劉淑芬 張敏

·藥物研究·

大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs進展及耐藥性調(diào)查

劉淑芬 張敏

目的了解大腸埃希菌臨床感染及其耐藥性變化。方法收集2000至2009年所有從臨床標(biāo)本中分離的大腸埃希菌1 631株，觀察其檢出率及耐藥性變化。用全自動微生物分析系統(tǒng)及其對應(yīng)的鑒定卡進行鑒定；體外藥物敏感性試驗用最低抑菌濃度法；超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)檢測用表型確證方法進行。結(jié)果2000至2009年其分離率維持在12%～20%。產(chǎn)ESBL菌株由2000年18%提高到2009年61%。2000至2005年是產(chǎn)ESBL菌株迅速增長期。藥物敏感性趨勢氨芐西林13%以下，一代頭孢菌素從35%降到15%，三代頭孢從78%降到40%，其他變化不明顯，碳青霉烯類沒有耐藥。結(jié)論大腸埃希菌在感染中的分離率變化不大，產(chǎn)ESBL菌株比率增長明顯，ESBLS檢測應(yīng)常規(guī)進行，頭孢類抗菌藥物耐藥性提高明顯，其他抗菌藥物耐藥性變化不明顯。

大腸埃希菌；超廣譜β-內(nèi)酰胺酶；感染；耐藥性

隨著廣譜抗生素的廣泛使用和不合理應(yīng)用，細菌耐藥性日趨嚴峻。產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰腦酶(ESBLs)是目前革蘭陰性菌耐藥的主要原因之一,革蘭陰性菌株往往具有多重耐藥性,常給臨床抗感染治療帶來很大困難。ESBLs主要由腸桿菌科細菌產(chǎn)生，臨床最常見的為大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌。為了解ESBLs的感染情況和耐藥性，本文收集遷西縣人民醫(yī)院2000至2009年所有從臨床標(biāo)本中分離的大腸埃希菌1 631株，進行ESBLs的檢測及耐藥分析，為臨床合理使用抗生素提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 所有標(biāo)本為臨床送檢標(biāo)本，分離到的大腸埃希菌進入本次調(diào)查，1周內(nèi)同一患者同樣標(biāo)本中分離的不重復(fù)記入。

1.2 標(biāo)本接種 血培養(yǎng)以血液增菌方法增菌，陽性后分離培養(yǎng)；各類無污染的穿刺液標(biāo)本接種血/中國蘭瓊脂平板并同時增菌，增菌按血培養(yǎng)進行；可能存在污染的標(biāo)本或其他的標(biāo)本接種血/中國蘭瓊脂。

1.3 培養(yǎng) 血培養(yǎng)以血液增菌培養(yǎng)儀及對應(yīng)的增菌培養(yǎng)瓶進行；接種后的血/中國蘭瓊脂平板35℃，空氣，培養(yǎng)。

1.4 細菌鑒定 用全自動微生物分析系統(tǒng)及對應(yīng)的鑒定卡片對分離的細菌進行鑒定。

1.5 藥敏實驗 用最低抑菌濃度(MIC)法進行；判斷標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NCCLS)和名稱更改后的CLSI標(biāo)準(zhǔn)。ESBLs檢測用表型確正方法。

2 結(jié)果

2.1 10年中大腸埃希菌感染中的分離率及各年產(chǎn)ESBLS 菌株比率 2000至2009年10年中大腸埃希菌在感染中的分離率維持在12%～20%。期間變化沒有規(guī)律。產(chǎn)ESBLS 菌株比率從2000年的18%[1]到2005年快速升高到68%。2005年之后維持在高水平。見表1。

表1 10年中大腸埃希菌感染中分離率及各年產(chǎn)ESBLS 菌株比率

2.2 10年中大腸埃希菌體外藥物敏感性結(jié)果 2000至2009年10年中青霉素類和一代頭孢敏感性差，三代頭孢敏感性與產(chǎn)ESBL相反。慶大霉素、環(huán)丙沙星和復(fù)方新諾明敏感性也很差。啊米卡星、呋喃妥因始終維持較高的敏感性。大腸埃希菌對亞胺培南一直保持敏感。見表2。

表2 10年中大腸埃希菌體外藥物敏感性結(jié)果

3 討論

大腸埃希菌是臨床最常見的感染菌之一，關(guān)注其感染中的分離率和耐藥性變化對治療和預(yù)防有極大的現(xiàn)實意義。感染中某一細菌分離率主要與感染類型和其耐藥性有關(guān)。從本資料看出盡管大腸埃希菌產(chǎn)ESBL增長迅速，但其分離率并沒有雖之提高，說明其他細菌耐藥性也有了一定的提高 。在陰性細菌感染中，大腸埃希菌的分離率由原來的第一位被銅綠假單胞菌取代之后一直保持第二的位置，說明10年中感染的類型變化不大。

大腸埃希菌對氨芐西林的敏感性10年中一直很低，氨芐西林又是其他廣譜青霉素類的代表藥物，所以在沒有敏感證據(jù)且常由大腸埃希菌引起的感染治療時應(yīng)避免使用。頭孢噻吩是一代頭孢菌素體外藥敏試驗的指示藥物，他低的敏感性說明多數(shù)一代頭孢也不適合其感染的治療。頭孢唑林是一代頭孢菌素中抗菌活性最好的之一，但敏感性也很低。大腸埃希菌對青霉素類和一代頭孢菌素耐藥多由細菌產(chǎn)傳統(tǒng)的廣譜β-內(nèi)酰胺酶TEM-1，TEM-2和SHV引起[2]，說明傳統(tǒng)β-內(nèi)酰胺酶在大腸埃希菌中相當(dāng)普遍。

三代頭孢菌素中頭孢哌酮敏感性低于頭孢曲松和頭孢他啶。頭孢曲松和頭孢他啶敏感性在200至2005年中迅速降低，且2005至2009年一直維持在較低水平。腸桿菌科細菌特別是大腸埃希菌、克雷伯菌屬和奇異變形桿菌對三代頭孢菌素耐藥最主要原因就是產(chǎn)ESBLs[2]。ESBLs是由傳統(tǒng)的廣譜β-內(nèi)酰胺酶TEM-1，TEM-2和SHV某一基因位點突變后表達所致[3]，但其水解β-內(nèi)酰胺環(huán)能力卻有了極大提高，其所表達的ESBLs不僅可以分解青霉素類、一、二代頭孢菌素，對三代頭孢菌素也有很強的分解能力。所以，NCCLs和更名后的CLSI規(guī)定，產(chǎn)ESBLs菌株感染臨床以上述藥物治療無效。我們的結(jié)果中只有及個別耐藥不是由于產(chǎn)ESBLs引起，證明了大腸埃希菌對三代頭孢耐藥主要其產(chǎn)ESBLs引起。值得注意的是產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌約80%對頭孢他啶體外藥物敏感檢測結(jié)果為敏感，這與基因型種類有關(guān)[4]。如果對大腸埃希菌不檢測ESBL，則其體外藥敏試驗結(jié)果很容易誤導(dǎo)臨床治療。

其他類抗菌藥物敏感性變化不明顯。但慶大霉素、復(fù)方新諾明、環(huán)丙沙星敏感性很低。啊米卡星和呋喃妥因還維持較高敏感性。我們的結(jié)果中還沒有發(fā)現(xiàn)亞胺培南不敏感的菌株。

大腸埃希菌在感染中的分離率10年間變化不大。大腸埃希菌產(chǎn)ESBL菌株比率增長明顯，ESBLS檢測必須常規(guī)進行；其他抗菌藥物耐藥性變化不明顯但敏感性很低。啊米卡星、呋喃妥因和亞胺培南敏感性高。

1 張敏，張迎春 我院產(chǎn)ESBL E.coli藥敏特點分析.承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2002,19:16-17.

2 陳民均.細菌對β-內(nèi)酰胺藥的耐藥性及檢測方法.中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志，2001，24：197.

3 應(yīng)春妹，陸麗，汪雅萍，等.大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶檢測及其耐藥基因分析.檢驗醫(yī)學(xué)2007，22:272-275.

4 孫景勇，倪語星.大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的基因分型.中國抗感染化療雜志,2002,4:211-214.

·消 息·

計量資料中有效數(shù)字的確定

本刊編輯部

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.05.063

064300 河北省遷西縣人民醫(yī)院(劉淑芬)；承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院(張敏)

R 446.51

A

1002-7386(2014)05-0783-02

2013-11-12)