胡西洲+彭西甜+王小飛+等

摘要：建立了一種新型固相支撐液液萃取-氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)田水中戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑農(nóng)藥殘留的方法。樣品溶液經(jīng)硅藻土固相支撐液液萃取柱（SLE）吸附后，采用乙酸乙酯洗脫，收集的洗脫液經(jīng)濃縮后用氣相色譜/質(zhì)譜儀進(jìn)行測(cè)定。戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑的質(zhì)量濃度與其峰面積在0.05～5.00 mg/L內(nèi)線性關(guān)系良好，最小檢出量分別為8.26×10-12 g、4.38×10-11 g（S/N=5），樣品溶液的添加回收率為80.0%～110.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.17%～13.97%。該方法具有操作簡(jiǎn)便、快速、高效、試劑用量少、靈敏度高等特點(diǎn)。

關(guān)鍵詞：支撐液液萃取；氣相色譜-質(zhì)譜；戊唑醇；苯醚甲環(huán)唑；農(nóng)藥殘留

中圖分類(lèi)號(hào)：O657.7+1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）22-5534-02

苯醚甲環(huán)唑?qū)偃蝾?lèi)殺菌劑，具有高效、廣譜、低毒、用量低等特點(diǎn)，其內(nèi)吸性極強(qiáng)，作用機(jī)理獨(dú)特，是三唑類(lèi)殺菌劑的優(yōu)良品種。隨著國(guó)內(nèi)原藥廠家的增加和產(chǎn)能擴(kuò)張，苯醚甲環(huán)唑逐漸成為國(guó)內(nèi)主要?dú)⒕鷦┲?。此外，其?fù)配產(chǎn)品也呈多元化發(fā)展，多與嘧菌酯、丙環(huán)唑、醚菌酯等進(jìn)行復(fù)配，根據(jù)農(nóng)藥工業(yè)網(wǎng)的消息，截至2013年8月底，新登記苯醚甲環(huán)唑產(chǎn)品的企業(yè)達(dá)68家，共計(jì)90個(gè)產(chǎn)品[1]。戊唑醇也屬三唑類(lèi)殺菌劑，其作用機(jī)制是抑制羊毛甾醇到麥角甾醇的生物合成，特點(diǎn)是強(qiáng)內(nèi)吸性，兼有保護(hù)和治療作用，具有持效期較長(zhǎng)，高效等特點(diǎn)[2]。

由于此類(lèi)農(nóng)藥的大量使用，對(duì)產(chǎn)地水體造成了不同程度的污染。GB 2763-2012中規(guī)定戊唑醇、苯醚甲環(huán)唑的每日允許攝入量（ADI）分別為0.03、0.01 mg/kg·bw[3]。因此，建立一種新型快速檢測(cè)田水中戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑農(nóng)藥殘留的方法顯得非常必要。

支撐液液萃?。⊿upported liquid-liquid extraction， SLE）于1997年由Johnson等在傳統(tǒng)的液液萃取原理基礎(chǔ)上提出的一種新型樣品前處理技術(shù)[4]。它是以大比表面積、惰性、多孔填料為萃取介質(zhì)，克服傳統(tǒng)液液萃取過(guò)程中操作繁瑣、溶劑消耗大、費(fèi)時(shí)、易乳化等問(wèn)題。溶液樣品首先被多孔填料吸附，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的靜置，再用與溶液不互溶的有機(jī)溶劑把目標(biāo)物洗脫下來(lái)，從而達(dá)到萃取目的。該方法現(xiàn)已逐漸用于食品及生物樣品中藥物和代謝物分析[5-9]。本研究采用固相支撐液液萃取技術(shù)對(duì)水稻產(chǎn)地的水體進(jìn)行預(yù)處理，建立了氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定田水中戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑農(nóng)藥殘留的新方法，結(jié)果表明該方法高效、快速、準(zhǔn)確、適用性強(qiáng)。

1 材料與方法

1.1 試劑與材料

乙酸乙酯、丙酮（HPLC級(jí)，Tedia公司）；去離子水由Barnstead超純水機(jī)制備。

Cleanert SLE硅藻土萃取柱（14.5 g/60 mL，博納艾杰爾科技有限公司）；戊唑醇、苯醚甲環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 000 mg/L，農(nóng)業(yè)部天津環(huán)保所）。

1.2 樣品制備

量取已過(guò)濾的田水20 mL，倒入SLE萃取柱中，平衡15 min，再用20 mL乙酸乙酯進(jìn)行洗脫，重復(fù)3次，收集所有萃取液于雞心瓶中，在40 ℃水浴中旋轉(zhuǎn)濃縮至干，再用2 mL丙酮溶解，用于氣相色譜-質(zhì)譜儀測(cè)定。

1.3 儀器工作條件

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（Agilent公司）： 6890N型氣相色譜儀，配5973i型質(zhì)量選擇檢測(cè)器，以及7683型自動(dòng)進(jìn)樣器。DB-5MS型毛細(xì)管氣相色譜柱（5%苯基-95%甲基聚硅氧烷，30 m×0.25 mm ID×0.25 μm膜厚）。載氣，氦氣（武漢鋼鐵公司，純度為99.999%）；柱流速，1 mL/min；進(jìn)樣口溫度，250 ℃；柱溫程序：初始溫度150 ℃，保持2 min，以6 ℃/min的速率，升溫至290 ℃，保持8 min；進(jìn)樣量，1 μL（不分流進(jìn)樣）；

離子化方式，EI；電子能量，70 eV；接口溫度，290 ℃；離子源溫度，230 ℃；四極桿溫度，150 ℃；質(zhì)譜檢測(cè)方式：選擇離子監(jiān)測(cè)（SIM）。戊唑醇：250*、252、163；苯醚甲環(huán)唑：323*、325、202。

2 結(jié)果與分析

2.1 固相支撐液液萃取條件的優(yōu)化

固相支撐液液萃取作為一種新前處理技術(shù)，樣品溶液在柱中的平衡時(shí)間是影響其回收率的重要參數(shù)，本試驗(yàn)分別測(cè)定樣品溶液在不同平衡時(shí)間下對(duì)萃取效率的影響。結(jié)果表明，平衡15 min溶液能與填料形成牢固的支撐體，有較好的萃取效率。另外，對(duì)樣品溶液體積也進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明，溶液體積過(guò)大導(dǎo)致填料吸附飽和，多余溶液滯留在填料上方，選擇20 mL樣品溶液保證溶液在填料上完全被吸附。優(yōu)化了不同體積乙酸乙酯的解吸效率，每次用量為20 mL，分別考察1、2、3次時(shí)各藥物的回收率，結(jié)果表明，當(dāng)解吸3次時(shí)各藥物均能完全被解吸。

2.2 工作曲線和方法檢出限

在給定的色譜條件下，戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑可達(dá)到基線分離。準(zhǔn)確稱取適量戊唑醇、苯醚甲環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)品，以丙酮配制成濃度為10 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，再依次將其稀釋成0.05、0.20、0.50、2.00、5.00 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作液，取以上標(biāo)準(zhǔn)工作液各1 μL進(jìn)樣檢測(cè)，以峰面積對(duì)質(zhì)量濃度進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程為：y=1 374.49 + 47 988.64x，R2=0.999 1（苯醚甲環(huán)唑）；y=-7 530.10+108 122.00x，R2=0.999 8。戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑的最小檢出量為8.26×10-12 g、4.38×10-11 g（S/N=5）。戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑的標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖見(jiàn)圖1。

2.3 添加回收試驗(yàn)

采用空白水樣標(biāo)準(zhǔn)加入法進(jìn)行回收率試驗(yàn)，添加2個(gè)水平，每個(gè)水平平行測(cè)定5次，回收率結(jié)果見(jiàn)表1，戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑的添加回收率為80.0%～110.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.17%～13.97%。表明該分析方法回收率高、重現(xiàn)性好。endprint

3 小結(jié)與討論

固相支撐液液萃取柱填料是經(jīng)過(guò)高度改良具有高比表面積的多孔硅藻土，當(dāng)加入樣品溶液后，樣品溶液迅速在填料表面擴(kuò)散并被吸收，形成特有的萃取支撐骨架，再將有機(jī)溶劑通過(guò)該柱時(shí)，分析物即被萃取。應(yīng)用固相支撐液液萃取與氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定田水中戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑農(nóng)藥殘留的方法具有簡(jiǎn)單、分析時(shí)間短、溶劑消耗少、回收率高、結(jié)果重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，適合實(shí)驗(yàn)室批量樣品的檢測(cè)。試驗(yàn)結(jié)果表明，戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑的質(zhì)量濃度與其峰面積在0.05～5.00 mg/L內(nèi)線性關(guān)系良好，最小檢出量分別為8.26×10-12 g、4.38×10-11 g（S/N=5），添加回收率為80.0%～110.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.17%～13.97%。

參考文獻(xiàn)：

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[2] 劉傳德，王培松，王繼秋，等.三唑類(lèi)殺菌劑及其在小麥病害防治中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].山東農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）， 2005，36（1）：157-160.

[3] GB 2763-2012.食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量[S].

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[8] 祝偉霞，袁 萍，楊冀州，等.固相支撐液液萃取-平行蒸發(fā)前處理技術(shù)測(cè)定動(dòng)物源性食品中4種硝基呋喃類(lèi)代謝物[J].食品科技，2011，36（2）：300-303.

[9] 李曉飛，唐 磊，羅永此，等.固相支撐液液萃取-氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定血液中8種苯二氮卓類(lèi)藥物[J].刑事技術(shù)，2014（2）：27-29.

（責(zé)任編輯 周有祥）endprint

3 小結(jié)與討論

固相支撐液液萃取柱填料是經(jīng)過(guò)高度改良具有高比表面積的多孔硅藻土，當(dāng)加入樣品溶液后，樣品溶液迅速在填料表面擴(kuò)散并被吸收，形成特有的萃取支撐骨架，再將有機(jī)溶劑通過(guò)該柱時(shí)，分析物即被萃取。應(yīng)用固相支撐液液萃取與氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定田水中戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑農(nóng)藥殘留的方法具有簡(jiǎn)單、分析時(shí)間短、溶劑消耗少、回收率高、結(jié)果重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，適合實(shí)驗(yàn)室批量樣品的檢測(cè)。試驗(yàn)結(jié)果表明，戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑的質(zhì)量濃度與其峰面積在0.05～5.00 mg/L內(nèi)線性關(guān)系良好，最小檢出量分別為8.26×10-12 g、4.38×10-11 g（S/N=5），添加回收率為80.0%～110.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.17%～13.97%。

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固相支撐液液萃取柱填料是經(jīng)過(guò)高度改良具有高比表面積的多孔硅藻土，當(dāng)加入樣品溶液后，樣品溶液迅速在填料表面擴(kuò)散并被吸收，形成特有的萃取支撐骨架，再將有機(jī)溶劑通過(guò)該柱時(shí)，分析物即被萃取。應(yīng)用固相支撐液液萃取與氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定田水中戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑農(nóng)藥殘留的方法具有簡(jiǎn)單、分析時(shí)間短、溶劑消耗少、回收率高、結(jié)果重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，適合實(shí)驗(yàn)室批量樣品的檢測(cè)。試驗(yàn)結(jié)果表明，戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑的質(zhì)量濃度與其峰面積在0.05～5.00 mg/L內(nèi)線性關(guān)系良好，最小檢出量分別為8.26×10-12 g、4.38×10-11 g（S/N=5），添加回收率為80.0%～110.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.17%～13.97%。

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