馬征 孫雅菲 康玲伶 房銘輝 高燕軍

·論著·

急性腦出血患者發(fā)病過(guò)程中血清炎性因子的變化

馬征 孫雅菲 康玲伶 房銘輝 高燕軍

目的探討急性腦出血患者發(fā)病過(guò)程中血清炎癥因子的變化。方法選擇80例初發(fā)急性腦出血的患者，采用放射免疫法對(duì)其血清TNF-α和IL-6水平進(jìn)行測(cè)定。并且與60例正常健康人對(duì)照組進(jìn)行比較。結(jié)果與對(duì)照組相比，腦出血患者在發(fā)病過(guò)程中在不同時(shí)間點(diǎn)，試驗(yàn)組患者血清TNF-α和IL-6水平明顯增高(P<0.05)；腦出血患者血清中TNF-α和IL-6的變化與出血量大小成正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論TNF-α和IL-6均與腦出血的發(fā)病有關(guān)，可通過(guò)對(duì)血清中的TNF-α和IL-6水平的測(cè)定來(lái)推測(cè)腦出血量的大小，進(jìn)而可根據(jù)血清中的TNF-α和IL-6的變化來(lái)探討腦出血的臨床治療新方法。

急性腦出血患者；炎性因子；腫瘤壞死因子；IL-6

腦出血指原發(fā)性非外傷性腦實(shí)質(zhì)內(nèi)出血，是一種發(fā)病率、致殘率及病死率都很高的急性腦血管病，至今其治療效果仍不理想[1]。ICH后繼發(fā)性腦水腫是導(dǎo)致神經(jīng)功能惡化的主要原因，其發(fā)生發(fā)展與ICH患者病情密切相關(guān)。隨著研究的不斷深入[2]，炎性因子、自由基損傷及氧化應(yīng)激效應(yīng)與出血性腦血管病的關(guān)系日益引起人們的廣泛關(guān)注。腫瘤壞死因子(TNF-α)由活化的巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞和T細(xì)胞產(chǎn)生[3],是一種多功能細(xì)胞因子。白細(xì)胞介素-6(IL-6)也是一種重要致炎因子，主要由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生。IL-6在炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答過(guò)程中起到關(guān)鍵作用，它參與炎癥損傷過(guò)程，具有刺激細(xì)胞生長(zhǎng)、促進(jìn)細(xì)胞分化和加速細(xì)胞急性期蛋白合成的作用，在急性腦出血發(fā)病中具有重要意義[4]。為此，我們測(cè)定80例急性腦出血患者血清中的TNF-α和IL-6水平，探討急性腦出血患者發(fā)病過(guò)程中血清炎性因子的變化，探討他們與疾病的病程及預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究共分為2組：對(duì)照組與試驗(yàn)組。試驗(yàn)組：初發(fā)急性腦出血患者80例，我院2011年6月至2012年3月收住院患者，均符合第四屆全國(guó)腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，并經(jīng)顱腦CT證實(shí)；男48例，女32例；年齡44～83歲，平均年齡(62±6)歲。對(duì)照組：正常健康人60例，為同期我院健康體檢人員，該組人員均無(wú)腦血管病，無(wú)心、肝、腎、血液病、自身免疫性疾病。男37例，女23例；年齡39～85歲，平均年齡(63±6)歲。2組受檢者性別比、年齡方面差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

根據(jù)CT掃描片上血腫的最大直徑和層厚對(duì)患者的血腫大小進(jìn)行計(jì)算。根據(jù)血腫的大小將急性腦出血患者進(jìn)行分組。出血量按多田氏公式(π/6×長(zhǎng)×寬×層數(shù))計(jì)算，將其分為：大量腦出血組(LH,出血量>30 ml)18例，中等量腦出血組(MH,出血量10～30 ml)42例，小量腦出血組(SH,出血量<10 ml)30例。

1.2 方法 抽取入院后3、7、14 d時(shí)肘靜脈血，均為清晨采取空腹肘靜脈血5 ml。離心后取上層血清，于-20°冰箱保存。采用放射免疫法測(cè)定血清TNF-α、IL-6水平[6]。

1.3 觀察指標(biāo) 血液標(biāo)本用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)血清中TNF-α、IL-6含量。具體步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，酶標(biāo)儀450 nm處測(cè)定OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣品TNF-α、IL-6含量。

2 結(jié)果

2.1 腦出血患者血清中TNF-α和IL-6變化 與對(duì)照組相比，腦出血患者在發(fā)病過(guò)程中在不同時(shí)間點(diǎn)，試驗(yàn)組患者血清TNF-α水平明顯增高(P<0.05)。腦出血患者試驗(yàn)組中，血清TNF-α呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)。與對(duì)照組相比，腦出血患者在發(fā)病過(guò)程中在在不同時(shí)間點(diǎn)，試驗(yàn)組患者血清IL-6水平明顯增高(P<0.05)。腦出血患者試驗(yàn)組中，血清IL-6呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)。見(jiàn)表1。

2.2 不同出血量組血清中 TNF-α和IL-6變化 腦出血患者血清中TNF-α和IL-6的變化與出血量大小成正相關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表1腦出血患者血清中TNF-α和IL-6變化

組別TNF-α3d7d14dIL-63d7d14d對(duì)照組(n=60)21±921±921±912±811±812±8試驗(yàn)組(n=80) 106±22* 40±19*# 21±18*# 79±13* 43±12*# 12±10*#

表2 不同出血量組血清中TNF-α和IL-6變化

表2 不同出血量組血清中TNF-α和IL-6變化

組別TNF-α3d7d14dIL-63d7d14dLH組(n=18)101±1940±1821±1074±1240±1212±10MH組(n=42)105±2041±19*20±16*75±13*43±12*12±10*SH組(n=30) 113±21*41±20* 22±18*79±21*44±13*13±10*

注：與LH組比較，*P<0.05

3 討論

腦出血是腦血管疾病中嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康的常見(jiàn)病，是最難治療的腦卒中之一，在急性腦血管疾病中，腦出血約占10%～20%，全球每年發(fā)患者數(shù)為200萬(wàn)，占每年新發(fā)腦卒中的10%～15%，可能是由于同期老年人口的增長(zhǎng)，腦出血的住院率在過(guò)去10年中增加了18%[7]，內(nèi)科保守治療無(wú)新的進(jìn)展。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為腦出血后血腫周?chē)X組織的繼發(fā)性損傷是導(dǎo)致神經(jīng)功能惡化的主要原因，其中最重要的病理變化是繼發(fā)性腦水腫，目前由于腦CT和MRI的廣泛應(yīng)用，腦出血的臨床診斷并不困難，同時(shí)也能發(fā)現(xiàn)血腫周?chē)哪X組織水腫。但由于腦出血后腦水腫產(chǎn)生的機(jī)制至今尚未闡明，其形成原因極其復(fù)雜，許多研究表明炎性因子的參與在腦出血后腦水腫的形成過(guò)程中起重要作用。炎性反應(yīng)具有吸收血腫、清除壞死組織的作用，但過(guò)度炎性反應(yīng)可導(dǎo)致局部腦血流量減少、血腦屏障通透性增加，引起腦水腫和腦組織繼發(fā)損傷[8]。具有免疫活性的細(xì)胞炎性因子是由免疫細(xì)胞產(chǎn)生的小分子的多肽，它們有很高的生物活性，能調(diào)節(jié)和介導(dǎo)免疫反應(yīng)、機(jī)體代謝、炎性反應(yīng)。炎性因子在急性出血性腦血管病中能夠起激活、介導(dǎo)了腦組織的繼發(fā)損傷的作用。相當(dāng)數(shù)量的研究認(rèn)為炎性細(xì)胞因子在腦出血病理生理機(jī)制中有重要作用[9]，其中TNF-α和IL-6都是重要的炎性細(xì)胞因子。TNF-α是最先起作用的前炎性因子，是炎癥反應(yīng)的啟動(dòng)物質(zhì)，具有廣泛的生物活性作用，它可以活化各種炎性細(xì)胞釋放白細(xì)胞介素。TNF-α不僅會(huì)刺激或誘發(fā)多種細(xì)胞因子釋放，而且會(huì)激活白細(xì)胞和血小板產(chǎn)生血小板激活因子等，同時(shí)能激活內(nèi)皮細(xì)胞，使白細(xì)胞粘附因子-I升高,能誘導(dǎo)血管舒張因子增加，使血管通透性增加。TNF-α主要由單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，既是一種具有重要免疫調(diào)節(jié)功能的細(xì)胞因子，也具有廣泛的生物學(xué)功能，同其他細(xì)胞因子共同參與機(jī)體的生長(zhǎng)發(fā)育和維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，同時(shí)又介導(dǎo)感染、創(chuàng)傷及免疫應(yīng)答反應(yīng)。TNF-α在體內(nèi)有17 kD分泌狀態(tài)的可溶性的TNF-α(sTNF-α)和26 kD膜相關(guān)的TNF-α(mTNF-α)兩種形式存在，通常把mTNF-α當(dāng)作sTNF-α的前體，在膜金屬蛋白酶的作用下，從膜上裂解，脫落成為sTNF-α。研究表明，兩型TNF-α在受體結(jié)合、生物學(xué)效應(yīng)及其作用機(jī)制等方面各具特礎(chǔ)[10]。IL-6是由212個(gè)氨基酸組成，分子質(zhì)量為26 kD的糖蛋白，是一種具有廣泛免疫調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞因子，主要由T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，在腦組織中產(chǎn)生的細(xì)胞可能是星形細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞[11，12]。IL-6能參與機(jī)體多種組織細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化和調(diào)節(jié)，在免疫和炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要的作用，是機(jī)體-神經(jīng)-內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)的主要因子。本研究顯示，試驗(yàn)組各時(shí)點(diǎn)血清TNF-α、IL-6水平均高于對(duì)照組，其中發(fā)病后7 d時(shí)，TNF-α達(dá)到高峰，14 d時(shí)開(kāi)始下降。對(duì)于IL-6，則在發(fā)病后3d時(shí)達(dá)高峰，隨后開(kāi)始下降。說(shuō)明TNF-α、IL-6在腦出血后炎性反應(yīng)的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用。腦出血患者血清IL-6水平明顯高于對(duì)照組，可以推測(cè)出單核-巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞處于激活狀態(tài)。進(jìn)一步推測(cè)出，患者在腦出血發(fā)生后，出現(xiàn)腦組織壞死現(xiàn)象，使得體內(nèi)相當(dāng)數(shù)量的抗原產(chǎn)生，來(lái)刺激免疫系統(tǒng)，進(jìn)而使得相當(dāng)數(shù)量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和激活，導(dǎo)致強(qiáng)烈的免疫應(yīng)答過(guò)程出現(xiàn)，致使單核-巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞等被激活，從而產(chǎn)生大量的炎性因子，也表明了IL-6參與了腦出血的病理變化過(guò)程。同時(shí)，研究結(jié)果也顯示，腦出血患者血清中TNF-α和IL-6的變化與出血量大小成正相關(guān)。由此，可以通過(guò)對(duì)血清中的TNF-α和IL-6水平的測(cè)定來(lái)推測(cè)腦出血量的大小。因此，在治療的過(guò)程中，可控制IL-6和 TNF-α含量，減少由此而引發(fā)的繼發(fā)性腦損傷。因此，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)血清炎性因子的變化有利于對(duì)腦出血后腦水腫及腦損傷程度的判斷以及預(yù)后的判定，將開(kāi)辟I(mǎi)CH的內(nèi)科治療新途徑，對(duì)減輕腦出血后腦損傷的程度及改善患者的預(yù)后有重要的臨床價(jià)值。

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10.3969/j.issn.1002-7386.2014.08.023

067000 河北省承德市，承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科

高燕軍，067000 承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院；

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2013-12-11)