注射用對氨基水楊酸鈉近紅外定量模型的建立

李永輝 郄冰冰 郭永輝

·藥物研究·

注射用對氨基水楊酸鈉近紅外定量模型的建立

李永輝 郄冰冰 郭永輝

目的利用近紅外光譜法快速測定注射用對氨基水楊酸鈉的含量。方法采集注射用對氨基水楊酸鈉NIR光譜，采用偏最小二乘法(PLS)進(jìn)行回歸，經(jīng)外部交叉驗(yàn)證建立注射用對氨基水楊酸鈉的NIR光譜與其主要成分的HPLC法測定值之間的多元校正模型，預(yù)測其主成分的含量。結(jié)果校正集樣品濃度范圍為98.1%～102.2%(mg/mg%)。外部交叉驗(yàn)證決定系數(shù)(R2)為77.6，外部驗(yàn)證均方差(RMSEP)為0.228。結(jié)論本方法快速、簡便，適用于藥品的現(xiàn)場快檢。

對氨基水楊酸鈉；NIR；偏最小二乘法

注射用對氨基水楊酸鈉 為抗結(jié)核藥物，用于結(jié)核分枝桿菌所致的肺及肺外結(jié)核病，為臨床常用藥物。現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)為《中國藥典》2010年版二部[1]，其含量測定采用HPLC法。本文收集了來自國內(nèi)不同地域、不同流通領(lǐng)域及不同貯存條件下3個(gè)廠家61批注射用對氨基水楊酸鈉，分別采集近紅外漫反射光譜，以偏最小二乘法(PLS)建立數(shù)學(xué)模型，對其主成分進(jìn)行定量分析，并對預(yù)測集樣品進(jìn)行測定，結(jié)果準(zhǔn)確，分析速度快，表明NIR技術(shù)可用于現(xiàn)場監(jiān)督檢驗(yàn)[2-6]。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥 Matrix-F近紅外光譜儀(德國BRUKER公司)，BRUKER公司OPUS 5.0分析軟件。島津LC-2010高效液相色譜儀；Sartorius電子天平，其余試劑均為分析純。3個(gè)生產(chǎn)廠家61批注射用對氨基水楊酸鈉為市場抽驗(yàn)樣品，規(guī)格：2.0 g。分別來自國內(nèi)不同地域、不同流通領(lǐng)域及不同貯存條件(溫度12～29℃；相對濕度35%～70%)。對氨基水楊酸鈉照品來自中國食品藥品檢定研究院。

1.2 方法

1.2.1 對氨基水楊酸鈉含量測定：照《中國藥典》2010年版二部[1]，采用HPLC測定主成分含量作為理論含量。測定61批樣品，濃度范圍為98.1%～102.2%(mg/mg%)。見圖1。

圖1 注射用對氨基水楊酸鈉理論含量分布情況

1.2.2 光譜采集：采用Matrix-F隨機(jī)配帶的光纖探頭，光譜掃描范圍為12 000～4 000/cm，分辨率8/cm，掃描次數(shù)32次，每批樣品測定3瓶，使用平均光譜建模。

2 結(jié)果

2.1 校正模型的建立 從61批樣品中選擇選擇40批樣品作為校正集(純度98.1%～102.2%)，21批樣品作為驗(yàn)證集(純度99.5%～101.5%)，單位mg/mg%。利用OPUS軟件Quant-2中所有預(yù)處理方法和自動優(yōu)化功能(NIR方式) 對校正集樣品進(jìn)行外部交叉驗(yàn)證，主因子數(shù)為2，比較外部驗(yàn)證RMSEP和Different/Ture結(jié)果，確定最優(yōu)校正模型預(yù)處理方法為矢量歸一，最佳光譜范圍5 450.2～4 505.2。外部交叉驗(yàn)證決定系數(shù)(R2)為77.6，外部驗(yàn)證均方差(RMSEP)為0.228，維數(shù)(Rank)為7。見圖2、3。

圖2 注射用對氨基水楊酸鈉最佳光譜范圍

圖3 注射用對氨基水楊酸鈉定量分析模型外部交叉驗(yàn)證結(jié)果

2.2 準(zhǔn)確性考察 用建立的模型測定預(yù)測驗(yàn)證集中21個(gè)樣品的含量，考察模型預(yù)測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。NIR法預(yù)測結(jié)果與理論結(jié)果相比[3，4]，最大偏差為0.395 mg/mg%，最大相對偏差為0.4%。NIR預(yù)測結(jié)果與理論結(jié)果在95%可信區(qū)間內(nèi)進(jìn)行差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 注射用對氨基水楊酸鈉含量預(yù)測結(jié)果

2.3 專屬性考察 用樣品的馬氏距離與限定值進(jìn)行比較檢驗(yàn)異常樣品[4]。限定值=Factor×Rank/M 中Rank為主成分維數(shù)；M為建模樣品數(shù)，F(xiàn)actor為因子。限定值為0.35。于注射用對氨基水楊酸鈉西林瓶中加入適量的其它物質(zhì)配制成異常樣品，利用建立模型分別測定，測得馬氏距離均大于限定值，說明所建立的定量模型具有良好的專屬性。

3 討論

3.1 建模樣品的選擇 本次樣品純度范圍較小,僅為98.1%～102.2%，驗(yàn)證R2僅達(dá)77.6,因此認(rèn)為所建模型的適用范圍較窄,在今后模型建立過程中將嘗試改變樣品濃度以擴(kuò)大適用范圍.

3.2 誤差分析 在注射用粉針劑的測定中，由于不同企業(yè)西林瓶底部差異較大，并且部分企業(yè)樣品為疏松的塊狀物，因此測樣方式將對圖譜質(zhì)量產(chǎn)生影響，建議試驗(yàn)人員應(yīng)規(guī)范操作。

1 國家藥典編委會主編.中國藥典(二部).北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.240.

2 胡昌勤，馮艷春.近紅外光譜假藥識別系統(tǒng)的設(shè)想及可行性探討.中國藥事，2004，18：250-254.

3 劉緒平，馮艷春，胡昌勤，等.頭孢拉定膠囊劑通用性近紅外定量分析模型的建立.藥物分析雜志，2008，28：722-724.

4 侯少瑞，馮艷春，胡昌勤，等.近紅外光譜法快速分析注射用頭孢曲松鈉及其水分含量.藥物分析雜志，2008，28：936-938.

5 劉偉，范可青，包艷春，等.運(yùn)用車載近紅外光譜儀測定六味地黃丸水分.中國藥事，2008，22：703-705.

6 金少鴻.藥品檢測車的研制及其應(yīng)用.中國藥事，2007，21：8-11.

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.22.057

050092 石家莊市，河北省藥品不良反應(yīng)監(jiān)測中心(李永輝)；河北省食品藥品檢驗(yàn)院(郄冰冰、郭永輝)

R 917

A

1002-7386(2014)22-3490-02

2014-05-22)