金烏骨通膠囊HPLC指紋圖譜研究

徐作剛+段萍+茅向軍等

【摘要】目的：建立金烏骨通膠囊的高效液相色譜指紋圖譜分析方法，為金烏骨通膠囊藥品質(zhì)量評價積累數(shù)據(jù)。方法：采用反相高效液相色譜方法，以安捷倫Eclipse plus C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動相為乙腈（A）-1%冰醋酸水溶液（B），梯度洗脫程序為：0～15min，9～10%A，流速1.0ml/min；15～65min，10～40%A，流速1.0ml/min；65～115min，40～70%A，流速1.5ml/min；115～125min，70%A，流速1.5ml/min；檢測波長為0～60min為254nm，60～85min為380nm，85～125min為254nm；洗脫總時間為125min；柱溫30℃；進樣量20μl，進行指紋圖譜研究。結(jié)果：建立金烏骨通膠囊高效液相指紋圖譜，以淫羊藿苷色譜峰為參照峰，確定13個共有峰，共測定29批樣品，樣品指紋圖譜的相似度均大于0.985。結(jié)論：本方法分離效果好，精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性等指標(biāo)均良好，可用于金烏骨通膠囊的產(chǎn)品質(zhì)量控制及市場真?zhèn)纹疯b別。

【關(guān)鍵詞】金烏骨通膠囊；高效液相色譜；指紋圖譜

【中圖分類號】R284.1【文獻標(biāo)志碼】 A【文章編號】1007-8517（2014）22-0008-03

3討論

3.1提取溶劑的選擇比較不同濃度甲醇溶液（20、40、50、60、80、100%）共6種提取溶劑對樣品的提取效率，結(jié)果顯示，甲醇濃度較低時，脂溶性成份提取不佳，反之則水溶性成份提取不佳，且甲醇濃度較高時，色譜峰溶劑效應(yīng)明顯，流出時間較短的色譜峰前伸嚴(yán)重，對分離度影響較大，經(jīng)比較，確定提取溶劑為50%甲醇，此條件下，色譜峰豐富，峰形及分離效果良好。

3.2流動相的選擇比較了乙腈-水、乙腈-醋酸溶液、乙腈-磷酸溶液等多種不同組成、不同梯度溶劑系統(tǒng)。結(jié)果顯示，按1.4項下洗脫溶劑系統(tǒng)實驗得到的圖譜峰形及分離度較好，故確定此梯度系統(tǒng)為流動相系統(tǒng)。

3.3檢測波長的選擇使用DAD檢測器全波長掃描功能，在210～600nm波長范圍內(nèi)進行掃描，得到全光譜色譜圖。根據(jù)3D譜圖，確定檢測波長為：0～60min，254nm；60～85min，380nm；85～125min，254nm。在此條件下，兼顧各峰強度，譜峰最為豐富。

3.4實驗注意事項流出時間在75min附近的姜黃素類化合物具光敏性[3]，實驗中發(fā)現(xiàn)其相對峰面積比值隨時間呈緩慢下降趨勢，因此實驗過程應(yīng)避光操作以控制其降解速率，獲得可靠數(shù)據(jù)。

3.5實驗結(jié)果連續(xù)4年共29批樣品的指紋圖譜相似度較高，穩(wěn)定性、精密度和重現(xiàn)性好，指紋圖譜具有一定特征性，可為金烏骨通膠囊的內(nèi)在質(zhì)量提供可靠的參考依據(jù)。

參考文獻

[1]WS-10140（ZD-0140）-2002.國家藥品標(biāo)準(zhǔn)（試行）頒布件[S].

[2]何佳，李懿，韋建榮.宮血寧膠囊HPLC指紋圖譜研究[J].中成藥，2011，33（7）：1098-1101.

[3]王雪梅，陳利華，施文婷.姜黃素類化合物的光穩(wěn)定性研究[J].安徽大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2012，36（3）：73-78.

（收稿日期：2014.09.16）

【摘要】目的：建立金烏骨通膠囊的高效液相色譜指紋圖譜分析方法，為金烏骨通膠囊藥品質(zhì)量評價積累數(shù)據(jù)。方法：采用反相高效液相色譜方法，以安捷倫Eclipse plus C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動相為乙腈（A）-1%冰醋酸水溶液（B），梯度洗脫程序為：0～15min，9～10%A，流速1.0ml/min；15～65min，10～40%A，流速1.0ml/min；65～115min，40～70%A，流速1.5ml/min；115～125min，70%A，流速1.5ml/min；檢測波長為0～60min為254nm，60～85min為380nm，85～125min為254nm；洗脫總時間為125min；柱溫30℃；進樣量20μl，進行指紋圖譜研究。結(jié)果：建立金烏骨通膠囊高效液相指紋圖譜，以淫羊藿苷色譜峰為參照峰，確定13個共有峰，共測定29批樣品，樣品指紋圖譜的相似度均大于0.985。結(jié)論：本方法分離效果好，精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性等指標(biāo)均良好，可用于金烏骨通膠囊的產(chǎn)品質(zhì)量控制及市場真?zhèn)纹疯b別。

【關(guān)鍵詞】金烏骨通膠囊；高效液相色譜；指紋圖譜

【中圖分類號】R284.1【文獻標(biāo)志碼】 A【文章編號】1007-8517（2014）22-0008-03

3討論

3.1提取溶劑的選擇比較不同濃度甲醇溶液（20、40、50、60、80、100%）共6種提取溶劑對樣品的提取效率，結(jié)果顯示，甲醇濃度較低時，脂溶性成份提取不佳，反之則水溶性成份提取不佳，且甲醇濃度較高時，色譜峰溶劑效應(yīng)明顯，流出時間較短的色譜峰前伸嚴(yán)重，對分離度影響較大，經(jīng)比較，確定提取溶劑為50%甲醇，此條件下，色譜峰豐富，峰形及分離效果良好。

3.2流動相的選擇比較了乙腈-水、乙腈-醋酸溶液、乙腈-磷酸溶液等多種不同組成、不同梯度溶劑系統(tǒng)。結(jié)果顯示，按1.4項下洗脫溶劑系統(tǒng)實驗得到的圖譜峰形及分離度較好，故確定此梯度系統(tǒng)為流動相系統(tǒng)。

3.3檢測波長的選擇使用DAD檢測器全波長掃描功能，在210～600nm波長范圍內(nèi)進行掃描，得到全光譜色譜圖。根據(jù)3D譜圖，確定檢測波長為：0～60min，254nm；60～85min，380nm；85～125min，254nm。在此條件下，兼顧各峰強度，譜峰最為豐富。

3.4實驗注意事項流出時間在75min附近的姜黃素類化合物具光敏性[3]，實驗中發(fā)現(xiàn)其相對峰面積比值隨時間呈緩慢下降趨勢，因此實驗過程應(yīng)避光操作以控制其降解速率，獲得可靠數(shù)據(jù)。

3.5實驗結(jié)果連續(xù)4年共29批樣品的指紋圖譜相似度較高，穩(wěn)定性、精密度和重現(xiàn)性好，指紋圖譜具有一定特征性，可為金烏骨通膠囊的內(nèi)在質(zhì)量提供可靠的參考依據(jù)。

參考文獻

[1]WS-10140（ZD-0140）-2002.國家藥品標(biāo)準(zhǔn)（試行）頒布件[S].

[2]何佳，李懿，韋建榮.宮血寧膠囊HPLC指紋圖譜研究[J].中成藥，2011，33（7）：1098-1101.

[3]王雪梅，陳利華，施文婷.姜黃素類化合物的光穩(wěn)定性研究[J].安徽大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2012，36（3）：73-78.

（收稿日期：2014.09.16）

【摘要】目的：建立金烏骨通膠囊的高效液相色譜指紋圖譜分析方法，為金烏骨通膠囊藥品質(zhì)量評價積累數(shù)據(jù)。方法：采用反相高效液相色譜方法，以安捷倫Eclipse plus C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動相為乙腈（A）-1%冰醋酸水溶液（B），梯度洗脫程序為：0～15min，9～10%A，流速1.0ml/min；15～65min，10～40%A，流速1.0ml/min；65～115min，40～70%A，流速1.5ml/min；115～125min，70%A，流速1.5ml/min；檢測波長為0～60min為254nm，60～85min為380nm，85～125min為254nm；洗脫總時間為125min；柱溫30℃；進樣量20μl，進行指紋圖譜研究。結(jié)果：建立金烏骨通膠囊高效液相指紋圖譜，以淫羊藿苷色譜峰為參照峰，確定13個共有峰，共測定29批樣品，樣品指紋圖譜的相似度均大于0.985。結(jié)論：本方法分離效果好，精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性等指標(biāo)均良好，可用于金烏骨通膠囊的產(chǎn)品質(zhì)量控制及市場真?zhèn)纹疯b別。

【關(guān)鍵詞】金烏骨通膠囊；高效液相色譜；指紋圖譜

【中圖分類號】R284.1【文獻標(biāo)志碼】 A【文章編號】1007-8517（2014）22-0008-03

3討論

3.1提取溶劑的選擇比較不同濃度甲醇溶液（20、40、50、60、80、100%）共6種提取溶劑對樣品的提取效率，結(jié)果顯示，甲醇濃度較低時，脂溶性成份提取不佳，反之則水溶性成份提取不佳，且甲醇濃度較高時，色譜峰溶劑效應(yīng)明顯，流出時間較短的色譜峰前伸嚴(yán)重，對分離度影響較大，經(jīng)比較，確定提取溶劑為50%甲醇，此條件下，色譜峰豐富，峰形及分離效果良好。

3.2流動相的選擇比較了乙腈-水、乙腈-醋酸溶液、乙腈-磷酸溶液等多種不同組成、不同梯度溶劑系統(tǒng)。結(jié)果顯示，按1.4項下洗脫溶劑系統(tǒng)實驗得到的圖譜峰形及分離度較好，故確定此梯度系統(tǒng)為流動相系統(tǒng)。

3.3檢測波長的選擇使用DAD檢測器全波長掃描功能，在210～600nm波長范圍內(nèi)進行掃描，得到全光譜色譜圖。根據(jù)3D譜圖，確定檢測波長為：0～60min，254nm；60～85min，380nm；85～125min，254nm。在此條件下，兼顧各峰強度，譜峰最為豐富。

3.4實驗注意事項流出時間在75min附近的姜黃素類化合物具光敏性[3]，實驗中發(fā)現(xiàn)其相對峰面積比值隨時間呈緩慢下降趨勢，因此實驗過程應(yīng)避光操作以控制其降解速率，獲得可靠數(shù)據(jù)。

3.5實驗結(jié)果連續(xù)4年共29批樣品的指紋圖譜相似度較高，穩(wěn)定性、精密度和重現(xiàn)性好，指紋圖譜具有一定特征性，可為金烏骨通膠囊的內(nèi)在質(zhì)量提供可靠的參考依據(jù)。

參考文獻

[1]WS-10140（ZD-0140）-2002.國家藥品標(biāo)準(zhǔn)（試行）頒布件[S].

[2]何佳，李懿，韋建榮.宮血寧膠囊HPLC指紋圖譜研究[J].中成藥，2011，33（7）：1098-1101.

[3]王雪梅，陳利華，施文婷.姜黃素類化合物的光穩(wěn)定性研究[J].安徽大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2012，36（3）：73-78.

（收稿日期：2014.09.16）