李金貴，蔡烈偉*，黃繼軫，陳俊賢，楊雙旭，羅學平

（漳州科技職業(yè)學院，福建漳州 363200）

1 引言

飲茶有益身體健康。但為防治和減少茶樹病蟲害的危害，各類化學殺蟲劑和除草劑農(nóng)藥在茶區(qū)被廣泛使用。據(jù)統(tǒng)計，我國登記的農(nóng)藥產(chǎn)品有27000多個，年產(chǎn)量190萬t，居世界第一，其中化學農(nóng)藥的比重高，且農(nóng)藥利用率低，只有30%，要比發(fā)達國家低 10%～20%[1，2]。我國每年農(nóng)藥的使用量達到 130萬 t。這些農(nóng)藥的使用在提高茶葉產(chǎn)量的同時，殘留農(nóng)藥也極大地危害了消費者的身體健康，并給自然環(huán)境和生態(tài)系統(tǒng)造成嚴重的污染[3，4]。

有機氯農(nóng)藥，是上世紀被廣泛使用的一類廣譜殺蟲劑，它可對撲殺對象的內(nèi)臟系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生毒害，在人體內(nèi)可誘導機體正常細胞發(fā)生癌變。有機氯農(nóng)藥在食物鏈和土壤中殘留可達幾十年，含氯苯環(huán)結(jié)構(gòu)極其穩(wěn)定，在食物鏈和土壤中不易被動物或細菌體內(nèi)的酶分解，故有機氯類農(nóng)藥在植物和動物體內(nèi)淤積，在食物鏈最高級達到最高值，造成農(nóng)藥公害現(xiàn)象[5]。六六六、滴滴涕是有機氯農(nóng)藥的典型代表，我國于上世紀 60年代已開始禁止將六六六、滴滴涕用于蔬菜、茶葉、煙草等作物上；1983年，六六六、滴滴涕在我國禁產(chǎn)禁用。但 30多年后，有機氯農(nóng)藥仍普遍存在于自然界中，通過食物鏈途徑對人類造成危害。茶葉一般是茶樹鮮葉采摘后直接加工，經(jīng)開水沖泡后飲用，因此，國家對有機氯農(nóng)藥在茶葉中的殘留標準有嚴格的限制。由于不同茶類中內(nèi)含成分不同，其對有機氯農(nóng)藥殘留的檢測也會有不同的影響。研究分析不同茶類有機氯農(nóng)藥的檢測方法，對科學檢測茶葉中有機氯農(nóng)藥含量，有效控制茶葉農(nóng)殘超標，指導茶葉商品生產(chǎn)具有重要意義。

2 試驗儀器、材料及方法

2.1 儀器設備

Agilent 7890A氣相色譜儀（配ECD）、TDL-40C低速臺式離心機、ZD-85A數(shù)顯氣浴恒溫振蕩器、KQ-100KDE高效率數(shù)控超聲波清洗器、AXLC1810超純水機、DFT-200手持式高速中藥粉碎機、電熱鼓風干燥箱等。

2.2 試驗材料

農(nóng)藥標準品：六六六（α-666、β-666、γ-666、δ-666）、滴滴涕（p,p'-DDE、p,p'-DDD、o,p'-DDT、p,p'-DDT）、三氯殺螨醇：濃度均為100ug/mL，生產(chǎn)單位：農(nóng)業(yè)部環(huán)境科研監(jiān)測所研制。

試驗藥品：正己烷（色譜純）、丙酮（色譜純）、石油醚、濃硫酸等。

茶葉樣品：分別來自福建、浙江、安徽、云南、四川等省，按常規(guī)加工方法生產(chǎn)的紅茶、綠茶、烏龍茶、白茶、巖茶、普洱茶。

2.3 試驗方法

氣相色譜參數(shù)：主機Agilent 7890A GC-μECD配G4513A自動進樣器；色譜柱：DB-1701 30m×0.25mm×0.25μm；載氣：高純 N2（99.999%）；進樣體積：0.5μL；進樣口溫度：250℃；壓力：35psi；隔墊吹掃量：3mL/min；模式：不分流；分流出口吹掃流量：60mL/min（0.75min后）；柱溫：150℃保留 1min，10℃/min到 185℃保留 3min，2℃/min到190℃保留5min，再15℃/min到250℃；恒定壓力模式：35psi；μECD檢測器溫度：300℃；尾吹流量：40mL/min。

樣品處理方法：茶葉樣品前處理按 GB/T 5009.176-2003執(zhí)行，按GB 2763-2012進行測試。

3 結(jié)果與分析

3.1 磺化處理分析

有機氯類農(nóng)藥難揮發(fā)、化學性質(zhì)穩(wěn)定、不易分解、易溶于脂類和有機溶劑，這些性質(zhì)對有機氯類農(nóng)藥殘留分析方法具有重要影響[6，7]。硫酸磺化法主要是利用濃硫酸的強氧化性將雜質(zhì)分子破壞，如脂類和色素等大分子，分解成小分子物質(zhì)，這些物質(zhì)一般極性較大，因此會從有機相中析出，進入濃硫酸層，將雜質(zhì)與目標化合物所在的有機相層分離。

在有機氯類農(nóng)藥殘留分析中，添加濃硫酸時，大多采取提取液:濃硫酸=10:1（體積比）的做法。本文采取在等量不同類茶葉提取液中，添加不同量濃硫酸，漩渦混勻3min，2500r/min離心10min，得到理想效果（出現(xiàn)分層，且上層基本透明）。研究結(jié)果顯示，由于茶葉的種類及加工方法不同，不同茶類提取液，加入不同量的濃硫酸進行測試，得到理想的結(jié)果，不同茶葉提取液添加濃硫酸的量差異較大，紅茶和普洱僅需加1/50濃硫酸，白茶和巖茶需加2/50，綠茶需加3/50，而烏龍茶和鐵觀音需加5/50才能達到理想效果（表1）。

3.2 有機氯類農(nóng)藥殘留GC檢測分析

以農(nóng)藥殘留標樣濃度為橫坐標，以農(nóng)藥殘留色譜峰面積（Hz）為縱坐標，各農(nóng)藥保留時間等見表2。由于三氯殺螨醇與δ-666保留時間間距較小，在有茶葉基質(zhì)干擾的提取液中，分離效果不理想。故標準樣采用三類農(nóng)藥同時進樣，而茶樣加標采取分開平行加入（六六六、滴滴涕一組，三氯殺螨醇另外組）。

其中六六六和滴滴涕標準曲線濃度梯度為：1ug/mL、2ug/mL、6ug/mL、12ug/mL、20ug/mL。茶樣加標濃度梯度“低加標-2ug/mL、中加標-6ug/mL、高加標-18ug/mL”。

三氯殺螨醇標準曲線濃度梯度為：10ug/mL、20ug/mL、40ug/mL、80ug/mL、100ug/mL。茶樣加標濃度梯度“低加標-20ug/mL、中加標-40ug/mL、高加標-80ug/mL”。

六六六、滴滴涕、三氯殺螨醇標樣色譜圖和茶樣加標色譜圖，見圖1、2、3。

表2 有機氯類農(nóng)藥殘留——六六六、滴滴涕、三氯殺螨醇線性方程、回收率和標準偏差等

圖1 六六六、滴滴涕、三氯殺螨醇標樣色譜圖

圖2 茶葉加標樣色譜圖

3.3 不同茶類有機氯類農(nóng)藥殘留情況分析

對來自福建、浙江、安徽、云南、四川等五省的不同茶類共350個茶樣按GB 2763-2012進行測試的結(jié)果見表3。檢測結(jié)果表明，有機氯類農(nóng)藥殘留超標現(xiàn)象依然值得關(guān)注，350個茶樣中有71個超標，占總數(shù)的20.29%。其中，紅茶和鐵觀音超標最為嚴重，三氯殺螨醇檢出率較高，紅茶樣品中三氯殺螨醇殘留超標高達28.57%。

圖3 茶樣加標樣色譜圖

表3 有機氯類農(nóng)藥殘留超標統(tǒng)計表

4 討論

目前在沒有氣相色譜質(zhì)譜儀的條件下，硫酸磺化法結(jié)合氣相色譜儀，仍然是部分有機氯類農(nóng)藥檢測的首選。我國茶葉種類繁多，不同茶葉提取液中有機酸、色素和酚類等雜質(zhì)含量差別較大，采用硫酸磺化法，能將目標化合物與雜質(zhì)有效分離，結(jié)合GC-uECD建立的有機氯類農(nóng)藥殘留檢測方法，對六六六（α-666、β-666、γ-666、δ-666）、滴滴涕（p,p'-DDE、p,p'-DDD、o,p'-DDT、p,p'-DDT）、三氯殺螨醇9種農(nóng)藥殘留進行方法研究，得到線性方程相關(guān)系數(shù) R2位于0.987至0.998之間，不同茶類加標回收率位于87.35%至111.20%，完全可以滿足9種農(nóng)藥殘留檢測要求。

在對350個來自不同地方的各類茶樣進行測試發(fā)現(xiàn)，三氯殺螨醇被檢出不合格最多，檢出值多在方法檢出限 10倍以下，這些微量農(nóng)藥殘留是在生產(chǎn)中由水流、土壤、空氣、肥料等其他媒介引入。要控制有機氯類農(nóng)藥殘留，應從保持生態(tài)出發(fā)，科學規(guī)劃。

[1] 張俊, 王定勇. 蔬菜的農(nóng)藥污染現(xiàn)狀及農(nóng)藥殘留危害[J].農(nóng)村經(jīng)濟與科技, 2004, (3): 16～17.

[2] 章建森. 我國農(nóng)藥平均用量比世界高2.5至5倍[J]. 農(nóng)藥市場信息, 2011, (7): 7.

[3] 朱世敏, 郭建亭, 周侃侃. 我國茶葉及其制品標準問題及對策研究[J]. 現(xiàn)代貿(mào)易工業(yè), 2010, (22): 22～24.

[4] 曹愛民. 降低茶葉農(nóng)藥殘留的措施與對策[J]. 農(nóng)產(chǎn)品加工與貯藏, 2011, (2): 193～194.

[5] 張海秀. 農(nóng)業(yè)環(huán)境中有機氯農(nóng)藥污染現(xiàn)狀及危害[J]. 科技信息, 2009, (14): 184～185.

[6] Lili Hao, Jian Xue. Multi-residue analysis of 18 organochlorine pesticides in Traditional Chinese Medicine[J]. Journal of Chromatographic Science, 2007,11(6): 538～544.

[7] 郝麗麗,薛健. 銀杏葉中18種有機氯農(nóng)藥的多殘留分析[J].分析化學, 2006, 2(34): 231～234.