譚江峽

[摘 要] 目的：探討外周血T淋巴細(xì)胞亞群與免疫球蛋白檢測在肺癌病情監(jiān)測、預(yù)后評(píng)估中作用。方法：選擇87例肺癌患者、70例肺部良性腫瘤患者和50例健康人群分別作為研究組、良性組和對(duì)照組；比較各組外周血T淋巴細(xì)胞亞群變化水平和免疫球蛋白含量。結(jié)果：研究組CD4+ CD25+、IgG、IgA水平顯著高于良性組和對(duì)照組（P<0.05），CD8+ CD28+水平顯著低于良性組和對(duì)照組（P<0.05）；研究組和良性組IgM顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。T淋巴細(xì)胞亞群水平與病理類型無關(guān)（P>0.05），與TMN分期、淋巴轉(zhuǎn)移有關(guān)（P<0.05）；相關(guān)性分析顯示肺癌患者外周血CD4+ CD25+細(xì)胞與IgG、IgA呈正相關(guān)關(guān)系（P<0.05），與CD8+ CD28+呈負(fù)相關(guān)關(guān)系（P<0.05）。結(jié)論：肺癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平和免疫球蛋白含量檢測，能夠作為評(píng)估肺癌病情、預(yù)后的指標(biāo)之一。

[關(guān)鍵詞] T淋巴細(xì)胞亞群；免疫球蛋白；肺癌；預(yù)后

中圖分類號(hào)：R713 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：2095-5200（2015）03-090-03

現(xiàn)代研究已證實(shí)，免疫功能在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用[1-2]。T淋巴細(xì)胞是體內(nèi)重要的免疫系統(tǒng)。研究顯示[3]T淋巴細(xì)胞的活化需要CD4、CD25、CD8、CD28的調(diào)節(jié)，這些調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞具有低反應(yīng)性和免疫抑制性等特點(diǎn)，在腫瘤細(xì)胞的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后中發(fā)揮著重要作用。免疫球蛋白與T淋巴細(xì)胞一樣，也是機(jī)體的重要防疫系統(tǒng)，相較于細(xì)胞免疫，體液免疫作用機(jī)制更為復(fù)雜。本研究通過分析肺癌患者外周血T淋巴細(xì)胞和免疫球蛋白的變化水平，探討其在肺癌病情、預(yù)后評(píng)估中價(jià)值，現(xiàn)將研究成果總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年7月至2013年12月我院收治的肺癌患者，納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴經(jīng)病理學(xué)、影像學(xué)檢測確診的初次原發(fā)性肺癌患者；⑵就診前未進(jìn)行相關(guān)抗腫瘤治療；⑶近3個(gè)月內(nèi)未使用免疫抑制劑；⑷取得患者知情。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴原發(fā)病灶為肺部以外的器官；⑵有嚴(yán)重并發(fā)癥者；⑶心、腎、肝等器官功能異常者。經(jīng)過篩選，87例患者符合標(biāo)準(zhǔn)，其中男51例，女36例；年齡28～69歲，平均（48.5±7.4）歲。病理分型腺癌47例，鱗癌29例，小細(xì)胞癌11例；按照腫瘤TMN分期：Ⅱ期27例，Ⅲ期43例，Ⅳ期17例；其中伴有淋巴轉(zhuǎn)移者47例。選取同期在我院治療的肺部良性腫瘤患者70例作為良性組，男43例，女27例；年齡31～74歲，平均（50.1±8.3）歲；其中肺血管瘤38例，炎性假瘤26例，肺錯(cuò)構(gòu)瘤6例。另調(diào)取同期在我院體檢的健康人群50例為對(duì)照組，男31例，女19例；年齡18～79歲，平均（49.7±9.1）歲。三組患者在性別、年齡等一般資料具有可比性（P>0.05）。

1.2 儀器與試劑

FITC標(biāo)記的鼠抗人CD4單克隆抗體、PE標(biāo)記的鼠抗人CD25單克隆抗體、PE標(biāo)記的鼠抗人CD8、CD28單克隆抗體均購自美國Becton Dickinson公司；儀器為BD FACSCalibur流式細(xì)胞儀；溶血?jiǎng)┵徸院贾菘禈渖锛夹g(shù)有限公司；貝克曼庫爾特IMMAGE 800特定蛋白分析儀。

1.3 檢測方法

清晨空腹抽取各組研究對(duì)象外周靜脈血3mL，放入抗凝管中，混勻后置于冰箱中保存待檢。檢測時(shí)取100μL全血，加入10μL CD4抗體、10μL CD25抗體、2μLCD8抗體，2μLCD28抗體，室溫避光混勻15min，再加入2mL溶血?jiǎng)?7℃溶解10min后立即上機(jī)檢測；圈定淋巴細(xì)胞為門內(nèi)細(xì)胞，要求每次獲取10000以上門內(nèi)細(xì)胞，計(jì)算CD4+ CD25+、CD8+ CD28+比值。另抽取患者全血3mL，高速離心分離血清，標(biāo)記后放入冰箱保存待檢。采用免疫散射比濁法測定血清免疫球蛋白含量，包括IgG、IgA和IgM。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有研究數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以x±s表示，獨(dú)立樣本采用t檢驗(yàn)分析樣本間差異，相關(guān)性采用Pearson檢驗(yàn)，以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組T淋巴細(xì)胞亞群與免疫球蛋白水平比較

研究組CD4+ CD25+、IgG、IgA水平顯著高于良性組和對(duì)照組（P<0.05），CD8+ CD28+水平顯著低于良性組和對(duì)照組（P<0.05）；研究組和良性組IgM顯著高于對(duì)照組，而研究組和良性組組間IgM水平相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表1。

2.2 肺癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平與臨床病理參數(shù)關(guān)系

T淋巴細(xì)胞亞群水平與病理類型無關(guān)（P>0.05），與TMN分期、淋巴轉(zhuǎn)移有關(guān)（P<0.05）；其中隨著肺癌浸潤程度加深，CD4+ CD25+水平逐漸升高，CD8+ CD28+水平逐漸降低；有淋巴轉(zhuǎn)移者CD4+ CD25+水平較高、CD8+ CD28+水平較低，見表2。

2.3 CD4+ CD25+與CD8+ CD28+、免疫球蛋白相關(guān)性分析

肺癌患者外周血CD4+ CD25+細(xì)胞與IgG、IgA呈正相關(guān)關(guān)系（P<0.05），與CD8+ CD28+呈負(fù)相關(guān)關(guān)系（P<0.05），與IgM無明顯相關(guān)性（P>0.05），見表3。

3 討論

腫瘤患者機(jī)體多伴有免疫功能異常，在腫瘤免疫中，細(xì)胞免疫和體液免疫均發(fā)揮著重要作用[4]。其中細(xì)胞免疫主要通過各T淋巴細(xì)胞亞群調(diào)節(jié)機(jī)體的各項(xiàng)免疫功能。根據(jù)表面抗原，可以將T淋巴細(xì)胞分為CD4亞群和CD8亞群[5-7]；薛旦旦[8]報(bào)道證實(shí)，CD8+ CD28+在病毒感染和腫瘤抵抗中起著重要作用，并承擔(dān)著機(jī)體免疫監(jiān)控和免疫防御作用。李敏[9]在研究中稱CD4+ CD25+能夠促進(jìn)細(xì)胞凋亡、抑制細(xì)胞增殖，在腫瘤免疫監(jiān)視、維持細(xì)胞穩(wěn)定性方面有著重要作用。

本研究中，研究組CD4+ CD25+水平顯著高于良性組和對(duì)照組，CD8+ CD28+水平顯著低于良性組和對(duì)照組，說明在肺癌的發(fā)生、發(fā)展中，機(jī)體的免疫系統(tǒng)發(fā)生了變化，整體處于免疫抑制作用，這與Critchley[10]報(bào)道結(jié)論相同。免疫球蛋白作為機(jī)體防御系統(tǒng)重要部分，在腫瘤監(jiān)視中，免疫球蛋白主要起到溶解、吞噬靶細(xì)胞作用[11-12]。本研究對(duì)腫瘤患者血清免疫球蛋白進(jìn)行檢測后發(fā)現(xiàn)，研究組IgG、IgA水平顯著高于良性組和對(duì)照組。免疫球蛋白屬于體液免疫，該免疫系統(tǒng)作用機(jī)制較為復(fù)雜，目前對(duì)其機(jī)制尚不完全清楚。本研究免疫球蛋白水平升高可能與機(jī)體產(chǎn)生腫瘤抗原有關(guān)，也可能是體液免疫作為腫瘤細(xì)胞免疫功能低下的代償作用[13]；我們對(duì)肺癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平與臨床病理參數(shù)的關(guān)系進(jìn)行探討后發(fā)現(xiàn)，T淋巴細(xì)胞亞群水平與TMN分期、淋巴轉(zhuǎn)移有關(guān)，而與病理類型無關(guān)。隨著肺癌分期增加，CD4+ CD25+水平逐漸升高，CD8+ CD28+水平逐漸降低；且有淋巴轉(zhuǎn)移者CD4+ CD25+水平較高、CD8+ CD28+水平較低。這說明T淋巴細(xì)胞狀態(tài)與肺癌病情的進(jìn)展及預(yù)后密切相關(guān)。我們推測可能是肺癌病情加重，腫瘤細(xì)胞增多，機(jī)體細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用會(huì)使免疫抑制狀態(tài)越來越明顯[14]。相關(guān)性分析也顯示肺癌患者外周血CD4+ CD25+細(xì)胞與IgG、IgA呈正相關(guān)，與CD8+ CD28+呈正相關(guān)，這也提示我們，可以通過檢測患者外周血T淋巴細(xì)胞作為評(píng)估肺癌病情的指標(biāo)之一。

綜上所述，肺癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平和免疫球蛋白含量檢測，能夠作為評(píng)估肺癌病情、預(yù)后的指標(biāo)；根據(jù)患者免疫狀態(tài)，制定相應(yīng)治療方案，對(duì)評(píng)估療效和預(yù)后具有重要作用。

參 考 文 獻(xiàn)

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