王 芳，劉子冬，張 星，鐘 穎，劉玉林*(.第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部藥品研發(fā)中心，西安 7003；.第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部，西安 7003)

失眠是指無(wú)法入睡或無(wú)法保持睡眠狀態(tài)，導(dǎo)致睡眠不足的現(xiàn)象。又稱入睡和維持睡眠障礙(DlMS)，為各種原因引起的入睡困難、睡眠深度或頻度過(guò)短、早醒及睡眠時(shí)間不足或質(zhì)量差等，是一種常見(jiàn)病，并且病因復(fù)雜，大多數(shù)人是因?yàn)樯?、心理因素引起，每周至少出現(xiàn)3次，持續(xù)1個(gè)月以上[1]。我國(guó)失眠癥患病人數(shù)已達(dá)百萬(wàn)。長(zhǎng)期失眠對(duì)人的身心健康有害，容易引起一系列疾病[2]。本文對(duì)柴桂安神膠囊治療失眠的藥效學(xué)進(jìn)行研究。

1 儀器與材料

1.1 儀器 戊巴比妥鈉(上海化學(xué)試劑采購(gòu)供應(yīng)站分裝廠)；多導(dǎo)(16道)生理記錄儀(美國(guó)BIOPAC公司)；大鼠腦立體定位儀(北京眾實(shí)迪創(chuàng)科技公司)；失眠刺激器(哈爾濱電工儀表研究所)。

1.2 試藥 柴桂安神膠囊(第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院藥劑科)；解郁安神沖劑(沈陽(yáng)富東制藥有限公司)。

1.3 動(dòng)物 健康SD大鼠，體質(zhì)量160～220 g(第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(軍)2007-007)；清潔級(jí)昆明種小白鼠(第四軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(軍)2007-007)。

2 方法

2.1 柴桂安神膠囊對(duì)失眠大鼠失眠時(shí)相的影響 隨機(jī)取大鼠12只，按文獻(xiàn)方法[3]在大鼠腦內(nèi)填埋腦電電極，恢復(fù)2 d，待測(cè)。實(shí)驗(yàn)第1和第2天將埋好記錄電極的大鼠灌胃給予蒸餾水，并記錄腦信號(hào)。第3天，將篩選出的失眠大鼠灌胃給予柴桂安神膠囊24 g·kg-1，連續(xù)給藥7 d，于末次給藥30 min后，頭部的記錄電極通過(guò)微型插座和連接線連接到16道生理信號(hào)記錄儀上，并將大鼠置于失眠刺激器內(nèi)，在電刺激的8 h內(nèi)記錄EEG和EMG的信號(hào)。分析比較大鼠在電刺激前后和給藥后不同時(shí)期的腦電變化特征。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2 柴桂安神膠囊對(duì)小鼠戊巴比妥鈉催眠時(shí)間的影響[4-5]60只昆明小鼠隨機(jī)分為5組：柴桂安神膠囊低、中、高劑量組(2，4和8 g·kg-1)，解郁安神沖劑組和空白組。各組分別灌胃給藥，空白組灌胃等體積蒸餾水，每天1次，每次0.05 mL·g-1。末次給藥后1 h，每只小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉50 mg·kg-1，觀察記錄入睡潛伏期(翻正反射消失時(shí)間) 和睡眠持續(xù)時(shí)間(翻正反射消失至恢復(fù)的時(shí)間)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3 柴桂安神膠囊對(duì)小鼠戊巴比妥鈉閾下催眠劑量的影響[6]60只昆明小鼠隨機(jī)分為5組：柴桂安神膠囊低、中、高劑量組(2，4和8 g·kg-1)，解郁安神沖劑組和空白組。各組分別灌胃給藥，空白組灌胃等體積蒸餾水，每天1次，每次0.05 mL·g-1。末次給藥后1 h，每只小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉35mg·kg-1，觀察30 min內(nèi)反正反射消失達(dá)1 min以上的小鼠數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。

2.4 柴桂安神膠囊對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)的影響 60只昆明小鼠隨機(jī)分為5組：柴桂安神膠囊低、中、高劑量組(2，4和8 g·kg-1)，解郁安神沖劑組和空白組。各組分別灌胃給藥，空白組灌胃等體積蒸餾水，每天1次，每次0.05 mL·g-1。末次給藥后30 min后，用程控自主活動(dòng)箱測(cè)2 min內(nèi)小鼠自發(fā)活動(dòng)次數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表1 柴桂安神膠囊對(duì)失眠大鼠失眠時(shí)相的影響

表2 柴桂安神膠囊對(duì)小鼠戊巴比妥鈉催眠時(shí)間的影響

注：與空白組比較*P<0.05，**P<0.01

表3 柴桂安神膠囊對(duì)小鼠戊巴比妥鈉閾下催眠劑量作用

表4 柴桂安神膠囊對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)的影響

4 結(jié)論

①通過(guò)研究柴桂安神膠囊對(duì)大鼠睡眠時(shí)相的影響，由表1可知，柴桂安神膠囊可延長(zhǎng)失眠大鼠的總睡眠時(shí)間(TST)，使SWS2和REMS的延長(zhǎng)，并使覺(jué)醒時(shí)間(W)明顯減少。差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

②通過(guò)柴桂安神膠囊對(duì)小鼠戊巴比妥鈉催眠時(shí)間影響的實(shí)驗(yàn)研究，我們發(fā)現(xiàn)中、高劑量的柴桂安神膠囊可使小鼠快速進(jìn)入睡眠，明顯縮短戊巴比妥鈉致小鼠入睡的潛伏時(shí)間，延長(zhǎng)睡眠持續(xù)時(shí)間，同空白對(duì)照組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

③通過(guò)柴桂安神膠囊對(duì)小鼠戊巴比妥鈉閾下催眠劑量作用的實(shí)驗(yàn)研究，發(fā)現(xiàn)柴桂安神膠囊的中、高劑量組中30 min內(nèi)反正反射消失達(dá)1 min以上的小鼠數(shù)相比空白對(duì)照組明顯增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

④通過(guò)柴桂安神膠囊對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)影響的實(shí)驗(yàn)研究，觀察小鼠的自主活動(dòng)情況，發(fā)現(xiàn)中、高劑量組中的小鼠明顯活動(dòng)遲緩，反應(yīng)遲鈍。同空白對(duì)照組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

5 討論

柴桂安神膠囊是第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院藥劑科自主研發(fā)的純中藥制劑，具有疏肝解郁、益氣健脾之功效，主治失眠以及因失眠引起的健忘、神經(jīng)痛、神經(jīng)麻痹、偏頭痛等。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究柴桂安神膠囊對(duì)大鼠睡眠時(shí)相的影響，表明了柴桂安神膠囊對(duì)大鼠不同睡眠時(shí)期的影響，充分說(shuō)明了藥物的作用原理。通過(guò)對(duì)小鼠戊巴比妥鈉催眠時(shí)間的影響研究，說(shuō)明了柴桂安神膠囊有縮短入睡潛伏期的作用。通過(guò)對(duì)閾下催眠劑量戊巴比妥鈉小鼠入睡率的研究和抑制小鼠自發(fā)活動(dòng)次數(shù)的研究，充分說(shuō)明了柴桂安神膠囊有幫助入睡率的作用，并且具有抑制精神的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，柴桂安神膠囊具有很好的鎮(zhèn)靜催眠作用。

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