不同因素對(duì)魔芋愈傷組織誘導(dǎo)及增殖分化的影響

胡選萍

摘要：以清江花魔芋1號(hào)為試材，分析了不同因素對(duì)魔芋（Amorphophallus）愈傷組織誘導(dǎo)與增殖分化的影響。結(jié)果表明，培養(yǎng)基中激素配比為MS + 2.0 mg/L NAA + 1.0 mg/L 6-BA或MS + 2.0 mg/L 2，4-D +0.5 mg/L KT或MS + 2.0 mg/L 2，4-D + 1.0 mg/L KT時(shí)，均能獲得較高的愈傷組織誘導(dǎo)率;4種外植體愈傷組織誘導(dǎo)率之間存在差異顯著，誘導(dǎo)率大小依次為鱗片>球莖>葉片>根段;添加活性炭（AC）可明顯增強(qiáng)愈傷組織誘導(dǎo)效果;在MS + 2.0 mg/L TDZ +0.1 mg/L NAA培養(yǎng)基上愈傷組織分化形成不定芽的效果相對(duì)較好，分化率達(dá)96.15%，分化系數(shù)達(dá)9.52。

關(guān)鍵詞：魔芋（Amorphophallus）;愈傷組織誘導(dǎo);分化

中圖分類號(hào)：Q939 ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A ? ? ? ?文章編號(hào)：0439-8114（2014）21-5288-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.21.062

Effect of Different Culture Factors on Callus Induction and Differentiation

about Amorphophallus

HU Xuan-ping1，2

（1. Shaanxi University of Technology，Hanzhong 723000，Shaanxi， China;

2.Shaanxi Key Laboratory of Bio-resources，Hanzhong 723000，Shaanxi，China）

Abstract：The effect that different culture factors exerted on callus induction and differentiation of Amorphophallus were researched. The results showed that when culture conditions were MS + 2.0 mg/L NAA + 1.0 mg/L 6-BA or MS + 2.0 mg/L 2，4-D + 0.5 mg/L KT or MS + 2.0 mg/L 2，4-D + 1.0 mg/L KT， optimal callus induction rate were obtained. Four different explants had significant influence on callus induction and the rate of induction was coleoptile>corm>lear>root. Moreover， AC was able to enhance callus induction rate. Besides， the effect of buds differentiation was optimum when the culture condition was MS+2.0 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA， with the rate and the ratio of differentiation being 96.15% and 9.52.

Key words： Amorphophallus;callus induction;differentiation

魔芋（Amorphophallus）是天南星科（Araceae）魔芋屬（Amorphophallus Blume.）多年生草本植物，具有發(fā)達(dá)的地下塊莖，富含果膠、生物堿、淀粉、17種氨基酸和多種微量元素[1]。魔芋塊莖可作為中草藥，其主要活性成分是魔芋葡甘聚糖（Konjac glucomannan，KGM），具有降血糖、血脂和膽固醇，治療糖尿病，抗腫瘤和免疫作用[2-5]，在醫(yī)藥方面具有廣泛的利用價(jià)值和開(kāi)發(fā)價(jià)值。陜南地區(qū)魔芋種植歷史悠久，為國(guó)內(nèi)最早發(fā)展魔芋產(chǎn)業(yè)的主產(chǎn)區(qū)之一。傳統(tǒng)魔芋生產(chǎn)栽培中，通常用主球莖著生的根莖進(jìn)行繁殖，繁殖系數(shù)低，易感病腐爛，嚴(yán)重地阻礙了魔芋的推廣種植與在醫(yī)藥食品領(lǐng)域的產(chǎn)品開(kāi)發(fā)[6，7]。由于愈傷組織是未分化的具有分生能力的原始細(xì)胞團(tuán)，通過(guò)對(duì)愈傷組織進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化和化學(xué)誘導(dǎo)可較快獲得新品種。本研究以魔芋為試驗(yàn)材料，分析外植體類型、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)等因素對(duì)魔芋愈傷組織誘導(dǎo)與增殖分化的影響，為促進(jìn)魔芋優(yōu)質(zhì)種質(zhì)篩選與快速繁育及其在醫(yī)藥、食用領(lǐng)域產(chǎn)品的深入開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料、試劑與儀器

以陜南當(dāng)?shù)厍褰ㄓ?號(hào)品種為試材，魔芋原球莖由陜西漢中洋縣新成魔芋菌業(yè)有限公司提供。將魔芋球莖室溫保存于濕潤(rùn)沙土中約3個(gè)月，待頂芽長(zhǎng)至2～3 cm，球莖表面長(zhǎng)出豐富的白色不定根，備用。

NAA、6-BA、2，4-D、KT與TDZ均為分析純;MS培養(yǎng)基，自配。

SW-CJ-2D型雙人單面潔凈工作臺(tái)，上海蘇凈實(shí)業(yè)有限公司;LDZX-50FBS型立式壓力滅菌器，上海申安醫(yī)療器械公司。

1.2 ?試驗(yàn)方法

1.2.1 ?材料預(yù)處理 ?選擇生長(zhǎng)健壯、大小一致的魔芋球莖，用自來(lái)水沖洗掉表面的雜質(zhì)，將根、球莖與頂芽（外包鱗片）分離開(kāi)來(lái)，分別在流水下沖洗1～2 h。在超凈工作臺(tái)將球莖先用75%乙醇漂洗30 s，再用0.1%升汞浸泡20 min，處理過(guò)程中不斷搖動(dòng)，然后用無(wú)菌水漂洗4～5次，每次2～3 min，在鋪有濾紙的培養(yǎng)皿中將其切分為0.5 cm3左右的切塊。頂芽與不定根同樣采用上述方法表面消毒，不同之處在于0.1%升汞浸泡12 min;消毒好之后，將不定根切分為長(zhǎng)度約0.5 cm的切段，無(wú)菌條件下剝開(kāi)頂芽周圍包被的鱗片，將其切分為長(zhǎng)寬各約0.5 cm的切塊;頂芽接種至MS+0.1 mg/L 6-BA +0.2 mg/L IBA的培養(yǎng)基中培養(yǎng)約20 d，待葉片展開(kāi)長(zhǎng)大后，切分為長(zhǎng)寬各0.5 cm的切塊，備用。endprint

1.2.2 ?培養(yǎng)基配制 ? 分別在MS培養(yǎng)基中加入不同劑量的NAA、6-BA、2，4-D、KT與TDZ，活性炭（AC）配制試驗(yàn)所需的培養(yǎng)基（表1）。各培養(yǎng)基中均加入3.0%蔗糖、0.6%瓊脂粉、0.1% PVP，調(diào)整pH為 5.8～6.0，在121 ℃、108 kPa下滅菌20 min。

1.2.3 ?愈傷組織誘導(dǎo) ?分別在1～8號(hào)培養(yǎng)基中接入準(zhǔn)備好的球莖、鱗片、根段與葉片4種類型的外植體，在9號(hào)與10號(hào)培養(yǎng)基中僅接入球莖外植體，置于溫度（25±2） ℃、相對(duì)濕度50%～60%，散射光條件下培養(yǎng)30 d，觀察愈傷組織的形態(tài)，統(tǒng)計(jì)愈傷組織誘導(dǎo)結(jié)果。

1.2.4 ?愈傷組織增殖分化 ? 將愈傷組織切分為長(zhǎng)寬約0.5 cm的切塊，接種至2號(hào)培養(yǎng)基進(jìn)行繼代培養(yǎng)，連續(xù)繼代2個(gè)周期后，選擇生長(zhǎng)旺盛、顏色呈淡粉或白色的愈傷組織，將其切分為約0.5 cm3的切塊，分別接種到2號(hào)、11號(hào)與12號(hào)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件設(shè)為光照時(shí)間（晝/夜）16 h/8 h，光照度1 500～2 000 lx，（25±2） ℃、相對(duì)濕度50%～60%條件下培養(yǎng)30 d，觀察愈傷組織的增殖與分化情況。

1.3 ?測(cè)量指標(biāo)與統(tǒng)計(jì)方法

接種15 d后，去除污染與壞死材料，統(tǒng)計(jì)無(wú)菌外植體數(shù)（視為接種量），接種30 d后統(tǒng)計(jì)誘導(dǎo)出愈傷組織的外植體數(shù)（視為誘導(dǎo)數(shù)），計(jì)算誘導(dǎo)率。誘導(dǎo)率=誘導(dǎo)數(shù)/接種外植體總數(shù)×100%。接種30 d后統(tǒng)計(jì)分化出芽的愈傷組織數(shù)（視為分化數(shù)），統(tǒng)計(jì)每個(gè)處理形成的不定芽總數(shù)，分別計(jì)算分化率與分化系數(shù)。分化率=分化數(shù)/接種量×100%，分化系數(shù)=不定芽總數(shù)/接種量。

2 ?結(jié)果與分析

2.1 ?不同因素對(duì)魔芋愈傷組織誘導(dǎo)的影響

2.1.1 ?不同激素對(duì)魔芋愈傷組織誘導(dǎo)的影響 ?培養(yǎng)基中激素種類與組配不同，愈傷組織誘導(dǎo)率之間存在明顯差異（表1）。對(duì)于鱗片外植體，激素NAA與6-BA組合配比（1～4號(hào)培養(yǎng)基），當(dāng)培養(yǎng)基中NAA為2.0 mg/L、6-BA為1.0 mg/L時(shí)，愈傷組織的誘導(dǎo)率最高（94.44%），且與其他處理間差異顯著;激素2，4-D與KT組合配比（5～8號(hào)培養(yǎng)基），當(dāng)2，4-D為2.0 mg/L、KT為0.5 mg/L或1.0 mg/L時(shí)，愈傷組織的誘導(dǎo)率相對(duì)較高，可達(dá)91.43%與93.33%，且與其他處理間差異顯著。從總體上分析，NAA與6-BA、2，4-D與KT兩種激素組配方式，均能較好地誘導(dǎo)魔芋外植體脫分化形成愈傷組織，且在誘導(dǎo)率上差異并不明顯。

2.1.2 ?不同外植體對(duì)魔芋愈傷組織誘導(dǎo)的影響 ?4種外植體均能誘導(dǎo)出愈傷組織，但不同外植體之間愈傷誘導(dǎo)率差異較大，且不同外植體愈傷發(fā)生方式也存在差異（表2）。結(jié)果表明，經(jīng)方差分析，除根（平均誘導(dǎo)率為3.01%）與葉片（平均誘導(dǎo)率為18.76%）之間無(wú)顯著差異外，其他不同外植體愈傷組織誘導(dǎo)率之間差異顯著。4種外植體中，以鱗片的平均誘導(dǎo)率最高，為82.74%，球莖次之，為49.37%。由此可見(jiàn)，從誘導(dǎo)率角度分析，鱗片是誘導(dǎo)愈傷組織的最佳外植體。

4種外植體愈傷組織的發(fā)生位置、質(zhì)地與形態(tài)等方面也存在明顯不同。球莖外植體愈傷組織多發(fā)生在遠(yuǎn)培養(yǎng)基端切面上，多為粉色或乳白色，結(jié)構(gòu)疏松、生長(zhǎng)速度快，品質(zhì)較好;鱗片內(nèi)表皮處發(fā)生的愈傷組織形態(tài)、顏色、結(jié)構(gòu)、生長(zhǎng)快慢與球莖基本相似，但從切口處、外表皮處發(fā)生的愈傷組織致密堅(jiān)硬、生長(zhǎng)緩慢，不利于繼代培養(yǎng);葉片與根段外植體愈傷組織形成少，生長(zhǎng)慢，且根段在培養(yǎng)過(guò)程中很容易褐變壞死。

2.1.3 ?添加活性炭對(duì)魔芋愈傷組織的影響 ?接種30 d后統(tǒng)計(jì)不同處理的愈傷組織誘導(dǎo)率，分析活性炭對(duì)魔芋愈傷組織誘導(dǎo)的影響。結(jié)果（表3）表明，添加活性碳后，愈傷組織的誘導(dǎo)率明顯增加，平均誘導(dǎo)率由60.42%提高到78.13%，方差分析表明添加活性炭與不添加處理之間存在差異顯著。添加活性炭后外植體褐變減慢，褐變速度降低，而且更有利于愈傷組織的形成，出愈時(shí)間提前5～7 d左右。由此可見(jiàn)，添加AC可增強(qiáng)魔芋愈傷組織的誘導(dǎo)效果。

2.2 ?魔芋愈傷組織的增殖分化

將繼代培養(yǎng)的魔芋愈傷組織接種至相應(yīng)培養(yǎng)基中，7 d左右在愈傷表面形成白色或淡粉色突起，10 d產(chǎn)生芽點(diǎn)，15 d成芽，外面包裹鱗片，鱗片呈白色或淡粉色，芽點(diǎn)在愈傷組織塊上隨機(jī)分布，有些芽點(diǎn)單獨(dú)發(fā)生，有些芽點(diǎn)成簇發(fā)生。培養(yǎng)基中的激素種類與濃度不同，不定芽分化情況存在明顯差異（表4）。

方差分析表明，3種處理?xiàng)l件下愈傷組織增殖分化存在顯著差異，12號(hào)處理分化效果最好，分化率為96.15%，分化系數(shù)為9.52;11號(hào)處理次之，分化率與分化系數(shù)分別為81.48%與3.96;由此可見(jiàn)，TDZ比6-BA更有利于魔芋愈傷組織分化形成不定芽。培養(yǎng)基中添加2.0 mg/L NAA 與0.5 mg/L 6-BA（2號(hào)處理），雖然不定芽誘導(dǎo)率較低（27.78%），但在不定芽形成過(guò)程中，愈傷組織可以同時(shí)增殖，且形成的不定芽長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，由于此處理也是較好的愈傷組織誘導(dǎo)激素配比條件，因此可作為魔芋離體培養(yǎng)中一步成苗的良好培養(yǎng)基。

3 ?討論

研究表明，愈傷組織的誘導(dǎo)發(fā)生受外植體類型、光照條件、植物基因型等諸多因素之間相互作用影響的復(fù)雜過(guò)程，其中植物生長(zhǎng)物質(zhì)對(duì)植物離體培養(yǎng)中的細(xì)胞分化和形態(tài)建成具有明顯的調(diào)節(jié)作用[8]，尤其是生長(zhǎng)素類和細(xì)胞分裂素類的平衡對(duì)于誘導(dǎo)原基的形成非常重要[9，10]。本試驗(yàn)以魔芋為試材，分析了外植體類型、活性炭以及不同激素種類與配比對(duì)魔芋愈傷組織誘導(dǎo)與增殖分化的效應(yīng)。結(jié)果表明，試驗(yàn)選擇的4種外植體愈傷組織誘導(dǎo)率之間存在顯著差異，誘導(dǎo)率從大到小依次為鱗片>球莖>葉片>根，且不同外植體愈傷組織的發(fā)生位置與組織狀態(tài)也不同。endprint

一般認(rèn)為NAA與6-BA組合對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)有明顯的促進(jìn)作用，蘇承剛等[11]篩選得到南蛇棒魔芋適宜誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為MS+1.5 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA，吳金平等[12]獲得西盟魔芋最佳愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA，本研究結(jié)果也驗(yàn)證了NAA與6-BA對(duì)魔芋愈傷組織誘導(dǎo)的良好協(xié)同作用。研究報(bào)道表明，培養(yǎng)基中添加2，4-D對(duì)魔芋愈傷組織的誘導(dǎo)具有較強(qiáng)的抑制作用[13]，KT∶2，4-D對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)沒(méi)有明顯作用[14]，本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)2，4-D與KT組合除對(duì)根段外植體誘導(dǎo)效果不明顯外，對(duì)其他3種外植體均能誘導(dǎo)形成愈傷組織，且2，4-D與KT組合的誘導(dǎo)效果與NAA與6-BA組合無(wú)明顯差異。

另外，試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)添加AC可明顯提高魔芋愈傷誘導(dǎo)效果，這可能與魔芋組培特點(diǎn)及AC的特性有關(guān);由于魔芋離體培養(yǎng)中容易發(fā)生褐變，而AC具有較強(qiáng)吸附功能，同時(shí)可降低光照強(qiáng)度，營(yíng)造黑暗環(huán)境，因此能夠減緩?fù)庵搀w褐變，更有利于愈傷組織的形成。

參考文獻(xiàn)：

[1] 劉佩瑛.魔芋學(xué)[M].北京：農(nóng)業(yè)出版社，2004.

[2] 何亞娟，李久香.魔芋對(duì)艾氏腹水瘤（EAC）抑制作用的研究[J].腫瘤防治研究，2000（27）：197-198.

[3] SOOD N， BAKER W L， COLEMAN C I..Effect of glucomannan on plasma lipid and glucose concentrations，body weight，and blood pressure： Systematic review and meta-analysis[J]. Am J Clin N，2008（88）：1167-1175.

[4] VUKSAN V， SIEVENPIPER JL，ZHENG X. et al.Konjac-mannan and American ginsing：Emerging alternative therapies for type 2 diabetes mellitus[J]. J Am coll Nutr，2001（20）：370-380.

[5] TAMURA M， TSUSHIDA T， SHINOHARAK. Konjac glucomannan consumption may enhance equol production in mice[J].Food Sci Technol Res，2005（11）：376-379.

[6] 徐 ?煒，王婷婷，劉列平，等. 陜西嵐皋縣魔芋軟腐病原菌的分離與鑒定[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2011（11）：97-102.

[7] 楊 ?英，何 ?峰，金文聞，等.魔芋種植業(yè)發(fā)展存在的問(wèn)題與對(duì)策[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008（9）：1095-1098.

[8] 呂冬霞，曲長(zhǎng)福.植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)愈傷組織培養(yǎng)的影響[J].北方園藝，2004（5）：68.

[9] 朱青松，梅康鳳，王沙生.外源生長(zhǎng)素對(duì)煙草髓愈傷組織分化和內(nèi)源IAA含量的影響[J].北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，12（1）：22-25.

[10] 熊國(guó)勝，李家洋，王永紅.植物激素調(diào)控研究進(jìn)展[J].科學(xué)通報(bào)，2009，54（18）：2718-2733.

[11] 蘇承剛，張興國(guó).南蛇棒魔芋的組織培養(yǎng)與植株再生研究[J].西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，25（5）：393-395.

[12] 吳金平，宋志紅，刁 ?英，等.西盟魔芋組織培養(yǎng)初步研究[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007（11）：98-99，114.

[13] 馬 ?林，張 ?玲，李衛(wèi)鋒.影響魔芋愈傷組織形成的幾個(gè)因素[J].廣西植物，2003（6）：553-557，576.

[14] 蘇承剛，張興國(guó)，張盛林.桂平魔芋組織培養(yǎng)研究[J].西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，23（3）：228-229.

（責(zé)任編輯 ?趙 ?娟）endprint

一般認(rèn)為NAA與6-BA組合對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)有明顯的促進(jìn)作用，蘇承剛等[11]篩選得到南蛇棒魔芋適宜誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為MS+1.5 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA，吳金平等[12]獲得西盟魔芋最佳愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA，本研究結(jié)果也驗(yàn)證了NAA與6-BA對(duì)魔芋愈傷組織誘導(dǎo)的良好協(xié)同作用。研究報(bào)道表明，培養(yǎng)基中添加2，4-D對(duì)魔芋愈傷組織的誘導(dǎo)具有較強(qiáng)的抑制作用[13]，KT∶2，4-D對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)沒(méi)有明顯作用[14]，本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)2，4-D與KT組合除對(duì)根段外植體誘導(dǎo)效果不明顯外，對(duì)其他3種外植體均能誘導(dǎo)形成愈傷組織，且2，4-D與KT組合的誘導(dǎo)效果與NAA與6-BA組合無(wú)明顯差異。

另外，試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)添加AC可明顯提高魔芋愈傷誘導(dǎo)效果，這可能與魔芋組培特點(diǎn)及AC的特性有關(guān);由于魔芋離體培養(yǎng)中容易發(fā)生褐變，而AC具有較強(qiáng)吸附功能，同時(shí)可降低光照強(qiáng)度，營(yíng)造黑暗環(huán)境，因此能夠減緩?fù)庵搀w褐變，更有利于愈傷組織的形成。

參考文獻(xiàn)：

[1] 劉佩瑛.魔芋學(xué)[M].北京：農(nóng)業(yè)出版社，2004.

[2] 何亞娟，李久香.魔芋對(duì)艾氏腹水瘤（EAC）抑制作用的研究[J].腫瘤防治研究，2000（27）：197-198.

[3] SOOD N， BAKER W L， COLEMAN C I..Effect of glucomannan on plasma lipid and glucose concentrations，body weight，and blood pressure： Systematic review and meta-analysis[J]. Am J Clin N，2008（88）：1167-1175.

[4] VUKSAN V， SIEVENPIPER JL，ZHENG X. et al.Konjac-mannan and American ginsing：Emerging alternative therapies for type 2 diabetes mellitus[J]. J Am coll Nutr，2001（20）：370-380.

[5] TAMURA M， TSUSHIDA T， SHINOHARAK. Konjac glucomannan consumption may enhance equol production in mice[J].Food Sci Technol Res，2005（11）：376-379.

[6] 徐 ?煒，王婷婷，劉列平，等. 陜西嵐皋縣魔芋軟腐病原菌的分離與鑒定[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2011（11）：97-102.

[7] 楊 ?英，何 ?峰，金文聞，等.魔芋種植業(yè)發(fā)展存在的問(wèn)題與對(duì)策[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008（9）：1095-1098.

[8] 呂冬霞，曲長(zhǎng)福.植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)愈傷組織培養(yǎng)的影響[J].北方園藝，2004（5）：68.

[9] 朱青松，梅康鳳，王沙生.外源生長(zhǎng)素對(duì)煙草髓愈傷組織分化和內(nèi)源IAA含量的影響[J].北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，12（1）：22-25.

[10] 熊國(guó)勝，李家洋，王永紅.植物激素調(diào)控研究進(jìn)展[J].科學(xué)通報(bào)，2009，54（18）：2718-2733.

[11] 蘇承剛，張興國(guó).南蛇棒魔芋的組織培養(yǎng)與植株再生研究[J].西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，25（5）：393-395.

[12] 吳金平，宋志紅，刁 ?英，等.西盟魔芋組織培養(yǎng)初步研究[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007（11）：98-99，114.

[13] 馬 ?林，張 ?玲，李衛(wèi)鋒.影響魔芋愈傷組織形成的幾個(gè)因素[J].廣西植物，2003（6）：553-557，576.

[14] 蘇承剛，張興國(guó)，張盛林.桂平魔芋組織培養(yǎng)研究[J].西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，23（3）：228-229.

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一般認(rèn)為NAA與6-BA組合對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)有明顯的促進(jìn)作用，蘇承剛等[11]篩選得到南蛇棒魔芋適宜誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為MS+1.5 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA，吳金平等[12]獲得西盟魔芋最佳愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA，本研究結(jié)果也驗(yàn)證了NAA與6-BA對(duì)魔芋愈傷組織誘導(dǎo)的良好協(xié)同作用。研究報(bào)道表明，培養(yǎng)基中添加2，4-D對(duì)魔芋愈傷組織的誘導(dǎo)具有較強(qiáng)的抑制作用[13]，KT∶2，4-D對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)沒(méi)有明顯作用[14]，本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)2，4-D與KT組合除對(duì)根段外植體誘導(dǎo)效果不明顯外，對(duì)其他3種外植體均能誘導(dǎo)形成愈傷組織，且2，4-D與KT組合的誘導(dǎo)效果與NAA與6-BA組合無(wú)明顯差異。

另外，試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)添加AC可明顯提高魔芋愈傷誘導(dǎo)效果，這可能與魔芋組培特點(diǎn)及AC的特性有關(guān);由于魔芋離體培養(yǎng)中容易發(fā)生褐變，而AC具有較強(qiáng)吸附功能，同時(shí)可降低光照強(qiáng)度，營(yíng)造黑暗環(huán)境，因此能夠減緩?fù)庵搀w褐變，更有利于愈傷組織的形成。

參考文獻(xiàn)：

[1] 劉佩瑛.魔芋學(xué)[M].北京：農(nóng)業(yè)出版社，2004.

[2] 何亞娟，李久香.魔芋對(duì)艾氏腹水瘤（EAC）抑制作用的研究[J].腫瘤防治研究，2000（27）：197-198.

[3] SOOD N， BAKER W L， COLEMAN C I..Effect of glucomannan on plasma lipid and glucose concentrations，body weight，and blood pressure： Systematic review and meta-analysis[J]. Am J Clin N，2008（88）：1167-1175.

[4] VUKSAN V， SIEVENPIPER JL，ZHENG X. et al.Konjac-mannan and American ginsing：Emerging alternative therapies for type 2 diabetes mellitus[J]. J Am coll Nutr，2001（20）：370-380.

[5] TAMURA M， TSUSHIDA T， SHINOHARAK. Konjac glucomannan consumption may enhance equol production in mice[J].Food Sci Technol Res，2005（11）：376-379.

[6] 徐 ?煒，王婷婷，劉列平，等. 陜西嵐皋縣魔芋軟腐病原菌的分離與鑒定[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2011（11）：97-102.

[7] 楊 ?英，何 ?峰，金文聞，等.魔芋種植業(yè)發(fā)展存在的問(wèn)題與對(duì)策[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008（9）：1095-1098.

[8] 呂冬霞，曲長(zhǎng)福.植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)愈傷組織培養(yǎng)的影響[J].北方園藝，2004（5）：68.

[9] 朱青松，梅康鳳，王沙生.外源生長(zhǎng)素對(duì)煙草髓愈傷組織分化和內(nèi)源IAA含量的影響[J].北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，12（1）：22-25.

[10] 熊國(guó)勝，李家洋，王永紅.植物激素調(diào)控研究進(jìn)展[J].科學(xué)通報(bào)，2009，54（18）：2718-2733.

[11] 蘇承剛，張興國(guó).南蛇棒魔芋的組織培養(yǎng)與植株再生研究[J].西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，25（5）：393-395.

[12] 吳金平，宋志紅，刁 ?英，等.西盟魔芋組織培養(yǎng)初步研究[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007（11）：98-99，114.

[13] 馬 ?林，張 ?玲，李衛(wèi)鋒.影響魔芋愈傷組織形成的幾個(gè)因素[J].廣西植物，2003（6）：553-557，576.

[14] 蘇承剛，張興國(guó)，張盛林.桂平魔芋組織培養(yǎng)研究[J].西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，23（3）：228-229.

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