阿莫羅芬二元醇脂質(zhì)體體外透皮特性的研究

王 慧 張曉紅 張 燕 閻德勝 楊苗苗 權(quán) 偉 戴尊孝*

（西安市精神衛(wèi)生中心，陜西 西安 710061）

阿莫羅芬二元醇脂質(zhì)體體外透皮特性的研究

王 慧 張曉紅 張 燕 閻德勝 楊苗苗 權(quán) 偉 戴尊孝*

（西安市精神衛(wèi)生中心，陜西 西安 710061）

目的 制備阿莫羅芬二元醇脂質(zhì)體并對其進行體外評價。方法 采用注入法制備阿莫羅芬二元醇脂質(zhì)體，以包封率為指標(biāo)，考察不同比例的乙醇與丙二醇對其包封率的影響；采用Franz擴散池進行離體皮膚滲透實驗，測定接受液中阿莫羅芬的累計滲透百分比。結(jié)果 當(dāng)乙醇∶丙二醇（7∶3）時，其包封率最高為（90.18±3.21）%，且有較好的穩(wěn)定性。體外經(jīng)皮滲透實驗表明：乙醇∶丙二醇（7∶3）時，藥物的透皮量最大。結(jié)論 乙醇∶丙二醇（7∶3）時，二元醇脂質(zhì)體明顯挺高藥物的透皮量及穩(wěn)定性。

阿莫羅芬；二元醇脂質(zhì)體；包封率；體外釋放；經(jīng)皮滲透性

甲癬是真菌侵犯趾甲而引起的皮膚類傳染病，多表現(xiàn)為趾甲變厚。治療灰指甲一定要讓藥物能滲透到甲床下，殺滅真菌。乙醇脂質(zhì)體有很好的柔性，可攜帶藥物滲透到甲床下，殺滅真菌，是皮膚局部用藥較理想的載體[1]。阿莫羅芬為廣譜高效抗真菌藥，具有很強的殺菌活性。為此，本實驗研制阿莫羅芬二元醇脂質(zhì)體并通過體外透皮實驗研究體外釋藥及透皮行為。

1　儀器與材料

日本島津高效液相色譜系統(tǒng)（日本島津公司），JEM-1200EX型透射電鏡（日本電子公司），激光動態(tài)光散射儀（英國），德國Leica Tcs Sp2型激光共聚焦顯微鏡（Leica公司，德國），RYJ-6B型藥物透皮擴散試驗儀（上海黃海藥檢儀器廠），RC-3B藥物溶出儀（天津大學(xué)無限電廠制造），RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮醫(yī)械廠）。

鹽酸阿莫羅芬原料藥（重慶博騰制藥業(yè)，批號：101201），大豆磷脂（PC含量90%，常州四藥制藥有限公司，批號：1208S02），透析袋（截留分子量8000～14000，上海通善生物科技有限公司），昆明種小鼠（合格證號SCXK（甘）14-006）。

2　方法與結(jié)果

2.1阿莫羅芬二元醇脂質(zhì)體的制備：將阿莫羅芬與磷脂溶解于醇相中（乙醇、丙二醇不同比列混合），采用注入法[2]制備阿莫羅芬二元醇脂質(zhì)體。

2.2不同比例乙醇與丙二醇對二元醇脂質(zhì)體大小及包封率的影響，結(jié)果見表1。

由表1可見，當(dāng)乙醇：丙二醇=7∶3，此時包封率最高。

2.3含量測定

2.3.1測定方法的建立：VP-ODS C18柱（150 mm×4.6，5 μm，島津，日本）；流動相：甲醇-0.02 mol/L醋酸銨-三乙胺（30∶60∶0.1，v/v/v）；流速：1 mL/min；檢測波長：365 nm；進樣量：20 μL。

2.3.2標(biāo)準曲線的制備：精密稱取阿莫羅芬對照品20 μg，置于50 mL容量瓶，甲醇溶解，用甲醇稀釋適量對照品溶液，制成不同濃度（6.25～400 μg/L）對照品溶液。在上述條件下，依次進色譜柱。以濃度（C）為X軸，峰面積（A）為Y軸，進行線性回歸，得標(biāo)準曲線回歸方程：Y=87345X+35671，r2=0.9997，阿莫羅芬的濃度在6.25～400 μg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.3.3精密度試驗：精密量取適量阿莫羅芬對照品溶液，甲醇稀釋對照品溶液至低、中、高3種濃度，考察日內(nèi)及日間精密度，日內(nèi)平均精密度為2.03%，日間平均精密度2.18%。表明該方法精密度良好。

2.3.4回收率：將空白二元醇脂質(zhì)體置于5 mL容量瓶，無水乙醇分別稀釋、振蕩、離心、進樣測定。計算得回收率平均值為99.70%，RSD平均值為0.91%。該方法回收率良好。

2.4阿莫羅芬二元醇脂質(zhì)體包封率測定：精密量取阿莫羅芬二元醇脂質(zhì)體，溶解于無水乙醇中，搖勻，過微孔濾膜，進樣，高效液相測定藥物總濃度，計算總藥物質(zhì)量（H1），再精密量取阿莫羅芬二元醇脂質(zhì)體置于透析袋中，扎緊透析袋兩頭，放入磷酸鹽緩沖液中，攪拌、取樣、進樣，測定藥物濃度，計算藥物質(zhì)量（H2），計算乙醇脂質(zhì)體的包封率（EE%）。EE%=（H1–H2）/H1×100%。

2.5離體皮膚滲透實驗

2.5.1離體小鼠皮膚的制備：取健康小鼠，飼養(yǎng)一周，剪去背部毛，斷頸處死，立即剝離背部皮膚，去除皮下組織，生理鹽水沖洗、浸泡，貯藏與4 ℃冰箱中備用。

2.5.2體外經(jīng)皮滲透實驗[3]：本實驗在Franz擴散池中進行。供給室和接收室之間固定離體皮膚，磷酸鹽緩沖液為接受液。分別取不同二元醇脂質(zhì)體滴于與接受液接觸的離體皮膚上，并將接收池置于恒溫水浴中（36±2） ℃，電磁攪拌。于不同時間精密量取2 mL接受液，同時補充等量恒溫的磷酸鹽緩沖液。過濾、進樣測定含量，結(jié)果可知，不同二元醇脂質(zhì)體的滲透量有顯著差異，而乙醇∶丙二醇=7∶3時，藥物的透皮量最大。

2.6穩(wěn)定性試驗：阿莫羅芬二元醇脂質(zhì)體封裝于錐形瓶中，放于冰箱（4 ℃）及室溫下，每個月用動態(tài)光散射法測量樣品的粒徑及粒徑分布，同時電鏡觀察乙醇脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)，測定3個月后室溫放置包封率（85.89±5.87）%。結(jié)果表明本品穩(wěn)定性良好。

3　結(jié)論

注入法制備的二元醇脂質(zhì)體形狀均勻。當(dāng)乙醇∶丙二醇=7∶3時，藥物的透皮量最大，此時包封率最高（90.18±3.21）%，且室溫放置3個月穩(wěn)定性顯示良好。因而，阿莫羅芬二元醇脂質(zhì)體有望開發(fā)成為治療甲癬的有效制劑。

[1] Baker RW,Santus G,Fridman SV.Method and therapeutic system for smoking cessation [J].Drug Dev Ind Pharm,2002,26(5):721-725.

[2] Beletsi Z.Panagi,PLGA-mPEG nanoparticles of cisplatin: in vitro nanoparticle degradation,in vitro drug release and in vivo drug residence in blood properties[J].Control Release,2002,79(1/3):123-135.

[3] 齊憲榮,劉明輝,張克斌,等.硝酸益康唑脂質(zhì)體凝膠的釋放和經(jīng)皮滲透性研究[J ].中國新藥雜志,2001,10 (7):507-510.

Amorolfine Binary Ethosomes in Vitro Transdermal Peneatration

WANG Hui, ZHANG Xiao-hong , ZHANG Yan, YAN De-sheng, YANG Miao-miao, QUAN Wei, DAI Zun-xiao
(Xi'an Mental Health Center, Xi’an 710061, China)

Objective To prepare and evaluation amorolfine binary ethosomes. Methods Ethanol infusing method was used to prepare amorolfine binary ethosomes. Effects of different proportion of ethanol and propylene glycol on the entrapment efficiency. The release rate of drug in rat skin was determined by Franz diffusion cells. Results When ethanol∶propylene glycol (7∶3), the encapsulation rate was the highest (90.18±3.21)%, and has better stability. Transdermal experiments show that: ethanol:propylene glycol (7∶3), the largest amount of transdermal drug. Conclusion Ethanol:propylene glycol (7∶3), binary ethosomes was quite transdermal amount and high stability of drugs.

Amorolfine； Binary ethosomes； Encapsulation efficiency； Release； Pereutaoeous permeation

R914

B

1671-8194（2015）36-0012-02

表1不同比例乙醇與丙二醇對二元醇脂質(zhì)體大小及包封率的影響

NoAmorolfine(%,w/v)PC(%,w/v)ETOH:PGsize(nm)EE(%) 1 3 3 10∶0108±3.288.17±1.11 2 9∶1106±16.088.42±12.75 3 3 3 7∶3105±22.090.18±3.21 3 3 4 5∶5100±13.085.13±13.87 5 3 3 3∶7176±23.071.40±14.24 3 3 6 1∶9325±12.660.74±11.56 7 3 3 0∶10467±31.952.87±26/79 3 3