胡曉琳，高靜

(天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗科，天津300193)

缺血性腦卒中患者血漿脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2檢測的臨床意義

胡曉琳，高靜

(天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗科，天津300193)

脂蛋白磷脂酶A2;缺血性腦卒中;動脈粥樣硬化

缺血性腦卒中疾病的重要病理基礎(chǔ)是動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)，而炎癥現(xiàn)已被公認(rèn)為是AS發(fā)展過程中的核心因子，貫穿于AS的整個發(fā)生、發(fā)展環(huán)節(jié)［1］。脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2 (lipoprotein-associated phospholipase A2，Lp-PLA2)作為一種新型的炎癥標(biāo)志物，參與AS斑塊形成的各個階段，在壞死中心、巨噬細(xì)胞、凋亡的巨噬細(xì)胞內(nèi)以及易損和破裂的斑塊中有高度表達(dá)［2］。D-二聚體(D-dimer，D-D)是纖溶酶作用于交聯(lián)纖維蛋白后產(chǎn)生的特異性降解產(chǎn)物，其升高特異地反映體內(nèi)纖溶活性增強(qiáng)和凝血酶生成增多，對血栓形成性疾病有早期快速診斷的價值［3］。D-D與Lp-PLA2可能對缺血性腦卒中的發(fā)生、發(fā)展有重要意義。為此，我們檢測了缺血性腦卒中患者血漿Lp-PLA2水平，并分析其與頸動脈內(nèi)中膜厚度(carotid intima-media thickness，CIMT)、動脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性以及D-D之間的關(guān)系，以期為缺血性腦卒中的臨床診斷、分期及療效觀察提供理論依據(jù)。

一、材料和方法

1.研究對象(1)動脈粥樣硬化性腦梗死(atherosclerotic cerebral infarction，ACI)組:89例ACI患者均來自天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院2014年3月至6月入院的患者，男54例，女35例，均符合第4屆腦血管病學(xué)術(shù)會議制定的急性腦梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］，并據(jù)頸動脈彩超顯示的斑塊性質(zhì)將上述患者分為不穩(wěn)定斑塊組(38例，其中男21例，女17例，年齡39～75歲)、穩(wěn)定性斑塊組(33例，其中男21例女12例，年齡42～72歲)、無斑塊組(18例，其中男12例，女6例，年齡43～70歲);(2)正常對照組:選取同期年齡、性別相匹配的健康體檢者62名，男38名，女24名，年齡40～65歲。確認(rèn)無既往腦血管病史，近期未服用任何藥物。

2.排除標(biāo)準(zhǔn)(1)腔隙性腦梗死、無癥狀性腦梗死;(2)明確栓子來源的腦栓塞，先天發(fā)育異常導(dǎo)致的腦梗死;(3)出血性腦卒中，梗死后腦出血;(4)各種凝血機(jī)制異常、血液系統(tǒng)疾病以及高黏血癥所致的腦梗死;(5)腫瘤、肝病、自身免疫性疾病等;(6)嚴(yán)重的全身感染。

3.標(biāo)本采集所有對象均取晨起空腹靜脈血，ACI患者所用藥物對相關(guān)檢測項目無影響。分離血清，取部分于-20℃保存，集中檢測LP-PLA2，以減少批間誤差及測定誤差。另一部分血清常規(guī)進(jìn)行總膽固醇(totol cholesterol，TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)、高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C)、D-D檢測。

4.方法Lp-PLA2檢測采用酶聯(lián)免疫吸附試驗，試劑盒由天津康爾克生物科技有限公司提供。TC、TG、HDL-C、LDL-C試劑由日本和光純藥工業(yè)株式會社提供，儀器為日立7600系列全自動生化分析儀。D-D采用MINI-VIDAS全自動免疫分析系統(tǒng)(法國梅里埃公司)及配套試劑(酶聯(lián)免疫熒光法)檢測。

5.頸動脈超聲多普勒檢查采用東芝2000型彩色多普勒超聲診斷儀測量CIMT，確定斑塊位置和回聲、斑塊形態(tài)、大小范圍、管壁細(xì)微硬化斑、有無狹窄或阻塞部位，有斑塊者測量內(nèi)徑。斑塊診斷測量標(biāo)準(zhǔn):CIMT＜1.0 mm為正常;1.0～1.2 mm為內(nèi)膜增厚;＞1.2 mm為斑塊形成，視為粥樣硬化。根據(jù)斑塊形態(tài)和回聲將其分為扁平型、軟斑、硬斑以及潰瘍斑。扁平型和硬斑稱為穩(wěn)定性斑塊;軟斑和潰瘍斑稱為不穩(wěn)定性斑塊，此種斑塊發(fā)展快，易于脫落出血。

6.統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。正態(tài)分布計量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗;非正態(tài)分布數(shù)據(jù)以中位數(shù)(M)［四分位數(shù)(P25，P75)］來表示，比較采用兩獨(dú)立樣本的秩和檢驗，多組比較采用單因素方差分析(F檢驗)，2個組數(shù)據(jù)的相關(guān)性采用Spearman秩相關(guān)分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

二、結(jié)果

1.ACI組與對照組Lp-PLA2及相關(guān)生化指標(biāo)比較ACI組Lp-PLA2、TG、LDL-C、D-D水平均高于正常對照組(P＜0.01);而HDL-C、TC水平與正常對照比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

2.不同性質(zhì)斑塊組Lp-PLA2、D-D及CIMT的比較有斑塊組CIMT明顯高于無斑塊組(P＜0.01)，穩(wěn)定型與不穩(wěn)定型組CIMT差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);無斑塊組、穩(wěn)定型斑塊組Lp-PLA2和D-D水平與不穩(wěn)定斑塊組水比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。見表2。

表1 ACI組與正常對照組Lp-PLA2、D-D及血脂水平的比較

表2 ACI患者不同性質(zhì)斑塊組Lp-PLA2、D-D水平及CIMT的比較(±s)

表2 ACI患者不同性質(zhì)斑塊組Lp-PLA2、D-D水平及CIMT的比較(±s)

注:與無斑塊組比較，*P＜0.01;與穩(wěn)定型斑塊組比較，#P＜0.01

組別例數(shù)CIMT(mm)Lp-PLA2(mg/L)D-D(ng/mL) 18 0.89±0.27 137.56±55.57 465.78±277.62穩(wěn)定斑塊組33 1.38±0.22*198.67±57.25*876.24±445.87*不穩(wěn)定斑塊組38 1.41±0.32*288.89±79.72*#1 011.45±578.52*#無斑塊組

3.CIMT與Lp-PLA2、D-D的相關(guān)性CIMT與Lp-PLA2、D-D均呈明顯正相關(guān)［相關(guān)系數(shù)(r)分別為0.876、0.756，P均＜0.01］。

三、討論

Lp-PLA由441個氨基酸殘基組成，在血液中主要由成熟的巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞合成分泌［5］，可水解低密度脂蛋白分子中氧化修飾的磷脂，生成2種強(qiáng)促炎因子和趨化因子:溶血磷脂酰膽堿(lyso-phosphatidyl choline，L-PC)和氧化型游離脂肪酸(oxidized free fatty acid，ox-FFA)，刺激黏附因子和細(xì)胞因子的產(chǎn)生，促進(jìn)單核細(xì)胞衍生為巨噬細(xì)胞，進(jìn)一步演變?yōu)榕菽?xì)胞;凋亡泡沫細(xì)胞會聚集成動脈粥樣硬化斑塊，釋放細(xì)胞因子和蛋白酶，降解纖維帽的平滑肌細(xì)胞核膠原基質(zhì)，使脆弱斑塊破裂，導(dǎo)致血管內(nèi)皮損傷，引發(fā)動脈粥樣硬化，血栓形成，造成缺血性腦卒中的發(fā)生［6］。

本研究結(jié)果顯示ACI組血清Lp-PLA2水平明顯高于正常對照組(P＜0.01)，這與葉蕓等［7］的研究結(jié)果一致。經(jīng)頸動脈彩超多普勒檢查，CIMT與Lp-PLA呈明顯正相關(guān)(r=0.876，P＜0.01);無斑組、穩(wěn)定型斑塊組和不穩(wěn)定型斑塊組之間差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，表明Lp-PLA2貫穿著缺血性腦卒中的發(fā)生、發(fā)展過程，并且與頸動脈AS的斑塊穩(wěn)定性有關(guān):Lp-PLA2的水平也越高，出現(xiàn)斑塊的可能性越大，CIMT越高，且斑塊的性質(zhì)越易從穩(wěn)定型向不穩(wěn)定型發(fā)展。

在AS發(fā)生過程中，常伴有機(jī)體凝血及纖溶系統(tǒng)的激活。機(jī)體血漿纖維蛋白原在凝血酶和凝血因子Ⅻ作用下形成的交聯(lián)纖維蛋白越多，患者頸動脈管腔越狹窄，AS情況越嚴(yán)重。隨后，機(jī)體纖溶系統(tǒng)出現(xiàn)繼發(fā)性亢進(jìn)，將交聯(lián)纖維蛋白溶解［8］。同時，腦卒中所引起的腦組織損傷和梗死組織釋放組織因子，也會使凝血活性增高，機(jī)體高凝狀態(tài)亦進(jìn)一步導(dǎo)致激發(fā)纖溶活性增高，引起D-D水平的變化［9］。本研究結(jié)果顯示ACI患者血清D-D水平明顯高于正常對照組(P＜0.01)，CIMT與D-D呈明顯正相關(guān)(r=0.756，P＜0.01)，且隨著頸動脈斑塊的由無到有和不穩(wěn)定性的增加，其水平也逐漸升高，與文獻(xiàn)報道［10-11］一致。另外，CIMT和斑塊的性質(zhì)反映了頸動脈AS的嚴(yán)重程度。本研究結(jié)果顯示有斑塊組CIMT高于無斑塊組(P＜0.01)，穩(wěn)定型與不穩(wěn)定型組CIMT則無明顯差異(P＞0.05)。說明缺血性腦卒中的炎癥反應(yīng)可以引起頸動脈內(nèi)膜增厚，使血管內(nèi)皮受損，激活血小板，促進(jìn)了血栓形成或繼發(fā)纖溶活性增加，使D-D水平增高。

綜上所述，Lp-PLA2已經(jīng)成為一個新的急性缺血性腦卒中的危險標(biāo)志物，在動脈粥樣硬化形成、粥樣斑塊內(nèi)中膜厚度和斑塊的不穩(wěn)定性中發(fā)揮著重要作用。檢測血中Lp-PLA2的水平有助于識別斑塊局部炎癥反應(yīng)的程度和早期識別易損斑塊的產(chǎn)生，有利于臨床病情進(jìn)展的分析和預(yù)后的判斷。

［1］何德化，李衛(wèi)華.脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2與冠心病的相關(guān)性研究進(jìn)展［J］.心血管病學(xué)進(jìn)展，2008，29(1):57-60.

［2］KOLODGIE FD，BURKE AP，SKORIJA KS，et al. Lipoprotein-associated phosphoipase A2 protein expression in the natural progression of human coronary atherosclerosis［J］.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2006，26(11):2523-2529.

［3］陳峻，馬濤，崔天盆.急性腦梗死患者血漿FDP、DD和CRP聯(lián)合檢測的臨床價值［J］.標(biāo)記免疫分析與臨床，2013，20(2):111-112.

［4］中華醫(yī)學(xué)會全國第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會議.各類腦血管疾病診斷要點(diǎn)［J］.中華神經(jīng)科雜志，1996，42(6):60-61.

［5］貴永堃，呂曉紅.脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2與缺血性腦血管疾病的研究進(jìn)展［J］.中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志，2011，28(1):86-88.

［6］龍璐，王鐘明，陳貞，等.急性缺血性腦卒中患者血漿Lp-PLA2水平與頸動脈硬化斑塊穩(wěn)定性及神經(jīng)功能缺損程度的關(guān)系［J］.檢驗醫(yī)學(xué)，2013，28 (10):885-889.

［7］葉蕓，李蘇亮.腦卒中患者血漿Lp-PLA2水平及臨床意義探討［J］.檢驗醫(yī)學(xué)，2014，29(3):249-253.

［8］陳新民，陳福民.急性缺血性腦卒中患者頸動脈粥樣硬化與D-二聚體水平的關(guān)系［J］.中國醫(yī)藥導(dǎo)刊，2013，15(5):872.

［9］王慧.急性腦梗死患者NSE、hs-CRP和D-二聚體檢測的臨床意義［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)生，2014，8 (21):67-69.

［10］SMITH A，PATTERSON C，YARNELL J，et al.Which hemostatic markers add to the predictive value of conventional risk factors for coronary heart disease and ischemic stroke?The Caerphilly Study［J］.Circulation，2005，112(20):3080-3087.

［11］VOROBEVA NM，PANCHENKO EP，DOBROVOLSKII AB，et al.Elevated D-dimer in patients with cardiovascular diseases free from thromboembolic complications:what is it associated with and what has to be done［J］.Angiol Sosud Khir，2010，16(4):34-41.

1673-8640(2015)09-0968-03

R446.1

B

10.3969/j.issn.1673-8640.2015.09.023

2015-02-28)

(本文編輯:龔曉霖)

胡曉琳，女，1970年生，學(xué)士，副主任技師，主要從事臨床生化、免疫學(xué)檢驗工作。