李朋朋 王光玲 呂騰 武璞 孟建國(guó) 侯建平 陜西中醫(yī)學(xué)院（咸陽(yáng) 712046）

太白米為百合科假百合屬假百合Notholirion bulbuliferum（Lingelish.）Stearn的干燥小鱗莖，性溫，味辛，微甘苦。具有寬胸理氣、止咳鎮(zhèn)痛、健胃之功效，主治脘腹脹痛、嘔吐、風(fēng)寒咳嗽等[1]。該藥屬民間珍稀草藥，資源較少，近年來(lái)被用于治療慢性胃炎、胃癌、食道癌等，臨床上取得了良好的效果[2－3]，但目前有關(guān)其活性及物質(zhì)基礎(chǔ)研究方面的資料頗少。為了進(jìn)一步對(duì)其進(jìn)行開(kāi)發(fā)利用，本課題組在前期不同提取部位分離的基礎(chǔ)上，對(duì)其生藥、粗提物及4個(gè)提取部位進(jìn)行了抗炎、鎮(zhèn)痛活性部位篩選，為其臨床使用的有效性尋找科學(xué)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康成年昆明種小鼠，雌雄各半，體重（20±2）g，清潔級(jí)，由第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK（軍）2012—006；飼養(yǎng)環(huán)境：陜西中醫(yī)學(xué)院中藥藥理實(shí)驗(yàn)室，動(dòng)物分籠飼養(yǎng)，保持12h晝夜節(jié)律，室溫（22±1）℃，自由飲水?dāng)z食。

1.2 試藥試劑 太白米（產(chǎn)自陜西省眉縣，經(jīng)陜西中醫(yī)學(xué)院生藥教研室胡本祥教授鑒定為正品），取藥材2kg，分別以10倍量95%乙醇、65%乙醇、水60℃依次溫浸3次，2d／次，合并濾液，減壓濃縮至無(wú)醇味，取出部分浸膏至減壓干燥箱中于60℃減壓干燥至無(wú)溶劑殘留作為粗提物，其余浸膏用水分散，依次用石油醚、氯仿、正丁醇萃取，得到石油醚部位、氯仿部位、正丁醇部位及水液4個(gè)部位，低溫烘干，稱定質(zhì)量，計(jì)算提取物與生藥比；另取太白米藥材200g，粉碎至能通過(guò)6號(hào)篩，備用；復(fù)方阿司匹林：西安利君制藥股份有限公司，批號(hào)：1011233；醋酸地塞米松：天津天藥藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：1205151（供試藥與陽(yáng)性對(duì)照藥使用前均用0.5%羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）水溶液配置）；提取用乙醇為食品級(jí)；其他試劑均為分析純。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 BT224S電子天平，賽多利斯科學(xué)儀器有限公司；微量移液器，上海求精生化試劑儀器有限公司；YLS-Q4打孔器，濟(jì)南益延科技發(fā)展有限公司；YX208B手提不銹鋼蒸汽消毒器，江陰濱江醫(yī)療設(shè)備有限公司；303-3電熱保溫箱，上海陽(yáng)光實(shí)驗(yàn)儀器有限公司。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 SPSS 13.0軟件統(tǒng)計(jì)，所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用（）表示，采用單因素方差分析。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 太白米生藥及不同部位對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響[4]小鼠96只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、醋酸地塞米松組（0.2g／kg）、生藥組（5g／kg）、粗提物組（5g生藥／kg）、正丁醇部位組（5g生藥／kg）、氯仿部位組（5g生藥／kg）、石油醚部位組（5g生藥／kg）、水部位組（5g生藥／kg）。所有動(dòng)物灌胃給藥，體積0.2mL／10g，1次／d，連續(xù)5d，空白對(duì)照組給予等量0.5%CMC-Na水溶液。實(shí)驗(yàn)前一天禁食不禁水12h，末次給藥1h后，用微量移液器量取50μL的二甲苯均勻涂于小鼠左耳前后兩面，30min后，脫頸椎處死小鼠，迅速沿耳廓基線剪下兩側(cè)耳朵，用直徑9mm打孔器在耳部同一位置打下圓形耳片，稱重，計(jì)算小鼠耳廓腫脹度及抑制率。腫脹度（mg）＝左耳片重-右耳片重；抑制率（%）＝（空白對(duì)照組平均腫脹度－給藥組平均腫脹度）／空白對(duì)照組平均腫脹度×100%。

2.2 太白米生藥及不同部位對(duì)棉球致小鼠肉芽腫的影響[4]小鼠96只，雌雄各半，分組及給藥同上。造模前一天，禁食不禁水12h，水合氯醛麻醉，無(wú)菌操作下將兩個(gè)10mg脫脂棉球（高溫高壓消毒后，氨芐西林鈉0.02mL／10kg浸泡烘干）分別植入小鼠兩側(cè)腋窩下，縫合，術(shù)后24h開(kāi)始灌胃給藥，體積0.2mL／10g，1次／d，給藥14d。于末次給藥1h后，脫頸椎處死，取出棉球及其周圍結(jié)締組織，小心剔除脂肪組織，60℃烘干24h后稱重，將干重減去棉球重量作為肉芽?jī)糁?，比較各給藥組與空白對(duì)照組的差異顯著性。

2.3 太白米生藥及不同提取部位對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響[5]小鼠96只，雌雄各半，分組及給藥劑量同2.2，陽(yáng)性藥組給予復(fù)方阿司匹林片（0.2g／kg）。各組動(dòng)物灌胃體積0.2mL／10g，1次／d，連續(xù)5d。實(shí)驗(yàn)前一天，禁食不禁水12h，末次給藥后30min，各組小鼠腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.1mL／10g，記錄潛伏期及15min內(nèi)的小鼠扭體次數(shù)，計(jì)算藥物對(duì)扭體反應(yīng)的抑制率。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 太白米生藥及不同部位對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響 與空白對(duì)照組比較，太白米生藥組、粗提物組、正丁醇部位組、水部位組以及醋酸地塞米松組小鼠耳腫脹度均顯著降低，具有極顯著性差異（P＜0.01）；氯仿部位組與石油醚部位組抑制作用不明顯（見(jiàn)表1）。

表1 太白米生藥及不同提取部位對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響（，n＝12）

表1 太白米生藥及不同提取部位對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響（，n＝12）

注：與空白對(duì)照組比較，△P＜0.05，▲P＜0.01

組 別 劑量 （g／kg） 腫脹度 （mg） 抑制率 （%）空白對(duì)照組 ― 17.7±5.38―地塞米松組 0.2 7.97±3.13▲ 54.96生藥組 5 5.74±3.23▲ 67.59粗提取物組 5 9.98±4.52▲ 43.64正丁醇組 5 10.61±3.60▲ 40.03氯仿組 5 15.74±3.29 11.07石油醚組 5 15.18±4.08 14.24水部位組 5 12.13±3.64▲31.45

3.2 太白米生藥及不同提取部位對(duì)棉球致小鼠肉芽腫的影響 與空白對(duì)照組比較，太白米生藥組、粗提物組、正丁醇部位組、氯仿部位組、水部位組、醋酸地塞米松組的肉芽?jī)糁鼐黠@減輕，有顯著性差異（P＜0.05）或極顯著性差異（P＜0.01）；且在各分離部位中正丁醇部位組抑制率最高，提示其對(duì)小鼠肉芽腫具有很強(qiáng)的抑制作用（見(jiàn)表2）。

表2 太白米生藥及不同提取部位對(duì)棉球致小鼠肉芽腫的影響（，n＝12）

表2 太白米生藥及不同提取部位對(duì)棉球致小鼠肉芽腫的影響（，n＝12）

注：與空白對(duì)照組比較，△P＜0.05，▲P＜0.01

組 別 劑量 （g／kg）肉芽?jī)糁兀╩g） 抑制率 （%）空白對(duì)照組 ― 54.93±16.08―地塞米松組 0.2 33.77±7.71▲ 38.52生藥組 5 39.50±4.72△ 28.09粗提取物組 5 40.99±7.13△ 25.40正丁醇組 5 39.33±7.92△ 28.41氯仿組 5 43.47±7.97△ 20.86石油醚組 5 48.88±11.61 11.03水部位組 5 41.92±11.99△23.69

3.3 太白米生藥及不同提取部位對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響 與空白對(duì)照組比較，太白米生藥組、粗提物組、正丁醇部位組及復(fù)方阿司匹林組均能明顯延長(zhǎng)扭體反應(yīng)的潛伏期，減少扭體次數(shù)，有顯著性差異（P＜0.05）或極顯著性差異（P＜0.01）；其中太白米生藥組鎮(zhèn)痛率達(dá)到72.75%（見(jiàn)表3）。

表3 太白米生藥及不同提取部位對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響（，n＝12）

表3 太白米生藥及不同提取部位對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響（，n＝12）

注：與空白對(duì)照組比較，△P＜0.05 ▲P＜0.01

―空白對(duì)照組 ― 203.18±73.1818.71±11.76）阿司匹林組 0.2 349.14±116.06▲ 5.70±4.30▲ 69.54%生藥組 5 332.56±120.19▲ 5.10±3.31▲ 72.75%粗提取物組 5 281.00±63.74△ 7.54±5.84▲ 59.72%正丁醇組 5 267.63±31.32△ 9.64±5.12△ 48.51%氯仿組 5 235.00±47.3815.75±6.1215.84%石油醚組 5 254.75±45.1712.82±6.3231.51%水部位組5 258.56±54.2610.60±6.1343.36%

4 討 論 作為陜西民間草藥，太白米臨床用于治療慢性胃炎、胃癌、食道癌等取得了很好的療效，但有關(guān)該藥的基礎(chǔ)研究很少，屠鵬飛[6]等從太白米干燥小鱗莖的正丁醇提取物中分離并鑒定了六個(gè)酚酸類成分；吳衛(wèi)中[7]等從太白米干燥小鱗莖的正丁醇提取物中分離并鑒定了三個(gè)甾體生物堿苷。藥理研究表明，酚酸類化合物具有清除自由基，抗炎，抗病毒，免疫調(diào)節(jié)，抗凝血，抗腫瘤，鎮(zhèn)痛等方面活性[8－9]，而生物堿類則具有抗炎活性。由此推斷太白米抗炎、鎮(zhèn)痛的物質(zhì)基礎(chǔ)可能為酚酸類化合物與甾體生物堿及其苷類化合物。本研究采用經(jīng)典的抗炎、鎮(zhèn)痛試驗(yàn)對(duì)太白米生藥材、粗提取物、及其4個(gè)提取部位進(jìn)行活性了篩選，結(jié)果顯示太白米生藥材及其粗提物具有顯著的抗炎、鎮(zhèn)痛活性，而4個(gè)提取部位中，正丁醇部位能顯著降低二甲苯致小鼠耳腫脹度、抑制小鼠肉芽腫、延長(zhǎng)扭體潛伏期、減少扭體次數(shù)，其抗炎、鎮(zhèn)痛作用顯著；水部位與氯仿提取部位抗炎活性稍弱，鎮(zhèn)痛活性不明顯；石油醚提取部位抗炎、鎮(zhèn)痛作用均不明顯，初步確定正丁醇部位為太白米抗炎、鎮(zhèn)痛的主要活性部位，本課題組以往研究分析認(rèn)為，該部位主要含酚酸類、生物堿類及黃酮類成分。

在民間，太白米多以生藥或水煎液入藥，臨床療效顯著[10]，本研究結(jié)果顯示太白米生藥材活性極強(qiáng)，優(yōu)于粗提取物及正丁醇提取部位，說(shuō)明原藥材在提取分離過(guò)程中可能丟失了某類化學(xué)成分，或減弱了某些化學(xué)成分之間的協(xié)同作用，這一問(wèn)題有待進(jìn)一步探討。本研究結(jié)果為闡明太白米抗炎、鎮(zhèn)痛作用及其物質(zhì)基礎(chǔ)提供了可靠的科學(xué)依據(jù)，為該藥進(jìn)一步研究和開(kāi)發(fā)奠定了基礎(chǔ)。

[1]陜西省衛(wèi)生局等.陜西中草藥[M].北京：科學(xué)出版社，1971：384.

[2]中國(guó)科學(xué)院西北植物研究所.秦嶺植物志[M].北京：科學(xué)出版社，1970：363.

[3]江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典（下冊(cè)）[M].上海：上海人民出版社，1977：2181.

[4]徐淑云.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：905-934.

[5]李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2005：241-245.

[6]屠鵬飛，吳衛(wèi)中，鄭俊華.太白米的酚酸類成分研究[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，1999，34（1）：39-41.

[7]吳衛(wèi)中，田 晶，屠鵬飛，等.太白米的甾體生物堿類成分研究[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，2000，31（3）：167-169.

[8]張 囡，杜麗麗，王 冬，等.中藥酚酸類成分的研究進(jìn)展[J].中國(guó)現(xiàn)代中藥，2006，2（8）：25-28.

[9]王 斌，李 敏，崔春利，等.太白米不同提取部位中阿魏酸含量測(cè)定研究[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2010，10（6）：8-10.

[10]王 斌.太白米不同有效部位對(duì)血凝及心肌缺血的影響[D].西安：陜西中醫(yī)學(xué)院，2006級(jí)碩士研究生畢業(yè)論文.