陳一虎

摘 要：以離子色譜法測定地產(chǎn)銀魚中亞硝酸鹽的含量，兼具選擇性好、靈敏度高的特點，具有較強的實用性和可操作性;所得結(jié)果低于國標的含量限制，符合食品安全要求。

關(guān)鍵詞：離子色譜;銀魚;亞硝酸鹽

亞硝酸鹽是一種廣泛存在于水體、蔬菜、加工食品等物質(zhì)中的有害化學(xué)成份， 對人體具有一定的危害性。聯(lián)合國糧農(nóng)及世界衛(wèi)生組織專門委員會認為亞硝酸鹽的日攝入量應(yīng)小于20 mg。國內(nèi)外已報道測定亞硝酸鹽的方法有光度法、極譜法、流動注射分析光度法、催化電位法等[1-3]。

太湖銀魚與松江鱸魚、黃河鯉魚、長江鰣魚，并稱中國四大名魚。它營養(yǎng)豐富，肉質(zhì)細膩，潔白鮮嫩，無鱗無刺，無骨無腸，無腥，含多種營養(yǎng)成分。姚可成在《食物本草》中評價之為“利水，潤肺，止咳”，《醫(yī)林纂要》中也有“補肺清金，滋陰，補虛勞”之說。

離子色譜法可用于對啤酒、白酒、蔬菜等樣品中常見無機陰離子的測定，歐盟將離子色譜法規(guī)定為肉制品中亞硝酸鹽檢測的標準方法。而用于對銀魚樣品中亞硝酸鹽含量的測定，則尚未見諸報道。試樣經(jīng)粉碎，沉淀蛋白質(zhì)、除去脂肪和凈化后，以氫氧化鉀溶液為淋洗液，陰離子交換柱分離后進行定量，具有選擇性好，靈敏度高的特點，具有較強的實用性和可操作性。

1 儀器試劑

1.1 儀器

離子色譜儀（ZCS-1100）;超聲波清洗儀;022 μm 水性濾膜針頭濾器;凈化柱。

1.2 試劑

超純水（電阻率>18.2 MΩ·cm）;NO2-標準液（1 000 mg/L，水基體）;NO3-標準液（1 000 mg/L，水基體）;乙酸（3 %）; NO2-和NO3-混合標準使用液（10.0 mg/L NO2-和10.0 mg/L NO3-）。

2 實驗部分

2.1 色譜條件

色譜柱：Dionex IonPac AS11-HC 4 mm×250 mm（帶IonPac AG11-HC 型保護柱4 mm×50 mm）。

流動相：DionexEG50自動淋洗發(fā)生器，OH-型。

淋洗液：氫氧化鉀，濃度為20 mmol，等度洗脫。

抑制器：DionexASRS 4 mm陰離子抑制劑，外加水抑制模式，抑制電流100 mA。

檢測器：電導(dǎo)檢測器，檢測池溫度為 30 ℃。

進樣體積：25 μL。

2.2 標準曲線

表1 標準曲線配制

進樣序號

保留時間

/min

峰面積/

μS·min-1

峰高/μS

ST1

6.014

0.023

0.125

ST2

6.014

0.038 9

0.215

ST5

6.014

0.101 2

0.567

ST10

6.017

0.207 7

1.173

ST20

6.007

0.433 5

2.447

移取亞硝酸鹽標準使用液，加水稀釋，制成系列標準溶液，含亞硝酸根離子濃度為0.00 mg/L、0.10 mg/L、0.20 mg/L、0.50 mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L，從低到高濃度依次進樣，得到上述各濃度標準溶液的色譜圖。以亞硝酸根離子濃度（mg/L）為橫坐標，以峰面積為縱坐標，繪制標準曲線[4]。結(jié)果見表1、圖1、圖2。

圖1 標準曲線（Correlation coefficient：0.998 9）

圖2 NO2- 濃度為0.5 mg/L時色譜圖

2.3 實驗步驟

用天平稱取樣品，破碎，加入少量二次水，超聲使充分溶解，經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)、除去脂肪后，將上清液倒入25 mL容量瓶中，定容，混勻后過C18柱后過0.22 μm水性濾膜針頭濾器，棄去初濾液，使用離子色譜儀，外標法測得亞硝酸鹽的含量。

2.4 樣品檢測與結(jié)果分析

依據(jù)前述方法，對銀魚樣品進行測定，所得結(jié)果見圖3、表2。

圖3 銀魚NO2-濃度色譜圖

表2 銀魚制品NO2-濃度峰積分報告

序

號

保留時

間/min

峰

名稱

峰面

積/μS

·min-1

樣品

量/mg

·kg-1

Average

/mg

·kg-1

RSD

/%

1

5.82

NO2-

0.078

0.366 4

2

5.82

NO2-

0.082

0.385 9

3

5.82

NO2-

0.081

0.381 0

4

5.82

NO2-

0.079

0.371 30.3762.0

對銀魚樣品中亞硝酸鹽含量進行檢測，平均含量為為0.376 2 mg/kg，而我國強制性衛(wèi)生標準中規(guī)定肉類食品中亞硝酸鹽的殘留量不得超過50 mg/kg，符合食品安全要求。

2.5 可靠性試驗

2.5.1 空白測試 用二次水代替樣品，其余步驟與上述實驗步驟一致，得空白含量為0.011 7 mg/kg，結(jié)果見圖4，表3。

圖4 空白NO2-濃度色譜圖

表3 空白NO2-濃度峰積分報告

序號

時間

/min

峰名稱

峰面積/

μS·min-1

峰高

/μS

樣品量/

mg·kg-1

1

6.01

NO2-

0.003

0.012

0.011 7

2.5.2 加標回收 添加標樣，其余步驟與實驗步驟一致，進行回收率實驗，結(jié)果見圖5，表4。實驗的平均回收率為99.56%，RSD為0.7%，表明方法具有較高的準確度。

圖5 Add色譜圖

3 討論

本實驗以地產(chǎn)銀魚為樣品，采用離子色譜法測定亞硝酸鹽的含量，結(jié)果為0.376 2 mg/kg，符合食品安全要求;方法的平均回收率為99.56%，RSD為0.7%，具有較高的準確度，可以作為太湖水域的系列水產(chǎn)品常規(guī)監(jiān)測的方法。

參考文獻：

[1]

中華人民共和國衛(wèi)生部. GB5009.33—2010.食品安全國家標準[s].北京：中國標準出版社，2010

[2] 郭麗娜，邢宇，胡婧.肉類制品中亞硝酸鹽殘留量的實驗測定分析[J].科技創(chuàng)新導(dǎo)報，2013（13）：12

[3] 周文斌.泡菜中亞硝酸鹽測定方法研究[J].食品科學(xué)，2006（02）：241-243

[4] 羅哲珠，丘婷婷，范江平，等.離子色譜法對食品中亞硝酸鹽檢測的研究和討論[J].廣東化工，2013（12）：81-182+195

（收稿日期：2014-11-26）

摘 要：以離子色譜法測定地產(chǎn)銀魚中亞硝酸鹽的含量，兼具選擇性好、靈敏度高的特點，具有較強的實用性和可操作性;所得結(jié)果低于國標的含量限制，符合食品安全要求。

關(guān)鍵詞：離子色譜;銀魚;亞硝酸鹽

亞硝酸鹽是一種廣泛存在于水體、蔬菜、加工食品等物質(zhì)中的有害化學(xué)成份， 對人體具有一定的危害性。聯(lián)合國糧農(nóng)及世界衛(wèi)生組織專門委員會認為亞硝酸鹽的日攝入量應(yīng)小于20 mg。國內(nèi)外已報道測定亞硝酸鹽的方法有光度法、極譜法、流動注射分析光度法、催化電位法等[1-3]。

太湖銀魚與松江鱸魚、黃河鯉魚、長江鰣魚，并稱中國四大名魚。它營養(yǎng)豐富，肉質(zhì)細膩，潔白鮮嫩，無鱗無刺，無骨無腸，無腥，含多種營養(yǎng)成分。姚可成在《食物本草》中評價之為“利水，潤肺，止咳”，《醫(yī)林纂要》中也有“補肺清金，滋陰，補虛勞”之說。

離子色譜法可用于對啤酒、白酒、蔬菜等樣品中常見無機陰離子的測定，歐盟將離子色譜法規(guī)定為肉制品中亞硝酸鹽檢測的標準方法。而用于對銀魚樣品中亞硝酸鹽含量的測定，則尚未見諸報道。試樣經(jīng)粉碎，沉淀蛋白質(zhì)、除去脂肪和凈化后，以氫氧化鉀溶液為淋洗液，陰離子交換柱分離后進行定量，具有選擇性好，靈敏度高的特點，具有較強的實用性和可操作性。

1 儀器試劑

1.1 儀器

離子色譜儀（ZCS-1100）;超聲波清洗儀;022 μm 水性濾膜針頭濾器;凈化柱。

1.2 試劑

超純水（電阻率>18.2 MΩ·cm）;NO2-標準液（1 000 mg/L，水基體）;NO3-標準液（1 000 mg/L，水基體）;乙酸（3 %）; NO2-和NO3-混合標準使用液（10.0 mg/L NO2-和10.0 mg/L NO3-）。

2 實驗部分

2.1 色譜條件

色譜柱：Dionex IonPac AS11-HC 4 mm×250 mm（帶IonPac AG11-HC 型保護柱4 mm×50 mm）。

流動相：DionexEG50自動淋洗發(fā)生器，OH-型。

淋洗液：氫氧化鉀，濃度為20 mmol，等度洗脫。

抑制器：DionexASRS 4 mm陰離子抑制劑，外加水抑制模式，抑制電流100 mA。

檢測器：電導(dǎo)檢測器，檢測池溫度為 30 ℃。

進樣體積：25 μL。

2.2 標準曲線

表1 標準曲線配制

進樣序號

保留時間

/min

峰面積/

μS·min-1

峰高/μS

ST1

6.014

0.023

0.125

ST2

6.014

0.038 9

0.215

ST5

6.014

0.101 2

0.567

ST10

6.017

0.207 7

1.173

ST20

6.007

0.433 5

2.447

移取亞硝酸鹽標準使用液，加水稀釋，制成系列標準溶液，含亞硝酸根離子濃度為0.00 mg/L、0.10 mg/L、0.20 mg/L、0.50 mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L，從低到高濃度依次進樣，得到上述各濃度標準溶液的色譜圖。以亞硝酸根離子濃度（mg/L）為橫坐標，以峰面積為縱坐標，繪制標準曲線[4]。結(jié)果見表1、圖1、圖2。

圖1 標準曲線（Correlation coefficient：0.998 9）

圖2 NO2- 濃度為0.5 mg/L時色譜圖

2.3 實驗步驟

用天平稱取樣品，破碎，加入少量二次水，超聲使充分溶解，經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)、除去脂肪后，將上清液倒入25 mL容量瓶中，定容，混勻后過C18柱后過0.22 μm水性濾膜針頭濾器，棄去初濾液，使用離子色譜儀，外標法測得亞硝酸鹽的含量。

2.4 樣品檢測與結(jié)果分析

依據(jù)前述方法，對銀魚樣品進行測定，所得結(jié)果見圖3、表2。

圖3 銀魚NO2-濃度色譜圖

表2 銀魚制品NO2-濃度峰積分報告

序

號

保留時

間/min

峰

名稱

峰面

積/μS

·min-1

樣品

量/mg

·kg-1

Average

/mg

·kg-1

RSD

/%

1

5.82

NO2-

0.078

0.366 4

2

5.82

NO2-

0.082

0.385 9

3

5.82

NO2-

0.081

0.381 0

4

5.82

NO2-

0.079

0.371 30.3762.0

對銀魚樣品中亞硝酸鹽含量進行檢測，平均含量為為0.376 2 mg/kg，而我國強制性衛(wèi)生標準中規(guī)定肉類食品中亞硝酸鹽的殘留量不得超過50 mg/kg，符合食品安全要求。

2.5 可靠性試驗

2.5.1 空白測試 用二次水代替樣品，其余步驟與上述實驗步驟一致，得空白含量為0.011 7 mg/kg，結(jié)果見圖4，表3。

圖4 空白NO2-濃度色譜圖

表3 空白NO2-濃度峰積分報告

序號

時間

/min

峰名稱

峰面積/

μS·min-1

峰高

/μS

樣品量/

mg·kg-1

1

6.01

NO2-

0.003

0.012

0.011 7

2.5.2 加標回收 添加標樣，其余步驟與實驗步驟一致，進行回收率實驗，結(jié)果見圖5，表4。實驗的平均回收率為99.56%，RSD為0.7%，表明方法具有較高的準確度。

圖5 Add色譜圖

3 討論

本實驗以地產(chǎn)銀魚為樣品，采用離子色譜法測定亞硝酸鹽的含量，結(jié)果為0.376 2 mg/kg，符合食品安全要求;方法的平均回收率為99.56%，RSD為0.7%，具有較高的準確度，可以作為太湖水域的系列水產(chǎn)品常規(guī)監(jiān)測的方法。

參考文獻：

[1]

中華人民共和國衛(wèi)生部. GB5009.33—2010.食品安全國家標準[s].北京：中國標準出版社，2010

[2] 郭麗娜，邢宇，胡婧.肉類制品中亞硝酸鹽殘留量的實驗測定分析[J].科技創(chuàng)新導(dǎo)報，2013（13）：12

[3] 周文斌.泡菜中亞硝酸鹽測定方法研究[J].食品科學(xué)，2006（02）：241-243

[4] 羅哲珠，丘婷婷，范江平，等.離子色譜法對食品中亞硝酸鹽檢測的研究和討論[J].廣東化工，2013（12）：81-182+195

（收稿日期：2014-11-26）

摘 要：以離子色譜法測定地產(chǎn)銀魚中亞硝酸鹽的含量，兼具選擇性好、靈敏度高的特點，具有較強的實用性和可操作性;所得結(jié)果低于國標的含量限制，符合食品安全要求。

關(guān)鍵詞：離子色譜;銀魚;亞硝酸鹽

亞硝酸鹽是一種廣泛存在于水體、蔬菜、加工食品等物質(zhì)中的有害化學(xué)成份， 對人體具有一定的危害性。聯(lián)合國糧農(nóng)及世界衛(wèi)生組織專門委員會認為亞硝酸鹽的日攝入量應(yīng)小于20 mg。國內(nèi)外已報道測定亞硝酸鹽的方法有光度法、極譜法、流動注射分析光度法、催化電位法等[1-3]。

太湖銀魚與松江鱸魚、黃河鯉魚、長江鰣魚，并稱中國四大名魚。它營養(yǎng)豐富，肉質(zhì)細膩，潔白鮮嫩，無鱗無刺，無骨無腸，無腥，含多種營養(yǎng)成分。姚可成在《食物本草》中評價之為“利水，潤肺，止咳”，《醫(yī)林纂要》中也有“補肺清金，滋陰，補虛勞”之說。

離子色譜法可用于對啤酒、白酒、蔬菜等樣品中常見無機陰離子的測定，歐盟將離子色譜法規(guī)定為肉制品中亞硝酸鹽檢測的標準方法。而用于對銀魚樣品中亞硝酸鹽含量的測定，則尚未見諸報道。試樣經(jīng)粉碎，沉淀蛋白質(zhì)、除去脂肪和凈化后，以氫氧化鉀溶液為淋洗液，陰離子交換柱分離后進行定量，具有選擇性好，靈敏度高的特點，具有較強的實用性和可操作性。

1 儀器試劑

1.1 儀器

離子色譜儀（ZCS-1100）;超聲波清洗儀;022 μm 水性濾膜針頭濾器;凈化柱。

1.2 試劑

超純水（電阻率>18.2 MΩ·cm）;NO2-標準液（1 000 mg/L，水基體）;NO3-標準液（1 000 mg/L，水基體）;乙酸（3 %）; NO2-和NO3-混合標準使用液（10.0 mg/L NO2-和10.0 mg/L NO3-）。

2 實驗部分

2.1 色譜條件

色譜柱：Dionex IonPac AS11-HC 4 mm×250 mm（帶IonPac AG11-HC 型保護柱4 mm×50 mm）。

流動相：DionexEG50自動淋洗發(fā)生器，OH-型。

淋洗液：氫氧化鉀，濃度為20 mmol，等度洗脫。

抑制器：DionexASRS 4 mm陰離子抑制劑，外加水抑制模式，抑制電流100 mA。

檢測器：電導(dǎo)檢測器，檢測池溫度為 30 ℃。

進樣體積：25 μL。

2.2 標準曲線

表1 標準曲線配制

進樣序號

保留時間

/min

峰面積/

μS·min-1

峰高/μS

ST1

6.014

0.023

0.125

ST2

6.014

0.038 9

0.215

ST5

6.014

0.101 2

0.567

ST10

6.017

0.207 7

1.173

ST20

6.007

0.433 5

2.447

移取亞硝酸鹽標準使用液，加水稀釋，制成系列標準溶液，含亞硝酸根離子濃度為0.00 mg/L、0.10 mg/L、0.20 mg/L、0.50 mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L，從低到高濃度依次進樣，得到上述各濃度標準溶液的色譜圖。以亞硝酸根離子濃度（mg/L）為橫坐標，以峰面積為縱坐標，繪制標準曲線[4]。結(jié)果見表1、圖1、圖2。

圖1 標準曲線（Correlation coefficient：0.998 9）

圖2 NO2- 濃度為0.5 mg/L時色譜圖

2.3 實驗步驟

用天平稱取樣品，破碎，加入少量二次水，超聲使充分溶解，經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)、除去脂肪后，將上清液倒入25 mL容量瓶中，定容，混勻后過C18柱后過0.22 μm水性濾膜針頭濾器，棄去初濾液，使用離子色譜儀，外標法測得亞硝酸鹽的含量。

2.4 樣品檢測與結(jié)果分析

依據(jù)前述方法，對銀魚樣品進行測定，所得結(jié)果見圖3、表2。

圖3 銀魚NO2-濃度色譜圖

表2 銀魚制品NO2-濃度峰積分報告

序

號

保留時

間/min

峰

名稱

峰面

積/μS

·min-1

樣品

量/mg

·kg-1

Average

/mg

·kg-1

RSD

/%

1

5.82

NO2-

0.078

0.366 4

2

5.82

NO2-

0.082

0.385 9

3

5.82

NO2-

0.081

0.381 0

4

5.82

NO2-

0.079

0.371 30.3762.0

對銀魚樣品中亞硝酸鹽含量進行檢測，平均含量為為0.376 2 mg/kg，而我國強制性衛(wèi)生標準中規(guī)定肉類食品中亞硝酸鹽的殘留量不得超過50 mg/kg，符合食品安全要求。

2.5 可靠性試驗

2.5.1 空白測試 用二次水代替樣品，其余步驟與上述實驗步驟一致，得空白含量為0.011 7 mg/kg，結(jié)果見圖4，表3。

圖4 空白NO2-濃度色譜圖

表3 空白NO2-濃度峰積分報告

序號

時間

/min

峰名稱

峰面積/

μS·min-1

峰高

/μS

樣品量/

mg·kg-1

1

6.01

NO2-

0.003

0.012

0.011 7

2.5.2 加標回收 添加標樣，其余步驟與實驗步驟一致，進行回收率實驗，結(jié)果見圖5，表4。實驗的平均回收率為99.56%，RSD為0.7%，表明方法具有較高的準確度。

圖5 Add色譜圖

3 討論

本實驗以地產(chǎn)銀魚為樣品，采用離子色譜法測定亞硝酸鹽的含量，結(jié)果為0.376 2 mg/kg，符合食品安全要求;方法的平均回收率為99.56%，RSD為0.7%，具有較高的準確度，可以作為太湖水域的系列水產(chǎn)品常規(guī)監(jiān)測的方法。

參考文獻：

[1]

中華人民共和國衛(wèi)生部. GB5009.33—2010.食品安全國家標準[s].北京：中國標準出版社，2010

[2] 郭麗娜，邢宇，胡婧.肉類制品中亞硝酸鹽殘留量的實驗測定分析[J].科技創(chuàng)新導(dǎo)報，2013（13）：12

[3] 周文斌.泡菜中亞硝酸鹽測定方法研究[J].食品科學(xué)，2006（02）：241-243

[4] 羅哲珠，丘婷婷，范江平，等.離子色譜法對食品中亞硝酸鹽檢測的研究和討論[J].廣東化工，2013（12）：81-182+195

（收稿日期：2014-11-26）