馮曉玲

（吉林師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院）

本實(shí)驗(yàn)將以任氏液作為灌流液人為地加入各濃度組織胺來改變兩棲類平滑肌收縮活動(dòng)的內(nèi)環(huán)境，從而觀察平滑肌收縮活動(dòng)的變化情況。

一、實(shí)驗(yàn)部分

1.實(shí)驗(yàn)材料

蟾蜍、1∶5000 磷酸組織胺、任氏液、生物信號(hào)采集系統(tǒng)、電熱浴、麥?zhǔn)显〔?、機(jī)械換能器、蛙類手術(shù)器械、滴管、燒杯。

2.實(shí)驗(yàn)方法

取皮膚濕潤(rùn)、喜愛活動(dòng)的健康蟾蜍一只，用雙毀髓法破壞蟾蜍的腦和脊髓，背位固定在蛙板上。打開體腔，觀察蟾蜍消化管的活動(dòng)情況。在十二指腸起始處將腸管結(jié)扎并從結(jié)扎線以上剪斷至20cm 處。用任氏液沖洗腸斷中的內(nèi)容物，再?gòu)闹虚g剪斷，每次腸斷長(zhǎng)約2cm，在腸斷的兩端分別結(jié)一個(gè)線套，一個(gè)用于掛在麥?zhǔn)显〔鄣囊易中喂苌希硪欢私Y(jié)一長(zhǎng)線，用于連接張力換能器。在放入離體平滑肌之前，將麥?zhǔn)显〔蹆?nèi)任氏液溫度控制在37～38℃，每取出一段腸后，迅速將其放入調(diào)節(jié)適溫打的任氏液中。張力換能器的輸出端與生物信號(hào)采集系統(tǒng)的一個(gè)輸入通道相連。固定結(jié)扎線與張力換能器使腸斷運(yùn)動(dòng)正常。打開計(jì)算機(jī)，開始記錄平滑肌收縮曲線。

3.實(shí)驗(yàn)觀察

（1）記錄離體平滑肌在灌流37～38℃任氏液后收縮曲線，觀察收縮頻率及幅度，作為對(duì)照。

（2）加入1∶5000 磷酸組織胺1～2 滴，記錄并觀察收縮活動(dòng)變化。

（3）等量任氏液換洗，待收縮活動(dòng)恢復(fù)正常后，加入1∶5000磷酸組織胺3～4 滴，記錄并觀察收縮活動(dòng)變化。

（4）等量任氏液換洗，待收縮活動(dòng)恢復(fù)正常后，加入1∶5000磷酸組織胺5～6 滴，記錄并觀察收縮活動(dòng)變化。

（5）等量任氏液換洗，待收縮活動(dòng)恢復(fù)正常后，加入1∶5000磷酸組織胺7～8 滴，記錄并觀察收縮活動(dòng)變化。

二、結(jié)果

消化道平滑肌在任氏液中收縮緩慢而不規(guī)則。向麥?zhǔn)显〔壑械渭尤敫鳚舛冉M織胺后發(fā)現(xiàn)收縮活動(dòng)逐漸依次增強(qiáng)，收縮曲線基線逐漸依次上移，收縮頻率逐漸依次加強(qiáng)。

三、討論分析

兩棲類消化道平滑肌，對(duì)于一些理化刺激敏感。組織胺，組織胺受體有H1～H4四種亞型，組織胺激活H1受體，通過G 蛋白而激活磷脂酶C，產(chǎn)生肌醇三磷酸與二酰甘油，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Ca2+增加，蛋白激酶C 活化，進(jìn)而引起了消化道平滑肌興奮，收縮頻率和強(qiáng)度加強(qiáng)。

［1］孫永久，黃玉芝.生理學(xué)實(shí)驗(yàn)［M］.北京大學(xué)出版社，2005.

［2］魏香，謝佐平,蘇付榮.生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)［M］.北京：清華大學(xué)出版社，2005.

［3］莫書榮.實(shí)驗(yàn)生理科學(xué)［M］.北京：科學(xué)出版社，2009.

指導(dǎo)教師：孟惠平