胃泌素釋放肽前體在小細(xì)胞肺癌診斷及治療中應(yīng)用

黃梅香+梁藝華+任寧毅+葉儉

[摘 要] 目的：探討胃泌素釋放肽前體（ProGRP31-98）在小細(xì)胞肺癌（SCLC）臨床治療中的價值。方法：收集肺部腫瘤患者199例，健康對照人群84例，以ELISA方法檢測血清ProGRP31-98水平，并與NSE、CYFRA21-1、CEA進(jìn)行聯(lián)合檢測并分析其診斷SCLC敏感度和特異度。結(jié)果：結(jié)合病理及影像技術(shù)確診肺癌患者142例，其中鱗癌52例，腺癌40例，未分化癌1例，小細(xì)胞癌49例，其他良性病變者57例；49例SCLC患者中，血清ProGRP31-98中位值為610.94 pg/mL，明顯高于非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）組及健康對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）；49例SCLC中廣泛期患者ProGRP31-98水平高于局限期患者，二者中位值分別為959.83pg/mL和320.12pg/mL（P<0.01）；ProGRP31-98診斷敏感性為81.63%，特異性為94.62%， ProGRP31-98+NSE+CYFRA21-1+CEA聯(lián)合檢測的敏感性為91.84%，特異性為95.57%，約登指數(shù)為87.41，四個指標(biāo)聯(lián)檢敏感性特異性高于單獨檢測，但與ProGRP13-98+NSE比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論：血清ProGRP31-98檢測可作為SCLC診斷指標(biāo)，其水平能為SCLC治療效果、復(fù)發(fā)監(jiān)測等提供數(shù)據(jù)；與NSE聯(lián)合檢測可進(jìn)一步提高敏感性。

[關(guān)鍵詞] 胃泌素釋放肽前體；神經(jīng)元特異性烯醇化酶；小細(xì)胞肺癌

中圖分類號：R734.2 文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A 文章編號：2095-5200（2015）03-082-03

城市工業(yè)化，吸煙普遍化，使空氣霧霾日益嚴(yán)重，肺癌已成為我國首位惡性腫瘤死亡原因。肺癌主要分為小細(xì)胞肺癌（SCLC）和非小細(xì)胞肺癌（NSCLC），前者約占肺癌的15%-25%，是一種惡性化程度高，侵襲性生長較快，易發(fā)生廣泛性壞死和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的惡性腫瘤，大部分患者就診時已是晚期階段，預(yù)后較差，五年生存率極低。正確鑒別二者尤為重要，因為這2種類型的癌癥具有不同的預(yù)后：早期NSCLC可通過手術(shù)治愈，而SCLC則需要化療和放療。目前的影像學(xué)手段很難發(fā)現(xiàn)小的、散在腫瘤病灶上的SCLC，而腫瘤標(biāo)記物（TM）在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中已發(fā)揮重要作用，其對肺癌的輔助診斷、分型、分期、預(yù)后、療效等均具有重要意義[1]，1982年首次報道神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）可作為SCLC標(biāo)記物[2]，其應(yīng)用于臨床診斷已多年，但在局限性SCLC診斷中，常出現(xiàn)陽性率過低，標(biāo)本易受溶血、脂血影響。1978年McDonald等發(fā)現(xiàn)了胃泌素釋放肽（GRP）[3]，其屬于人體胃腸激素，穩(wěn)定性差，難檢測，而胃泌素釋放肽前體ProGRP（31-98）[4]則具有半衰期較長、更穩(wěn)定、可以進(jìn)行體外檢測的特點，其在SCLC中過度表達(dá)，SCLC患者中血液ProGRP水平明顯升高，在正常上皮中不表達(dá)或表達(dá)非常低，在良性肺疾病和上皮來源的腫瘤中低水平表達(dá)，本文就ProGRP（31-98）在小細(xì)胞肺癌診斷及治療的臨床應(yīng)用進(jìn)行分析。

1 材料與方法

1.1 研究對象

收集肺腫瘤科住院患者199例，男137例，女62例，年齡為21～69歲；確診肺癌患者142例，其中NSCLC93例（鱗癌52例，腺癌40例，未分化癌1例），SCLC小細(xì)胞癌49例（LD-SCLC組28人，ED-SCLC組21人），其他良性肺部病變患者57例；健康對照人群84例，男69例，女15例，年齡20～70歲；以上各組均排除腎功能衰竭等重大疾病等影響，各組間性別年齡差異不具統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 標(biāo)本處理

測定者用生化不抗凝真空采血管于清晨抽空腹靜脈血3mL，靜置30min后離心3000r/min轉(zhuǎn)15min后分離血清后進(jìn)行檢測，室內(nèi)溫度濕度在控，試驗前做室內(nèi)質(zhì)控，結(jié)果在控，CV值控制在10%以內(nèi)，所有標(biāo)本無溶血、脂血。

1.3 試劑及儀器

試劑為瑞典康乃格診斷有限公司96人份CanAg proGRP、CEA、NSE、CYFRA21-1 EIA試劑盒，所有操作按SOP文件進(jìn)行。廠家建議臨床參考范圍分別為：ProGRP<50 pg/mL；NSE<13ng/mL；CEA<5 ng/mL；CYFRA21-1<3.3 ng/mL。微板振蕩器為EYM-BIO水平振蕩儀，振蕩強度應(yīng)從弱到強?？v向振動約200次/min， 擺動700-900次/min。洗板機為新波EYM-BIO洗板機，設(shè)定自動循環(huán)清洗6次，每次浸泡時間為15s。酶標(biāo)儀為雷杜RT-6000酶標(biāo)儀，雙波 長405/620 nm， 可讀 吸 光度 范 圍 0～3.0。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計分析軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行錄入、統(tǒng)計和分析，采用相應(yīng)設(shè)定量資料的t檢驗、χ2 檢驗，P>0.05為差異無統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05則認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組間血清ProGRP31-98、NSE水平對比

49例SCLC患者中，血清ProGRP31-98中位值為610.94 pg/mL，其中 ED-SCLC組ProGRP水平中位值為959.83 pg/mL，LD-SCLC組、NSCLC組、肺良性病變組、健康組分別為320.12pg/mL、30.17pg/mL、13.94pg/mL、13.81 pg/mL，經(jīng)非參數(shù)檢驗，各組間血清ProGRP、NSE水平差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），如下表1。

2.2 各組間血清ProGRP13-98及NSE檢測水平陽性率分析

NSCLC組與SCLC組間血清ProGRP13-98及NSE檢測水平陽性率分析可見，NSCLC組 CYFRA21-1陽性率較高，而SCLC組ProGRP13-98的陽性率為83.67%，NSE陽性率為71.4%，經(jīng)比較具有顯著性差異（P<0.05），如下表2。

2.3 ProGRP13-98、NSE、CYFRA21-1、CEA對檢測SCLC的敏感性和特異性分析

NSE，ProGR13-98，ProGRP13-98+NSE與ProGRP13-98+NSE+CEA+CYFRA21-1組對SCLC組敏感性和特異性見表3，四個指標(biāo)聯(lián)檢敏感性特異性高于單獨檢測，但與ProGRP13-98+NSE比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

2.4 SCLC患者臨床治療中ProGRP31-98水平分析

49例SCLC患者經(jīng)治療37例完全緩解者治療后為34.29 pg/mL（），與治療前比較ProGRP31-98水平明顯下降（P<0.01）， 5例無變化者治療前449.84 pg/mL，治療后452.23 pg/mL。治療前后差異無統(tǒng)計學(xué)意義，7例病情進(jìn)展者由治療前的522.05 pg/mL提高到831.95 pg/mL，ProGRP31-98水平明顯高于治療前（P<0.01）。

3 討論

按目前國際分類，可將SCLC分為局限期（Ⅰ期和Ⅱ期）和廣泛期（Ⅲ期和Ⅳ期），大部分的SCLC病患者就診時已是廣泛期，能早發(fā)現(xiàn)的腫瘤標(biāo)記物中，ProGRP近年來倍受關(guān)注。胃泌素釋放肽（GRP）是一種由27個氨基酸組成的類似蛙皮素肽類物質(zhì)，存在于胎兒及新生兒肺組織和原發(fā)性肺癌中，特別高表達(dá)于SCLC[5]組織，但由于GRP在血漿中半衰期很短，限制了其臨床應(yīng)用，而GRP前體（Pro-Gastrin-Releasing Peptide）31-98片段含量穩(wěn)定，經(jīng)過證明能代表GRP的水平，適用于早期臨床檢測及治療追蹤監(jiān)測，如上文結(jié)果：ED-SCLC組ProGRP水平中位值為959.83 pg/mL，而LD-SCLC組為320.12pg/mL，兩組間水平差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；除在肺癌患者組織中會有高表達(dá)外，ProGRP亦在神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)腫瘤中有所增高。目前，日本等國家已將ProGRP作為常規(guī)的體檢項目運用于臨床，用于吸煙者等高危人群普查。

本次實驗中，SCLC組ProGRP31-98+NSE+ CYFRA21-1+CEA聯(lián)合檢測的敏感性為91.84%，特異性為95.57%，約登指數(shù)為87.41，四者聯(lián)合檢測有效提高診斷率。血清ProGRP31-98檢測除可作為SCLC確診指標(biāo)外，還能用于監(jiān)測SCLC治療效果、復(fù)發(fā)和預(yù)后情況，是復(fù)發(fā)監(jiān)測敏感性最高的腫瘤標(biāo)志物之一，在治療過程中，其下降水平與治療療效呈正相關(guān)，并與影像學(xué)監(jiān)測有密切聯(lián)系[6-7]。治療后ProGRP水平保持穩(wěn)定或顯著升高，提示治療無效或預(yù)示肺癌復(fù)發(fā)，臨床可再制定方案；同時，作為肺癌預(yù)后評估的重要指標(biāo)，ProGRP13-98水平高則預(yù)示愈后不良；相關(guān)研究表明，與CEA、CYFRA 21-1、NSE、SCC等其他肺癌相關(guān)腫瘤標(biāo)志物相比，ProGRP13-98占有優(yōu)勢[8]，與NSE、CYFRA21-1、CEA聯(lián)合檢測可進(jìn)一步提高敏感性[9-13]。本研究提示四個指標(biāo)聯(lián)檢敏感性特異性高于單獨檢測，但與ProGRP13-98+NSE比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

綜上所述，由于小細(xì)胞肺癌組織來源及病程發(fā)展過程的復(fù)雜性，單一腫瘤標(biāo)志物的測定影響因素較多，因此臨床使用有一定局限性，選擇合適的腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行早期聯(lián)合診斷，于病程發(fā)展的追蹤、療效的評估、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移的監(jiān)測有諸多益處，以ProGRP31-98的高敏感度和高特異度，再加上NSE聯(lián)合檢測是較為理想的組合。

參 考 文 獻(xiàn)

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