馮向陽

摘 要：達元DY-5000和托普NY-16D兩款酶抑制率法—比色法農(nóng)殘速測儀用于農(nóng)產(chǎn)品蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的檢測，具有檢測靈敏度高、重現(xiàn)性較好、檢測速度快和成本低等優(yōu)勢。通過對比、研究兩款儀器在工作原理、操作步驟和檢測結(jié)果判定上的不同之處，使其能更好地服務(wù)于農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測工作。

關(guān)鍵詞：酶抑制率法；達元DY-5000；托普NY-16D；農(nóng)藥殘留檢測儀

中圖分類號：S481.8 文獻標識碼：A 文章編號：2095-6835（2014）15-0062-02

蔬菜、水果中殘留的農(nóng)藥會危害食用者的身體健康，確保人民群眾舌尖上的安全是政府食品質(zhì)量安全監(jiān)管的重要職責。蔬菜水果農(nóng)藥殘留檢測儀適用于各級食品安全監(jiān)測部門、蔬菜生產(chǎn)基地、蔬菜批發(fā)市場和食品超市的蔬菜、水果農(nóng)藥殘留檢測，通過農(nóng)藥殘留檢測儀對農(nóng)藥殘留含量進行科學的檢測，并根據(jù)數(shù)據(jù)判斷蔬菜的農(nóng)藥殘留量是否超標，是當前確保食品安全的重要環(huán)節(jié)。近年來，基于酶抑制率法—比色法的原理，開發(fā)了適用于蔬菜、水果農(nóng)藥殘留檢測的儀器，具有快速、簡便、靈敏和成本低等優(yōu)點，深受廣大基層監(jiān)督部門、生產(chǎn)基地和市場的歡迎。我市在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管檢測中，配備了達元DY-5000和托普NY-16D兩款農(nóng)藥殘留速測儀，經(jīng)過一段時間的使用后，對這兩款儀器的性能有了更好的了解和撐握，現(xiàn)將兩款儀器的使用事項與大家討論分享，以便更好地服務(wù)于檢測工作。

現(xiàn)階段，蔬菜水果農(nóng)藥殘留主要是有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥超標，而對人體造成危害的是農(nóng)藥殘留的總量。農(nóng)藥殘毒速測法正適應(yīng)了以上兩個特點，可以快速檢測上述兩類農(nóng)藥嚴重超標的蔬菜、水果，防止因食用引起的急性中毒；同時，還具有短時間內(nèi)檢測大量樣本、檢測成本低、對檢測人員技術(shù)水平要求低、易于在基層推廣等特點，是現(xiàn)階段我國控制高毒農(nóng)藥殘留的一種有效方法。

酶抑制法是研究最多且相對成熟的一種對部分農(nóng)藥殘留進行快速檢測的技術(shù)，我國已將其列入國家標準《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》（GB/T 5009.199—2003）中，并作為快速檢測農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的方法。光電比色法是用光電比色計測量溶液的吸光度，根據(jù)待測組分溶液吸光度的變化和空白溶液吸光度的變化計算濃度，具有較高準確度，是一種非常經(jīng)典的分析方法。

1 酶抑制率—比色法農(nóng)殘速測的工作原理

有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶或丁酰膽堿酯酶的正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常條件下，乙酰膽堿酯酶（AchE）或丁酰膽堿酯酶（BuChE）能催化神經(jīng)傳導代謝產(chǎn)物類似物——碘化硫代乙酰膽堿（ATCI）或碘化硫代丁酰膽堿（BTCI）水解，水解產(chǎn)物與顯色劑二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用農(nóng)殘測試儀在410 nm波長比色法測定固定時間內(nèi)空白對照溶液和樣品溶液的吸光度的變化值（△A），計算酶抑制率，可以判斷出樣品中有機磷或氨基甲酸酯類中農(nóng)藥的殘留劑量。

2 兩款儀器的共同點

2.1 儀器特點

兩款儀器都是由光學、機械、電子軟件等部分組成，可以同時檢測多個樣品，自動檢測、記錄、計算和顯示最終抑制率和濃度值；內(nèi)置樣品測試數(shù)據(jù)庫可連接電腦進行測試、分析、匯總；置熱敏打印，方便快捷；中文菜單操作人機對話界面便于輸入操作，步驟簡單、明了。

2.2 試劑開放，無特定限制

試劑可以選用儀器廠家的商品化小包裝專供試劑。

試劑的儲存和使用要求有：①緩沖劑。粉狀物常溫存放，蒸餾水溶解制成pH 8.0提取液。②顯色劑。5，5二硫代雙（2-硝基苯甲酸）和碳酸氫鈉以一定比例混合，用緩沖液溶解，在0～4 ℃的環(huán)境下保存期較長。③底物。碘化硫代乙酰膽堿，粉狀在0～4 ℃的環(huán)境下保存期在半年以上，加蒸餾水溶解在0～4 ℃的環(huán)境下保存期為7 d。④酶。粉狀的膽堿酯酶冷凍儲存，溶解后應(yīng)儲存在0～4 ℃的環(huán)境下冷藏，一周內(nèi)用完。

2.3 計算公式

采用兩點法檢測，相比于終點法，兩點法可以檢出本身帶有較深顏色的農(nóng)產(chǎn)品，受干擾程度較小。檢測時通過測定固定時間段對照和樣品溶液吸光度變化計算抑制率，公式如下：

抑制率=（△A對照-△A樣品）/ △A對照×100%. （1）

檢測結(jié)果不會出現(xiàn)負值，但需要注意審核0抑制率數(shù)據(jù)。

3 兩款儀器的不同點

3.1 試劑用量方面

DY-5000儀器取2 g蔬果樣品+20 mL緩沖液進行浸提；樣液比率為1︰10；測試時，180 uL緩沖液（檢測樣品時則為浸提液）+10 uL酶液+10 uL顯色劑，靜置10 min+10 uL底物，立即測試；反應(yīng)物濃度，例如以顯色劑計算，為10 uL/210 uL。

NY-16D儀器取2 g蔬果樣品+10 mL緩沖液進行浸提；樣液比率為1︰5；測試時，2.5 mL緩沖液（檢測樣品時則為浸提液）+100 uL酶液+100 uL顯色劑，靜置15 min+100 uL底物，立即測試；反應(yīng)物濃度，以顯色劑計算，為100 uL/2 800 uL。

3.2 測試反應(yīng)時間不同

DY-5000儀器的標準反應(yīng)測試時間為60 s，而NY-16D儀器的標準反應(yīng)測試時間180 s。則在公式（1）中：△A對照表示對照溶液反應(yīng)60 s/180 s的吸光度變化值；△A樣品表示樣品溶液反應(yīng)60 s/180 s的吸光度變化值；

3.3 空白吸光值作用不同

DY-5000儀器的空白吸光值△A在0.4～0.8之間，且必須>0.4.每進一批次樣品都需要同時做雙孔空白檢測，并作為本批次樣品的參照標準。這樣能夠較好地克服儀器工作點漂移的影響。

NY-16D儀器的空白吸光值△A在0.3以上，即采用國標標準。必須先單獨進行空白檢測，作為不同批次樣品的空白參考值參與計算；也可隨時根據(jù)儀器狀況進行空白測試，作為下批次空白值參與計算。這樣可以在保證空白檢測值準確的情況下進行樣品檢測，一般不會使批次樣品檢測數(shù)據(jù)作廢。

3.4 樣品重復(fù)檢測方式不同

DY-5000儀器可默認雙孔檢測，自動設(shè)立重復(fù)，并計算平均值，能通過平行測定的結(jié)果一致性比對判斷兩次結(jié)果的可信度。

NY-16D儀器的單孔檢測需要手動設(shè)立重復(fù)和計算平均值。

摘 要：達元DY-5000和托普NY-16D兩款酶抑制率法—比色法農(nóng)殘速測儀用于農(nóng)產(chǎn)品蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的檢測，具有檢測靈敏度高、重現(xiàn)性較好、檢測速度快和成本低等優(yōu)勢。通過對比、研究兩款儀器在工作原理、操作步驟和檢測結(jié)果判定上的不同之處，使其能更好地服務(wù)于農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測工作。

關(guān)鍵詞：酶抑制率法；達元DY-5000；托普NY-16D；農(nóng)藥殘留檢測儀

中圖分類號：S481.8 文獻標識碼：A 文章編號：2095-6835（2014）15-0062-02

蔬菜、水果中殘留的農(nóng)藥會危害食用者的身體健康，確保人民群眾舌尖上的安全是政府食品質(zhì)量安全監(jiān)管的重要職責。蔬菜水果農(nóng)藥殘留檢測儀適用于各級食品安全監(jiān)測部門、蔬菜生產(chǎn)基地、蔬菜批發(fā)市場和食品超市的蔬菜、水果農(nóng)藥殘留檢測，通過農(nóng)藥殘留檢測儀對農(nóng)藥殘留含量進行科學的檢測，并根據(jù)數(shù)據(jù)判斷蔬菜的農(nóng)藥殘留量是否超標，是當前確保食品安全的重要環(huán)節(jié)。近年來，基于酶抑制率法—比色法的原理，開發(fā)了適用于蔬菜、水果農(nóng)藥殘留檢測的儀器，具有快速、簡便、靈敏和成本低等優(yōu)點，深受廣大基層監(jiān)督部門、生產(chǎn)基地和市場的歡迎。我市在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管檢測中，配備了達元DY-5000和托普NY-16D兩款農(nóng)藥殘留速測儀，經(jīng)過一段時間的使用后，對這兩款儀器的性能有了更好的了解和撐握，現(xiàn)將兩款儀器的使用事項與大家討論分享，以便更好地服務(wù)于檢測工作。

現(xiàn)階段，蔬菜水果農(nóng)藥殘留主要是有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥超標，而對人體造成危害的是農(nóng)藥殘留的總量。農(nóng)藥殘毒速測法正適應(yīng)了以上兩個特點，可以快速檢測上述兩類農(nóng)藥嚴重超標的蔬菜、水果，防止因食用引起的急性中毒；同時，還具有短時間內(nèi)檢測大量樣本、檢測成本低、對檢測人員技術(shù)水平要求低、易于在基層推廣等特點，是現(xiàn)階段我國控制高毒農(nóng)藥殘留的一種有效方法。

酶抑制法是研究最多且相對成熟的一種對部分農(nóng)藥殘留進行快速檢測的技術(shù)，我國已將其列入國家標準《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》（GB/T 5009.199—2003）中，并作為快速檢測農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的方法。光電比色法是用光電比色計測量溶液的吸光度，根據(jù)待測組分溶液吸光度的變化和空白溶液吸光度的變化計算濃度，具有較高準確度，是一種非常經(jīng)典的分析方法。

1 酶抑制率—比色法農(nóng)殘速測的工作原理

有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶或丁酰膽堿酯酶的正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常條件下，乙酰膽堿酯酶（AchE）或丁酰膽堿酯酶（BuChE）能催化神經(jīng)傳導代謝產(chǎn)物類似物——碘化硫代乙酰膽堿（ATCI）或碘化硫代丁酰膽堿（BTCI）水解，水解產(chǎn)物與顯色劑二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用農(nóng)殘測試儀在410 nm波長比色法測定固定時間內(nèi)空白對照溶液和樣品溶液的吸光度的變化值（△A），計算酶抑制率，可以判斷出樣品中有機磷或氨基甲酸酯類中農(nóng)藥的殘留劑量。

2 兩款儀器的共同點

2.1 儀器特點

兩款儀器都是由光學、機械、電子軟件等部分組成，可以同時檢測多個樣品，自動檢測、記錄、計算和顯示最終抑制率和濃度值；內(nèi)置樣品測試數(shù)據(jù)庫可連接電腦進行測試、分析、匯總；置熱敏打印，方便快捷；中文菜單操作人機對話界面便于輸入操作，步驟簡單、明了。

2.2 試劑開放，無特定限制

試劑可以選用儀器廠家的商品化小包裝專供試劑。

試劑的儲存和使用要求有：①緩沖劑。粉狀物常溫存放，蒸餾水溶解制成pH 8.0提取液。②顯色劑。5，5二硫代雙（2-硝基苯甲酸）和碳酸氫鈉以一定比例混合，用緩沖液溶解，在0～4 ℃的環(huán)境下保存期較長。③底物。碘化硫代乙酰膽堿，粉狀在0～4 ℃的環(huán)境下保存期在半年以上，加蒸餾水溶解在0～4 ℃的環(huán)境下保存期為7 d。④酶。粉狀的膽堿酯酶冷凍儲存，溶解后應(yīng)儲存在0～4 ℃的環(huán)境下冷藏，一周內(nèi)用完。

2.3 計算公式

采用兩點法檢測，相比于終點法，兩點法可以檢出本身帶有較深顏色的農(nóng)產(chǎn)品，受干擾程度較小。檢測時通過測定固定時間段對照和樣品溶液吸光度變化計算抑制率，公式如下：

抑制率=（△A對照-△A樣品）/ △A對照×100%. （1）

檢測結(jié)果不會出現(xiàn)負值，但需要注意審核0抑制率數(shù)據(jù)。

3 兩款儀器的不同點

3.1 試劑用量方面

DY-5000儀器取2 g蔬果樣品+20 mL緩沖液進行浸提；樣液比率為1︰10；測試時，180 uL緩沖液（檢測樣品時則為浸提液）+10 uL酶液+10 uL顯色劑，靜置10 min+10 uL底物，立即測試；反應(yīng)物濃度，例如以顯色劑計算，為10 uL/210 uL。

NY-16D儀器取2 g蔬果樣品+10 mL緩沖液進行浸提；樣液比率為1︰5；測試時，2.5 mL緩沖液（檢測樣品時則為浸提液）+100 uL酶液+100 uL顯色劑，靜置15 min+100 uL底物，立即測試；反應(yīng)物濃度，以顯色劑計算，為100 uL/2 800 uL。

3.2 測試反應(yīng)時間不同

DY-5000儀器的標準反應(yīng)測試時間為60 s，而NY-16D儀器的標準反應(yīng)測試時間180 s。則在公式（1）中：△A對照表示對照溶液反應(yīng)60 s/180 s的吸光度變化值；△A樣品表示樣品溶液反應(yīng)60 s/180 s的吸光度變化值；

3.3 空白吸光值作用不同

DY-5000儀器的空白吸光值△A在0.4～0.8之間，且必須>0.4.每進一批次樣品都需要同時做雙孔空白檢測，并作為本批次樣品的參照標準。這樣能夠較好地克服儀器工作點漂移的影響。

NY-16D儀器的空白吸光值△A在0.3以上，即采用國標標準。必須先單獨進行空白檢測，作為不同批次樣品的空白參考值參與計算；也可隨時根據(jù)儀器狀況進行空白測試，作為下批次空白值參與計算。這樣可以在保證空白檢測值準確的情況下進行樣品檢測，一般不會使批次樣品檢測數(shù)據(jù)作廢。

3.4 樣品重復(fù)檢測方式不同

DY-5000儀器可默認雙孔檢測，自動設(shè)立重復(fù)，并計算平均值，能通過平行測定的結(jié)果一致性比對判斷兩次結(jié)果的可信度。

NY-16D儀器的單孔檢測需要手動設(shè)立重復(fù)和計算平均值。

摘 要：達元DY-5000和托普NY-16D兩款酶抑制率法—比色法農(nóng)殘速測儀用于農(nóng)產(chǎn)品蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的檢測，具有檢測靈敏度高、重現(xiàn)性較好、檢測速度快和成本低等優(yōu)勢。通過對比、研究兩款儀器在工作原理、操作步驟和檢測結(jié)果判定上的不同之處，使其能更好地服務(wù)于農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測工作。

關(guān)鍵詞：酶抑制率法；達元DY-5000；托普NY-16D；農(nóng)藥殘留檢測儀

中圖分類號：S481.8 文獻標識碼：A 文章編號：2095-6835（2014）15-0062-02

蔬菜、水果中殘留的農(nóng)藥會危害食用者的身體健康，確保人民群眾舌尖上的安全是政府食品質(zhì)量安全監(jiān)管的重要職責。蔬菜水果農(nóng)藥殘留檢測儀適用于各級食品安全監(jiān)測部門、蔬菜生產(chǎn)基地、蔬菜批發(fā)市場和食品超市的蔬菜、水果農(nóng)藥殘留檢測，通過農(nóng)藥殘留檢測儀對農(nóng)藥殘留含量進行科學的檢測，并根據(jù)數(shù)據(jù)判斷蔬菜的農(nóng)藥殘留量是否超標，是當前確保食品安全的重要環(huán)節(jié)。近年來，基于酶抑制率法—比色法的原理，開發(fā)了適用于蔬菜、水果農(nóng)藥殘留檢測的儀器，具有快速、簡便、靈敏和成本低等優(yōu)點，深受廣大基層監(jiān)督部門、生產(chǎn)基地和市場的歡迎。我市在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管檢測中，配備了達元DY-5000和托普NY-16D兩款農(nóng)藥殘留速測儀，經(jīng)過一段時間的使用后，對這兩款儀器的性能有了更好的了解和撐握，現(xiàn)將兩款儀器的使用事項與大家討論分享，以便更好地服務(wù)于檢測工作。

現(xiàn)階段，蔬菜水果農(nóng)藥殘留主要是有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥超標，而對人體造成危害的是農(nóng)藥殘留的總量。農(nóng)藥殘毒速測法正適應(yīng)了以上兩個特點，可以快速檢測上述兩類農(nóng)藥嚴重超標的蔬菜、水果，防止因食用引起的急性中毒；同時，還具有短時間內(nèi)檢測大量樣本、檢測成本低、對檢測人員技術(shù)水平要求低、易于在基層推廣等特點，是現(xiàn)階段我國控制高毒農(nóng)藥殘留的一種有效方法。

酶抑制法是研究最多且相對成熟的一種對部分農(nóng)藥殘留進行快速檢測的技術(shù)，我國已將其列入國家標準《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》（GB/T 5009.199—2003）中，并作為快速檢測農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的方法。光電比色法是用光電比色計測量溶液的吸光度，根據(jù)待測組分溶液吸光度的變化和空白溶液吸光度的變化計算濃度，具有較高準確度，是一種非常經(jīng)典的分析方法。

1 酶抑制率—比色法農(nóng)殘速測的工作原理

有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶或丁酰膽堿酯酶的正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常條件下，乙酰膽堿酯酶（AchE）或丁酰膽堿酯酶（BuChE）能催化神經(jīng)傳導代謝產(chǎn)物類似物——碘化硫代乙酰膽堿（ATCI）或碘化硫代丁酰膽堿（BTCI）水解，水解產(chǎn)物與顯色劑二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用農(nóng)殘測試儀在410 nm波長比色法測定固定時間內(nèi)空白對照溶液和樣品溶液的吸光度的變化值（△A），計算酶抑制率，可以判斷出樣品中有機磷或氨基甲酸酯類中農(nóng)藥的殘留劑量。

2 兩款儀器的共同點

2.1 儀器特點

兩款儀器都是由光學、機械、電子軟件等部分組成，可以同時檢測多個樣品，自動檢測、記錄、計算和顯示最終抑制率和濃度值；內(nèi)置樣品測試數(shù)據(jù)庫可連接電腦進行測試、分析、匯總；置熱敏打印，方便快捷；中文菜單操作人機對話界面便于輸入操作，步驟簡單、明了。

2.2 試劑開放，無特定限制

試劑可以選用儀器廠家的商品化小包裝專供試劑。

試劑的儲存和使用要求有：①緩沖劑。粉狀物常溫存放，蒸餾水溶解制成pH 8.0提取液。②顯色劑。5，5二硫代雙（2-硝基苯甲酸）和碳酸氫鈉以一定比例混合，用緩沖液溶解，在0～4 ℃的環(huán)境下保存期較長。③底物。碘化硫代乙酰膽堿，粉狀在0～4 ℃的環(huán)境下保存期在半年以上，加蒸餾水溶解在0～4 ℃的環(huán)境下保存期為7 d。④酶。粉狀的膽堿酯酶冷凍儲存，溶解后應(yīng)儲存在0～4 ℃的環(huán)境下冷藏，一周內(nèi)用完。

2.3 計算公式

采用兩點法檢測，相比于終點法，兩點法可以檢出本身帶有較深顏色的農(nóng)產(chǎn)品，受干擾程度較小。檢測時通過測定固定時間段對照和樣品溶液吸光度變化計算抑制率，公式如下：

抑制率=（△A對照-△A樣品）/ △A對照×100%. （1）

檢測結(jié)果不會出現(xiàn)負值，但需要注意審核0抑制率數(shù)據(jù)。

3 兩款儀器的不同點

3.1 試劑用量方面

DY-5000儀器取2 g蔬果樣品+20 mL緩沖液進行浸提；樣液比率為1︰10；測試時，180 uL緩沖液（檢測樣品時則為浸提液）+10 uL酶液+10 uL顯色劑，靜置10 min+10 uL底物，立即測試；反應(yīng)物濃度，例如以顯色劑計算，為10 uL/210 uL。

NY-16D儀器取2 g蔬果樣品+10 mL緩沖液進行浸提；樣液比率為1︰5；測試時，2.5 mL緩沖液（檢測樣品時則為浸提液）+100 uL酶液+100 uL顯色劑，靜置15 min+100 uL底物，立即測試；反應(yīng)物濃度，以顯色劑計算，為100 uL/2 800 uL。

3.2 測試反應(yīng)時間不同

DY-5000儀器的標準反應(yīng)測試時間為60 s，而NY-16D儀器的標準反應(yīng)測試時間180 s。則在公式（1）中：△A對照表示對照溶液反應(yīng)60 s/180 s的吸光度變化值；△A樣品表示樣品溶液反應(yīng)60 s/180 s的吸光度變化值；

3.3 空白吸光值作用不同

DY-5000儀器的空白吸光值△A在0.4～0.8之間，且必須>0.4.每進一批次樣品都需要同時做雙孔空白檢測，并作為本批次樣品的參照標準。這樣能夠較好地克服儀器工作點漂移的影響。

NY-16D儀器的空白吸光值△A在0.3以上，即采用國標標準。必須先單獨進行空白檢測，作為不同批次樣品的空白參考值參與計算；也可隨時根據(jù)儀器狀況進行空白測試，作為下批次空白值參與計算。這樣可以在保證空白檢測值準確的情況下進行樣品檢測，一般不會使批次樣品檢測數(shù)據(jù)作廢。

3.4 樣品重復(fù)檢測方式不同

DY-5000儀器可默認雙孔檢測，自動設(shè)立重復(fù)，并計算平均值，能通過平行測定的結(jié)果一致性比對判斷兩次結(jié)果的可信度。

NY-16D儀器的單孔檢測需要手動設(shè)立重復(fù)和計算平均值。