是在一個(gè)固定物,像是試驗(yàn)板上,原位合成與靶mRNA相互補(bǔ)充的,具有非常多可能性的的序列,構(gòu)建一個(gè)寡核苷酸陣列。把這種陣列與標(biāo)記的靶mRNA進(jìn)行混合,經(jīng)過掃描研究,就可以預(yù)判混合反應(yīng)的位置。按照有關(guān)實(shí)驗(yàn)的統(tǒng)計(jì),反義核酸的活性,同某些醫(yī)學(xué)研究結(jié)果等等之間具有非常好的關(guān)聯(lián)性,同時(shí)這種寡核苷酸有50%的控制濃度,一般情況下,都要比寡核苷酸低5倍之多。使用寡核苷酸陣列法選擇的mRNA上的反義寡核苷酸可以靠近的位置,另外也是小分子干擾RNA的可以靠近的位置。通常來看,通過寡核苷酸陣列法,能夠預(yù)判胰島素樣生長(zhǎng)因子,以及mRNA上反義寡核苷酸能夠靠近的站點(diǎn),并以此為根據(jù),優(yōu)化設(shè)計(jì)反義寡核苷酸,以及小分子干擾RN的序列。接著把設(shè)計(jì)好的設(shè)計(jì)反義寡核苷酸和小分子干擾RN的序列依次轉(zhuǎn)染給細(xì)胞,觀察用寡核苷酸陣列法確定的反義寡核苷酸,以及小分子干擾RN的序列有沒有真正意義上制IGF1R的表達(dá)。通過試驗(yàn)結(jié)果可以發(fā)現(xiàn),和反義寡核苷酸一樣,小分子干擾RNA也可以較好的制約IGF1R的表達(dá)[3]。

4 結(jié)語

目前,關(guān)于小分子干擾RNA的研究愈來愈多,相反對(duì)于反義寡核苷酸的分析也開始走下歷史的舞臺(tái),在分子生物學(xué)研究方面以及其他方面,小分子干擾RNA的研究發(fā)揮著越來越重要的作用,但是還是可以看出,研究反義寡核苷酸的一些成效,在小分子干擾RNA研究上,也是有很大幫助的。雖然還有非常多的工作要做,然而目前對(duì)于小分子干擾RNA的研究結(jié)果還是讓很多人堅(jiān)信,小分子干擾RNA在未來可以被用于臨床的實(shí)際應(yīng)用。

[1]郭俊,楊華強(qiáng).Mcl-1分子研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2012,1(20):393-394.

[2]唐斌.TNKS1基因在人腦星形腦瘤中的表達(dá),作用及機(jī)制研究[D].中南大學(xué),2012,5(1):14-22.

[3]崔俊成.核仁素反義寡核苷酸對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞MG-63抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究[D].中南大學(xué),2012,11(1):15-20.