郭欣桐

(河北大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院 河北 保定 071000)

淺議維生素C保護(hù)糖尿病大鼠主動(dòng)脈的作用機(jī)制

郭欣桐

(河北大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院 河北 保定 071000)

目的：分析維生素C保護(hù)糖尿病大鼠主動(dòng)脈的作用機(jī)制。方法：隨機(jī)將通過鏈脲佐菌素腹腔注射法誘導(dǎo)建立的1型糖尿病大鼠模型分為包括糖尿病組和維生素C治療組在內(nèi)的造模組和正常對照組。連續(xù)治療4個(gè)月后對大鼠G-LDL、HbA1c、HDL、LDL、TC、TG、BG等指標(biāo)變化進(jìn)行觀察。麻醉處死大鼠后，對其主動(dòng)脈進(jìn)行分離，分析HE染色和免疫組織化學(xué)檢測在主動(dòng)脈內(nèi)膜FN表達(dá)情況。結(jié)果：造模組大鼠發(fā)生血脂異常和主動(dòng)脈病理形態(tài)改變情況。維生素C不會影響大鼠血糖，但可顯著降低G-LDL、HbA1c、LDL、TC、TG以及主動(dòng)脈纖維連接蛋白表達(dá)，并顯著升高HDL。結(jié)論：維生素C無明顯降糖功效，可通過降血脂及抑制主動(dòng)脈纖維連接蛋白表達(dá)形式的方式保護(hù)糖尿病大鼠主動(dòng)脈。

主動(dòng)脈;糖尿病大鼠;維生素C

根據(jù)大量臨床研究報(bào)告結(jié)果，可知脂代謝紊亂已經(jīng)成為DM(糖尿病)血管病變的獨(dú)立損傷危險(xiǎn)因素之一，DM大血管病變發(fā)生發(fā)展與血脂異常存在密切關(guān)聯(lián)。在人體血漿之中，維生素C是最有效的一種水溶性抗氧化劑，可將氧自由基有效清除，對自由基引發(fā)的氧化反應(yīng)進(jìn)行阻斷，確保生物可以不遭受氧化損傷或者過氧化損傷［1］。本文旨在分析維生素C保護(hù)糖尿病大鼠主動(dòng)脈的作用機(jī)制，現(xiàn)匯報(bào)如下:

1.資料與方法

1.1 一般資料

①研究對象:選擇某大學(xué)動(dòng)物部提供的50只2個(gè)月左右的雄性大鼠，對其進(jìn)行1周左右適應(yīng)性喂養(yǎng)后用于實(shí)驗(yàn)中。②試劑與儀器:維生素C(國藥準(zhǔn)字H20054964，陜西渭南華仁制藥有限責(zé)任公司)、日立全自動(dòng)生化儀、SP免疫組化染色試劑盒、手持式快速全血葡萄糖測試儀、兔抗鼠纖維連接蛋白、鏈脲佐菌素。

1.2 方法

①動(dòng)物造模方法:預(yù)養(yǎng)大鼠1周之后，使其保持12h空腹?fàn)顟B(tài)，50只大鼠中有38只注射1%SZT檸檬酸鈉緩沖液，另12只大鼠注射同等劑量的檸檬酸鈉緩沖液，然后采血進(jìn)行血糖測量，若血糖在16.7mmol/L之上則表示建立模型成功。排除死亡和造模失敗大鼠，本組研究共納入28只糖尿病大鼠。②正常對照組12只，造模組28只隨機(jī)分為糖尿病組14只以及維生素C治療組14只。維生素C治療組大鼠每天給予100mg/kg維生素C灌胃治療。為有效維持糖尿病大鼠生存和避免發(fā)生酮癥情況，糖尿病組大鼠間隔1日腹腔注射2-4U長效胰島素，通過斷尾取血方法檢測血糖，確保血糖波動(dòng)控制在25mmol/L范圍內(nèi)，實(shí)驗(yàn)時(shí)間為3個(gè)月。

1.3 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)

采用全自動(dòng)生化檢測儀對G-LDL、HbA1c、LDL、TC、TG、HDL等指標(biāo)進(jìn)行檢測。麻醉處死大鼠后，對其主動(dòng)脈進(jìn)行分離，按照免疫試劑盒的說明進(jìn)行操作，分析HE染色和免疫組織化學(xué)檢測在主動(dòng)脈內(nèi)膜FN表達(dá)情況。根據(jù)著色程度進(jìn)行判斷:無黃色表示陰性(-);淡黃色表示弱陽性(+);黃色表示陽性(++);深黃色或黃褐色表示強(qiáng)陽性(+++)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2.結(jié)果

造模組大鼠發(fā)生血脂異常和主動(dòng)脈病理形態(tài)改變情況。維生素C不會影響大鼠血糖，但可顯著降低G-LDL、HbA1c、LDL、TC、TG以及主動(dòng)脈纖維連接蛋白表達(dá)，并顯著升高HDL。

3.討論

據(jù)相關(guān)研究報(bào)告顯示，動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展與高血脂癥、血小板功能異常以及高血糖等多種疾病關(guān)系緊密，在高脂血癥的狀態(tài)下容易產(chǎn)生超氧陰離子，從而導(dǎo)致低密度脂蛋白氧化修飾成為動(dòng)脈粥樣硬化的高危因素。I、IV、V型膠原蛋白和FN是糖尿病大鼠主動(dòng)脈壁ECM的主要成分，在LN(層黏連蛋白)和蛋白多糖共同組成。在ECM諸多成分中，反應(yīng)迅速且持久的是FN，其在I、IV、V型膠原蛋白之前，膠原蛋白沉積的必須具備的條件，F(xiàn)N數(shù)量不斷增加，主動(dòng)脈的順應(yīng)性就會不斷降低，從而使主動(dòng)脈功能受到嚴(yán)重影響。糖尿病發(fā)病時(shí)，氧化應(yīng)激、生長因子以及高血糖、非酶唐化產(chǎn)物等不斷生長增多，均會在一定程度上刺激FN合成，并對其降解進(jìn)行抑制。血管肥厚是糖尿病大鼠主動(dòng)脈結(jié)構(gòu)重建的主要特征，膠原纖維面積開始出現(xiàn)進(jìn)行性增大，但彈性纖維面積卻在不斷減小，動(dòng)脈壁內(nèi)大量增加的FN，與動(dòng)脈粥樣硬化可能存在一定的關(guān)聯(lián)［2］。

本組研究表明，造模組大鼠發(fā)生血脂異常和主動(dòng)脈病理形態(tài)改變情況。維生素C不會影響大鼠血糖，但可顯著降低G-LDL、HbA1c、LDL、TC、TG以及主動(dòng)脈纖維連接蛋白表達(dá)，并顯著升高HDL。這種作用并不是因?yàn)榻档脱侵笠鸬?，分析其作用機(jī)制，可能包括以下兩方面:①糖基化蛋白量不斷增加的同時(shí)會產(chǎn)生大量自由基，糖尿病體內(nèi)氧化應(yīng)激不斷增加，但維生素C具有的強(qiáng)抗氧化性則能在一定程度上對高糖環(huán)境中氧化應(yīng)激過程的某些環(huán)節(jié)進(jìn)行抑制;②維生素C會抑制蛋白質(zhì)非酶糖基化反應(yīng)，控制AGEs不斷生成，其可通過發(fā)揮抗氧化糖基化的作用保護(hù)糖尿病大血管［3］。

綜上所述，維生素C無明顯降糖功效，可通過降血脂及抑制主動(dòng)脈纖維連接蛋白表達(dá)形式的方式保護(hù)糖尿病大鼠主動(dòng)脈。

［1］宋志霞，郭銀鳳，周敏，等.活性維生素D3通過抑制TRPC6表達(dá)發(fā)揮糖尿病腎病的保護(hù)作用［J］.東南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2014，33 (6)：683-690.

［2］梁應(yīng)平，胡衍輝，周志東，等.維生素C對糖尿病大鼠腎缺血-再灌注損傷的影響［J］.臨床麻醉學(xué)雜志，2011，27(5)：504-506.

［3］孫青，梁曉春，王普艷，等.筋脈通對糖尿病大鼠周圍神經(jīng)組織誘導(dǎo)型一氧化氮合酶和硝基酪氨酸表達(dá)的影響［J］.中國中藥雜志，2012，37(3)：348-352.

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1009-6019(2015)13-0074-02