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急性腦梗死血小板聚集及活化指標(biāo)的變化及臨床意義

但剛,江忠勇,劉媛,胡莉娜,熊杰

[摘要]目的觀察急性腦梗死(acute cerebral infarction,ACI)患者血小板聚集性及血小板活化指標(biāo)P選擇素、膜GPⅡb/Ⅲa的變化,探討活化血小板在ACI發(fā)病中的作用。方法選取75例急性腦梗死患者作為ACI組,選取78例健康體檢者作為正常對(duì)照組。利用血小板聚集測(cè)試儀、流式細(xì)胞儀,檢測(cè)兩組對(duì)象血小板聚集率及血小板表面表達(dá)的P選擇素、膜GPⅡb/Ⅲa等活化指標(biāo)含量。結(jié)果與正常對(duì)照組比較,ACI患者組的血小板聚集率明顯升高(P<0.05),血小板表面表達(dá)的P選擇素、膜GPⅡb/Ⅲa明顯升高(P<0.05)。結(jié)論ACI患者血小板活化水平明顯升高,聚集功能明顯增強(qiáng),患者處于高凝狀態(tài),是導(dǎo)致ACI發(fā)生的重要原因之一。

[關(guān)鍵詞]腦梗死；血小板聚集；P選擇素；GPⅡb/Ⅲa

急性腦梗死(acute cerebral infarction,ACI)主要是由于供應(yīng)腦部血液的動(dòng)脈出現(xiàn)粥樣硬化和血栓形成,導(dǎo)致血流減慢,使血小板極易與粥樣斑塊發(fā)生黏附。一旦腦部小動(dòng)脈循環(huán)出現(xiàn)缺血、缺氧,將會(huì)進(jìn)一步引起腦組織的軟化壞死,其中以ACI最為常見。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),ACI發(fā)病率約50%~80%[1],致殘率極高。

在ACI的病理生理過程中,血小板活化起著非常重要的作用,而高血壓、糖尿病、肥胖、脂代謝異常、動(dòng)脈粥樣硬化等也是腦血管病的重要危險(xiǎn)因素,與血小板活化關(guān)系密切[2]。本研究應(yīng)用血小板聚集儀檢測(cè)血小板聚集功能,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)血小板活化指標(biāo)(血小板P-選擇素和膜GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物),研究這些指標(biāo)在ACI患者體內(nèi)的含量變化,并與正常對(duì)照組比較,探討ACI患者血小板聚集及活化相關(guān)指標(biāo)的變化及臨床意義。

1對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象收集我院神經(jīng)內(nèi)科2012年8月~2014年4月收治的急性腦梗死的住院患者病例資料,共75例。納入標(biāo)準(zhǔn)：ACI診斷均符合2002年中國(guó)腦血管病診斷與鑒別診斷防治指南的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]：通過CT或MRI證實(shí)為腦梗死,急性發(fā)病并在發(fā)病后36 h內(nèi)入院治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：腦血管畸形、房顫、自身免疫性疾病及惡性腫瘤患者；近期服用過抗血小板藥；近期有感染性疾病或外周血白細(xì)胞升高。75例中,男性42例,女33例,年齡37~88(65.8±12.1)歲。另選取同期來我院進(jìn)行健康檢查的正常人78例為對(duì)照組,排除腦血液病、高血壓肝腎疾病、腫瘤等疾病患者,其中男41例,女37例,年齡30~79(66.8±19.2)歲。兩組性別、年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2標(biāo)本采集患者入院后溶栓治療前,抽取臥位外周靜脈血,血小板聚集功能檢測(cè)抽取靜脈血2.7 ml,109 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝；血小板P-選擇素和膜GPⅡb/Ⅲa檢測(cè)抽取靜脈血各2 ml,EDTA-K2抗凝。對(duì)照組體檢時(shí)采集標(biāo)本,方法同上。

1.3檢測(cè)指標(biāo)

1.3.1血小板聚集功能檢測(cè)采用美國(guó)Helena Laboratories公司生產(chǎn)的血小板聚集儀(型號(hào)：Agg RAM)進(jìn)行檢測(cè),所有檢測(cè)試劑均為該儀器配套試劑,誘導(dǎo)劑為腺苷二磷酸(ADP),ADP最終誘導(dǎo)濃度5 μmol/L。嚴(yán)格按照試劑操作步驟進(jìn)行檢測(cè)。

1.3.2血小板活化指標(biāo)-P選擇素、膜GPⅡb/Ⅲa檢測(cè)選用美國(guó)Beckman Coulter公司生產(chǎn)的Epics XL流式細(xì)胞儀,試劑為單克隆抗體:CD62P PE為藻紅蛋白標(biāo)記的抗P選擇素的McAb,PAC-1FIT C為異硫氰酸熒光素標(biāo)記的抗GPⅡb/Ⅲa(即纖維蛋白原受體,Fib-R)McAb,均購自美國(guó)BD公司。嚴(yán)格按照試劑操作步驟進(jìn)行檢測(cè)。

2結(jié)果

與正常對(duì)照組比較,ACI組血小板聚集率明顯升高(P<0.05),血小板P選擇素和血小板膜GPⅡb/Ⅲa也明顯升高(P<0.05)。見表1。

表1　兩組血小板聚集率、P選擇素和GPⅡb/Ⅲa表達(dá)變化的比較

注：與正常對(duì)照組比較,①P<0.05

3討論

血小板聚集功能是血小板的重要生理特性,是指血小板與血小板之間的黏附及聚集。血小板相互作用聚集成團(tuán),是參與止血和血栓形成的重要過程[4]。血小板聚集后能夠增強(qiáng)血栓的形成,而血栓又通過磷酸化進(jìn)一步激活血小板,被激活的血小板強(qiáng)烈促進(jìn)局部血栓的形成[5]。本組資料顯示,ACI患者血小板聚集功能與正常對(duì)照組比較,明顯增強(qiáng)(P<0.05),提示血小板聚集功能增強(qiáng)是ACI患者發(fā)病的重要因素之一。

通常情況下,P選擇素表達(dá)水平較低,甚至?xí)槐磉_(dá)[6]。P選擇素在多個(gè)病理生理過程中都發(fā)揮著重要的作用,如血栓形成、動(dòng)脈粥樣硬化等。有研究表明,在血栓前狀態(tài)存在血小板活化,P選擇素可增高。P選擇素水平增高,不僅反映血小板活化、內(nèi)皮功能受損,而且也反映了活動(dòng)性炎性反應(yīng),同時(shí)也是斑塊不穩(wěn)定的敏感指標(biāo)[7]。本研究結(jié)果顯示,腦梗死患者血小板P選擇素和膜GPⅡb/Ⅲa也明顯升高,表明它們與腦梗死的發(fā)生有內(nèi)在聯(lián)系。血小板P選擇素和膜GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物是血小板活化的重要指標(biāo),當(dāng)血小板活化之后,就會(huì)導(dǎo)致血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa復(fù)合物產(chǎn)生變化,有利于GPⅡb/Ⅲa與纖維蛋白原之間更好地結(jié)合[8]。因此，通過檢測(cè)GPⅡb/Ⅲa的表達(dá)量,可以更加精準(zhǔn)、及時(shí)地發(fā)現(xiàn)血小板是否活化。

活化血小板表達(dá)的膜糖蛋白參與血小板的黏附,在促進(jìn)血栓形成、腦梗死啟動(dòng)中起著重要作用[9]。本研究結(jié)果提示,血小板聚集功能和血小板P選擇素和GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物可作為血小板活化的敏感指標(biāo),在腦梗死的預(yù)防和診斷中占重要地位,可作為ACI輔助診斷及療效判定的參考指標(biāo)。

【參考文獻(xiàn)】

[1]中華神經(jīng)病學(xué)學(xué)會(huì).各類腦血管疾病診斷要點(diǎn)[J].中華神經(jīng)科雜志,1996,29(6):379-380.

[2]何來鵬,王欣.腦梗死急性期患者血小板膜GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物和P-選擇素的表達(dá)[J].廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2014,32(4):462-463.

[3]崔亮,鐘遠(yuǎn),燕虹,等.老年無癥狀多發(fā)性腔?；颊哒J(rèn)知功能與血小板聚集率之間的關(guān)系[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2011,21(8)：1052-1056.

[4]賀志安,張晨光,涂曉艷,等.急性腦梗死患者治療前后血液流變學(xué)及血小板聚集性的變化[J].中國(guó)臨床康復(fù),2006,10(28):55-57.

[5]沈慶樂,李培英,張存琪,等.腦血管意外患者的選擇素、組織因子、血液流變學(xué)的監(jiān)測(cè)及意義[J].高血壓雜志,2004,12(1):48-49.

[6]李天資,潘興壽,藍(lán)景生,等.老年高血壓伴高尿酸血癥患者血小板活化與纖溶功能的變化[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2010,32(22):2465-2467.

[7]梁智.P選擇素在缺血性腦血管病患者中的變化及臨床意義[J].中國(guó)社區(qū)醫(yī)師,2014,30(21):122-123.

[8]Verdelho A,Madureira S,Moleiro C,et al.White matter changes and diabetes predict cognitive decline in the elderly:the Ladis study[J].Neurology,2010,75(2):160-167.

[9]Holmes Dr Jr.,Kereiakes Dj,Kleiman Ns,et al.Combining antiplatelet and anticoagulant therapies[J].J Am CollCardiol,2009,54(2):95-109.

Changes and clinical significance of platelet aggregation and activation markers in patients with acute cerebral infarction

Dan Gang,Jiang Zhongyong,Liu Yuan,Hu Lina,Xiong JieDepartment of Laboratory,Clinical Trial and Medical Research and Service Center,General Hospital of Chengdu Military Command,Chengdu,Sichuan,610083,China

[Abstract]ObjectiveTo observe the changes of platelet aggregation and platelet activation markers P selectin and membrane GPⅡb/Ⅲa in patients with acute cerebral infarction(ACI)and study the role of platelet activation in the pathogenesis of ACI.MethodsPatients with ACI were selected to constitute an ACI group(n=75)and healthy subjects were selected to constitute a control group(n=78).Aggregation tester and flow cytometry were used to check the platelet aggregation and contents of activation markers expressed on platelet surface,including P selectin and membrane GPⅡb/Ⅲa.ResultsCompared with the control group,the platelet aggregation of the patients in the ACI group increased significantly(P<0.05),and P selectin and membrane GPⅡb/Ⅲa expressed on platelet surface increased significantly(P<0.05).ConclusionIt is one of the important reasons to cause the incidence of ACI that the level of platelet activation in patients with ACI becomes significantly higher,the aggregation function is enhanced obviously,or the patients are in hypercoagulable state.

[Key words]cerebral infarction;platelet aggregation;P selectin;GPⅡb/ⅢA

(收稿日期:2014-10-29)

文章編號(hào)1004-0188(2015)02-0124-03

doi:10.3969/j.issn.1004-0188.2015.02.004

中圖分類號(hào)R 743.32

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A

通訊作者:熊杰,E-mail：byx410@sina.com

基金項(xiàng)目:四川省衛(wèi)計(jì)委科研課題(140007)；國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)(2011AA02A111)
作者單位:610083 成都,成都軍區(qū)總醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)研究與保障中心檢驗(yàn)科