釀酒葡萄皮渣花色苷的提取工藝

尹禮國(guó)等

摘要：通過(guò)單因子試驗(yàn)與正交試驗(yàn)，對(duì)釀酒葡萄皮渣花色苷乙醇溶液提取工藝條件進(jìn)行了研究，確定最優(yōu)工藝條件為：料液比1 g ∶30 mL，提取溶劑的乙醇濃度和pH值分別為60%、1.0，提取溫度和時(shí)間分別為80 ℃、80 min，花色苷提取率為0.168 4%，產(chǎn)品得率為2.57%，產(chǎn)品花色苷含量為6.55%。產(chǎn)品呈紫褐色，易溶于pH值為1.0的60%乙醇溶液，溶于該溶液后呈紫紅色，色澤鮮艷，可進(jìn)一步分離純化得到純度更高的產(chǎn)品，開發(fā)為食品著色劑和抗氧化劑。

關(guān)鍵詞：釀酒葡萄皮渣；花色苷；提取工藝；純化

中圖分類號(hào)： TS201.1文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2014）10-0260-03

收稿日期：2013-12-05

基金項(xiàng)目：四川省宜賓市科技重點(diǎn)項(xiàng)目（編號(hào)：200801007）。

作者簡(jiǎn)介：尹禮國(guó)（1979—），男，湖北黃石人，博士研究生，副教授，主要從事食品生物技術(shù)研究。E-mail：156948727@qq.com。 花色苷由花色素和糖基以糖苷鍵結(jié)合而成，屬于黃酮類化合物，在食品、水果、蔬菜中廣泛存在，隨著pH值的變化能呈現(xiàn)紅、紫紅、黃至藍(lán)等不同顏色，可滿足人們對(duì)食物色澤的多種需要[1]?，F(xiàn)代科學(xué)研究表明，花色苷能夠較好地清除自由基，抑制低密度脂蛋白氧化，具有抗氧化、抗癌、抗動(dòng)脈硬化、抗衰老、增強(qiáng)免疫力及心血管保護(hù)作用，可預(yù)防冠心病、高血脂、動(dòng)脈粥樣硬化、胃黏膜損傷、白內(nèi)障等疾病[2-7]。由于合成抗氧化劑常常對(duì)身體健康有害，消費(fèi)者對(duì)來(lái)自天然產(chǎn)物的抗氧化劑的需求量日益增大[8]?；ㄉ占染哂辛己玫闹阅埽志哂辛己玫目寡趸耘c生理功能，在食品領(lǐng)域的應(yīng)用具有很好的前景。據(jù)報(bào)道，我國(guó)2007年釀酒葡萄年產(chǎn)量超過(guò)200萬(wàn)t，產(chǎn)酒約66.5萬(wàn)t，其中約有70%的為紅葡萄酒，釀酒葡萄出渣率約為10%，其中33%為葡萄皮，約有 6.9萬(wàn)t/年葡萄皮被丟棄[9]。葡萄皮含有豐富的花色苷，且種類豐富[10-11]，葡萄皮色素可廣泛應(yīng)用于果醬、酸性飲料、果酒中，具有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、安全無(wú)毒副作用等優(yōu)點(diǎn)[7]，從中提取花色苷具有較好的開發(fā)前景。筆者采用單因子與正交試驗(yàn)開展了釀酒葡萄皮渣花色苷提取工藝研究，對(duì)進(jìn)一步綜合利用釀酒葡萄皮渣進(jìn)行了討論。

1材料與方法

1.1材料、試劑與儀器

釀酒葡萄皮渣由河北昌黎鳳凰酒莊提供；氫氧化鈉、乙醇、鹽酸、檸檬酸、檸檬酸鈉均為分析純。RE-52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）、T6新世紀(jì)紫外可見分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）、pHS-3C酸度計(jì)（上海理達(dá)儀器廠）、T-214電子分析天平（北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）、DHG-905 鼓風(fēng)干燥箱（上海齊欣科學(xué)儀器有限公司）、SHB-B95真空泵（河南鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）、電熱恒溫水浴鍋（北京光明醫(yī)療儀器廠）。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1花色苷含量的測(cè)定花色苷含量的測(cè)定采用pH值示差法，其具體步驟為：參照文獻(xiàn)[12]，配制不同pH值的緩沖液；吸取適量體積花色苷溶液于100 mL燒杯中（吸取體積以稀釋后D521 nm在0.2～0.8為宜），用檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液調(diào)pH值至3.0，轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，用pH值為 30的緩沖液定容，得樣品待測(cè)液；分別取1 mL待測(cè)液于2個(gè)10 mL比色管中，各加入9 mL pH值為1.0、4.5的緩沖液，40 ℃ 水浴20 min，使其顯色穩(wěn)定，采用光程為1 cm的比色皿在521、700 nm下測(cè)定吸光度，根據(jù)下式計(jì)算提取液中花色苷含量：

80 ℃，提取時(shí)間為80 min。準(zhǔn)確稱取10.00 g葡萄皮渣粉，開展驗(yàn)證試驗(yàn)，結(jié)果表明，在最優(yōu)條件下花色苷的提取率為0168 4%，優(yōu)于其他條件，確定此工藝參數(shù)最優(yōu)。稱取10份葡萄皮渣粉，分別以此工藝參數(shù)進(jìn)行提取，將提取液合并后真空濃縮，在50 ℃條件下用鼓風(fēng)干燥箱干燥得紫褐色粉末 257 g，產(chǎn)品中花色苷含量為6.55%。

3結(jié)論

通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)確定從釀酒葡萄皮渣中提取花色苷的最優(yōu)條件是：將葡萄皮渣打成粉末后，用料液比為 1 g ∶30 mL、pH值為1.0的60%乙醇在80 ℃下水浴浸提 80 min，花色苷提取率為0.168 4%，產(chǎn)品得率為2.57%，產(chǎn)品中花色苷含量為6.55%?；ㄉ兆鳛樘烊簧?，在酸性條件下有良好的穩(wěn)定性，具有降低肝臟及血清中脂肪含量、抗氧化、抗腫瘤、延遲血小板凝集等多種生理和藥用活性功能，在食品、化妝品、醫(yī)藥領(lǐng)域有很大的應(yīng)用前景。開展釀酒葡萄皮渣中花色苷的提取，可變廢為寶，促進(jìn)葡萄酒行業(yè)的健康發(fā)展。乙醇溶液萃取法具有設(shè)備要求低、毒副作用小、易產(chǎn)業(yè)化等優(yōu)點(diǎn)。乙醇溶液提取法制備的產(chǎn)品中花色苷純度較低，能進(jìn)一步提高產(chǎn)品附加值，研究花色苷的種類與功能，可采用大孔樹脂柱層析、溶劑萃取、膜過(guò)濾等分離純化技術(shù)開展純化工藝研究，開發(fā)綠色健康的食品著色劑與抗氧化劑。為促進(jìn)人們對(duì)花色苷綜合利用水平的提高，了解其生理功能，需進(jìn)一步開展高效液相色譜、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)技術(shù)對(duì)提取物中花色苷種類及含量進(jìn)行定性定量分析，開展花色苷精制產(chǎn)品的抗氧化性、抗菌性、降膽固醇、預(yù)防心血管系統(tǒng)、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)等功能研究。

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